内容发布更新时间 : 2024/10/21 6:38:17星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
选修1 第2讲
1、某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。
KH2PONa2HPOMgSO4·7H4 4 2O 蛋白胨 1.0 g 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g (1)根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？________(填“能”或“不能”),原因是____________________________________________________
________________________________________________________________________。
(2)培养基用__________________法灭菌,培养皿用______法灭菌,待培养基冷却到______(填“20”“30”“40”或“50”)℃左右时,在____________附近倒平板,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止______________________________________。
(3)要统计每克土壤样品中活菌数目,宜采用____________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的________就能大约推测出样品中的活菌数。
(4)培养分解尿素的细菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是____________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)______________个。
【答案】(1)不能 培养基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源,不能选择出只以尿素为氮源的微生物(或培养基含蛋白胨,蛋白胨中含有氮元素)
(2)高压蒸汽灭菌 干热灭菌 50 酒精灯火焰 培养皿盖上的水珠落入培养基而造成污染
(3)(稀释)涂布平板 菌落数目
(4)将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生
(5)2.34×109
【解析】(1)据表分析,表中的蛋白胨可以为微生物的生存提供氮源,所以不能分离尿素分解菌,筛选纤维素分解菌需要以纤维素作为唯一的氮源。(2)微生物培养中的培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌,玻璃器皿可以使用干热灭菌;倒平板时需要培养基冷却至50 ℃左右时在酒精灯火焰旁进行,等平板冷却凝固后,将平板倒过来放置,可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基造成污染。(3)固体培养基上的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法,稀释涂布平板法适用于微生物的统计计数,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的菌落数目或平均菌落数能够推测样品中的活菌数。(4)检测培养基是否被污染,需要将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜的时间,观察培养基上是否有菌落产生,如果有菌落说明被污染,否则没有被污染。(5)依据公式得每克样品中菌落数＝C/V×M＝(234/0.1)×106＝2.34×109(个)。
2、据报道,某地空气样本中检测出A、B、C 三种抗生素的耐药性基因。只有存在于某种活菌中的耐药性基因才能感染人体。为研究此地空气中是否存在这些耐药性活菌,某研究小组做了以下实验,步骤如下。
①配制培养基并灭菌;
②制作无菌平板,并收集、培养空气中的活菌; ③对步骤②得到的活菌进行分离纯化; ④设置若干实验组和对照组,进行相关操作;
⑤将各组平板置于适宜温度的恒温箱中培养一段时间,观察菌落的生长情况。
回答下列问题： (1)
步
骤
①
中
的
灭
菌
方
法
是
__________________________________________________。
(2)
步
骤
③
中
接
种
的
方
法
是
________________________________________________。
(3)若步骤②中得到的菌落类型有5种,则步骤④中需要设计至少________
个
实
验
组
,对
实
验
组
的
操
作
是
______________________________________________________。
(4)若将所得菌落接种到含有________培养基中,形成的菌落呈________色,则表明可能存在大肠杆菌。从功能角度分析此培养基属于________培养基。
【答案】(1)高压蒸汽灭菌法 (2)平板划线法(或稀释涂布平板法)
(3)15 接种每种活菌的培养基中分别添加A、B、C抗生素 (4)伊红—美蓝 黑 鉴别