内容发布更新时间 : 2024/11/14 22:53:40星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
液无色后,用30%乙醇、60%乙醇和无水乙醇依次洗脱,每次2-3个柱体积,收集各洗脱液,点聚酰胺薄层板。
(四)芦丁的检识 1.颜色反应(选做)
① α-萘酚-浓硫酸(Molisch)试验:
取芦丁少许置于试管中,加乙醇1ml振摇,加α-萘酚试剂2~3滴振摇,倾斜试管,沿管壁徐徐加入0.5ml浓硫酸,静置,观察两层溶液界面变化,出现紫红色环者为阳性反应,表示试样的分子中含有糖的结构,糖和甙类均呈阳性反应,比较芦丁和槲皮素的不同。
② 盐酸-镁粉试验:
取芦丁少许置于试管中,加5%乙醇2ml,在水浴中加热溶解,滴加浓盐酸2滴,再加镁粉约50mg,即产生剧烈的反应。溶液逐渐由黄色变为红色。
③ 三氯化铁试验
取样品水或乙醇液,加入三氯化铁试剂数滴,观察颜色变化。 ④ 三氯化铝试验:
取芦丁少许置于试管中,加入甲醇1~2ml,在水浴中加热溶解,加1%三氯化铝甲醇试剂2~3滴,呈鲜黄色。以同样方法试验槲皮素。
⑤ 氢氧化钠试验:
取芦丁少许置于试管中,加水2ml振摇,观察试管中有无变化。滴加1%氢氧化钠溶液数滴,振摇使溶解,呈黄色澄清溶液。再加入1%盐酸溶液数滴使呈酸性反应,则溶液由澄清转为浑浊状态。
2.色谱检识
固定相:聚酰胺薄层板
样品:a. 芦丁标准品 b. 三种乙醇洗脱液 ; 展开剂:70%乙醇溶液,加2-3滴冰醋酸; 显色:
a. 可见光下观察色斑,再于紫外灯下观察荧光斑点; b. 喷洒AlCl3乙醇液后观察。
五、实验说明及注意事项
1.本实验采用碱溶酸沉法从槐米中提取芦丁,收率稳定,且操作简便。在提取前应注意将槐米略捣碎,使芦丁易于被热水溶出。槐花中含有大量粘液质,加入石灰乳使生成钙盐沉淀除支。pH应严格控制在8-9,不得超过10。因为在强碱条件下煮沸,时间稍长可促使芸香甙水解破坏,使提取率明显下降。酸沉一步pH为3-4,不宜过低,否则会使芸香甙形成盐溶于水,降低了收率。
2.芸香甙的提取方法除了用碱溶酸沉法外,还可利用芸香甙在冷水及沸水中的溶解度不同,采用沸水提取法。又报道将生产工艺改进为95%乙醇回流提取后回收醇得浸膏,然后将粗浸膏经除去脂溶性杂质后,用水洗净,过滤,干燥即得芸香甙,可提高收率6.96%,并降低了成本。因此可根据不同原料采用各种不同方法提取。
3. 实验过程中发生的颜色变化(提取液颜色、萃取液颜色、洗脱液颜色等均应在实验报告中详细记录)
六、思考题
1.本实验提取过程中应注意哪些问题?
2.根据芦丁的性质还可采用何种方法进行提取?简要说明理由。