内容发布更新时间 : 2024/11/15 22:27:39星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

总糖测定

一、总糖标准曲线的绘制

1.蒽酮配制：取2g蒽酮溶解到体积分数98% H2SO4中，以98%H2SO4定容到1000ml，当日配

制使用。

2.取7支比色管，按下表数据0.1 mg/mL的木糖标准溶液和蒸馏水。

表2木糖标准溶液配制

编号

0（空白对照） 1 2 3 4 5 6

蒸馏水（ml） 2 1.8 1.6 1.4 1.2 0.8 0.4

木糖标准液（ml） 0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.2 1.6

木糖含量（μg） 0 20 40 60 80 120 160

3.在每一支试管中立即加入蒽酮试剂8 mL，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。自水浴重新煮沸起，准确煮沸10 min取出，迅速用流动水冷却至室温，在480 nm波长下以2.0 mL蒸馏水代替木糖标准液作为空白，迅速测其余各管吸光值。以标准木糖含量（μg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，作标准曲线。 二、样液总糖测定

吸取待测的溶液2 mL，加入蒽酮试剂8 mL，在100 ℃水浴中放置10 min，用自来水冷却至室温，用相同量的蒸馏水和蒽酮试剂作参比液，在480 nm 处测定吸光度，根据标准曲线计算所测木聚糖中总糖的含量。 三、计算

①总糖（μg）=查曲线所得总糖含量（μg）×（提取液总体积/测定时取用体积） ②总糖=查曲线所得总糖含量（μg）×（提取液总体积/测定时取用体积）/样品质量×100%