全血组织细胞基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/5/4 9:05:19星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

杭州昊鑫生物科技股份有限公司 htpp://www.hzhxbio.com 全血/组织/细胞基因组DNA快速提取试剂盒

目录号:DN10 目录编号 DN1001 DN1002 DN1003 DN1011 DN1012 DN1013 ?

适用范围:

适用于快速提取全血、各种动植物组织细胞基因组DNA ?

试剂盒组成、储存、稳定性:

保存 室温 室温 室温 室温 室温 室温 室温 -20℃ 室温 室温

包装单位 50次 100次 200次

50次(带蛋白酶K粉) 100次(带蛋白酶K粉) 200次(带蛋白酶K粉)

试剂盒组成 平衡液 裂解液TL 缓冲液BB 结合液CB 抑制物去除液IR 漂洗液WB 洗脱缓冲液EB 蛋白酶K粉 (可选)20mg/ml 吸附柱AC 收集管(2ml)

50次 5 ml 11 ml 10 ml 15 ml 25 ml

100次 10 ml 20 ml 20 ml 30 ml 50 ml

200次 20 ml 40 ml 40 ml 60 ml 100 ml

15 ml 25 ml 50 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 15 ml 20mg 50个 50个

15 ml 40mg 100个 100个

15 x 2 ml 80mg 200个 200个

本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。

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储存事项: 1.

裂解液TL、结合液CB、或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。 2.

为避免降低活性,方便运输,提供蛋白酶K为冻干粉状,收到后,可短暂离心后,加入1毫升灭菌水溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性,因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存,-20℃保存。 3.

避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。 ?

产品介绍:

独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的, 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。 ? 1. 2. 3.

产品特点:

不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等。 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。

多次柱漂洗确保高纯度,典型的产量200μl全血可提取出3-6μg,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9,长度可达30 kb -50kb,可直接用于PCR、Southern-blot和各种酶切反应。 4.

从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全,客户可根据需要选择购买。 5. ? 1.

典型的产量200μl全血可提取出3-6μg 基因组DNA。 注意事项:

所有的离心均在室温完成,使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机,如

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Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 3.

需要自备1XPBS(磷酸盐缓冲液),和异丙醇。

不同样品尤其疾病样品中白细胞数量差异可能非常大,因此产量的个体差异也可能非常大。 4. 5.

开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。

为了最佳效果,最好使用新鲜血液标本或者4℃存放少于3天的标本,不要使用反复冻融超过3次的标本,否则会严重降低产量。 ? 1.

关于平衡液的使用

介绍:核酸吸附硅胶膜柱子长期放置过程中会同空气中的电荷/尘埃发生反应而影响其核酸的结合能力。硅胶柱经平衡液预处理后可大大减少柱子中硅胶膜的憎水基团,提高核酸的结合能力。从而提高硅胶柱子回收效率或者产量。平衡液是强碱性溶液,若不小心碰到,请用大量自来水清洗。用完后需盖紧瓶盖,以免接触空气。室温保存。在保存过程中可能有沉淀生成,请加热至37℃使沉淀完全消失。 2.

使用方法:(临用前才预处理)取一个新的硅胶膜吸附柱子装在收集管中,吸取100μl的平衡液至柱子中。13000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中废液,将吸附柱子重新放回收集管。此时平衡液预处理柱子完毕。接后续的操作步骤。 ?

操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)

提示:第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入! 平衡液预处理吸附柱备用:

使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤,具体方法参见前文“关于平衡液的使用” 1.

全血

a. 取200ul新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液,放入1.5ml离心管。 如果全血起始量小于200μl,则用缓冲液BB补足到200μl。如果起始量介于

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