内容发布更新时间 : 2024/11/17 8:53:55星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

1、什么叫转基因植物？植物转基因技术的基本路线主要包括哪些？

利用DNA重组技术，在离体条件下对不同生物的DNA进行加工，并按照人们的意愿和适当的载体重新组合，再将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞中表达的植物。 植物转基因技术的基本路线 l 分离目的基因

l 目的基因与恰当的载体DNA形成重组DNA l 重组DNA的扩增

l 目的基因导入到受体细胞

l 筛选转化细胞，诱导产生转基因植株 l 转基因植株的大规模种植

2、外源基因导入植物的方法主要有哪些？

Y 物理方法：电击法、基因枪法(biolistic)、显微注射法、微激光束法 Y 化学方法：PEG介导法、脂质体介导法 Y 生物学方法：农杆菌介导法、花粉管通道法

3、运用已学的知识，如何全面分析获得的转基因个体（提示：包括外源基因是否整合，被插入位点分析，外源基因是否表达，表达量如何？等） 对转基因个体进行检测与鉴定的对象 ——报告基因 ——目的基因

(1)基因组水平的检测与鉴定（外源基因是否整合，被插入位点分析）：可以用PCR扩增结合Southern Blotting进行验证。

(2)基因的转录/表达水平的检测与鉴定(外源基因是否表达):可用RT-PCR法或者Northern Blotting。

(3)基因的翻译水平的检测与鉴定（表达量）：可用Western Blotting或者ELISA。对报告基因来讲，还可以利用报告基因的显色或发光特性进行选择与 鉴定

4、出现转基因沉默现象的可能原因分析。

(1)位置效应：指插入部位及其周围序列对外源基因的影响 (2)DNA甲基化：包括编码序列和启动子的甲基化

(3)重复序列诱发基因沉默：多拷贝串联重复序列易引起外源基因的失活； (4)共抑制（co-suppression）：具有部分同源性的外源基因和植物内源基因相互作用引起的沉默现象。