内容发布更新时间 : 2024/12/24 4:12:10星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

1.3酸碱水解

原料药与制剂应在常温或更高温度条件下，以溶液状态进行酸碱水解破坏试验，酸碱种类和浓度的选择取决于药物本身的特点。

其中一种酸碱破坏试验方案为样品于室温条件下放置，在不同pH条件下破坏两周，并且破坏程度建议应不高于15%。

酸降解一般采用0.1mol/L-1.0mol/ L的盐酸或硫酸，碱降解采用0.1mol/L-1.0mol/ L的氢氧化钠或氢氧化钾溶液。

对于脂溶性药物，可选择惰性溶剂溶解药物，在选择助溶剂时，应考虑药物分子中存在的官能团不与助溶剂发生反应。

了解化合物的相关性质对于选择破坏条件是有用的，例如，一个化合物含有酯基，则它对碱是不稳定的，则可选择较低浓度的碱进行破坏，在不同时间点对样品进行测定，能够了解降解速率和区分一级、二级降解产物。

1.4氧化破坏

氧化破坏试验相对较复杂，过氧化氢应用较广泛，因为能够用它来模拟辅料中可能含有的过氧化物，其他氧化剂，如金属离子，氧气，以及自由基引发剂（例如，偶氮二异丁腈，AIBN）也可以应用。

氧化剂种类和浓度的选择取决于药物本身的性质。原料药在溶液状态下，制剂在溶液或固体状态下进行氧化破坏。

据报道,样品放置于室温,在中性条件下经浓度为0.1%到3%的过氧化氢破坏7天,最多能产生20%的降解产物。

在不同时间点对样品进行测定,以选择所需的降解水平,不同的降解条件会产生相同或不同的降解产物,降解的类型和程度取决于样品的官能团和降解条件。

2、分析方法 2.1试验方法

首选检测方法是反相高效液相色谱法，原因如下：与水和有机溶剂具体良好的相容性，准确度好，灵敏度高，能够检测极性化合物。通过选择合适的色谱柱、柱温，调节流动相的pH值，从而达到各峰的分离。

低保留，极性较大的杂质会在溶剂峰前出峰。梯度洗脱作为分析方法的一部分，流动相中有机相比例由低到高过度，能够检测出低保留极性化合物和高度保留的非极性化合物。

也可以用梯度方法对破坏样品进行检测,来评估目前的洗脱方法是否能够对样品进行有效的检测,选择的样品溶液和流动相应能充分反映和检测出药物本身、潜在杂质和降解产物。

破坏样品的制备方法应尽可能地模拟分析过程中所用的样品制备方法。对酸碱破坏样品溶液进行酸碱中和稀释是必要的。破坏样品的图谱应与空白溶液和未破坏样品的图谱进行对比，从而确定各降解产物的降解途径。

计算杂质含量时,应扣除空白峰,空白,未破坏样品和破坏样品的图谱均应显示所有的已知和未知杂质的含量。另外,手性化合物应该用手性分析手段来确定手性化合物的纯度和稳定性。

分析方法应有足够的灵敏度以检测出较低水平的杂质，（例如，应检测出0.05%浓度的杂质或者更低浓度的杂质），并且峰响应值应在线性范围内的峰响应值以下。

分析方法应能检测到稳定性研究过程中产生的所有杂质(浓度为报告限度浓度或更低),依据ICH的要求和稳定性研究结果，来决定降解产物是否应该被鉴定和界定。

常规检测方法(例如柱色谱法)或联用技术(例如,LC–MS,LC–NMR)均可应用于降解产物的鉴别和界定。通过使用这些技术可以更深入的了解杂质结构,以及了解各杂质是否存在基因毒性警示结构,并对这些杂质进行严格的控制。

还应注意的是，对在稳定性研究过程中产生的超过界定阈值限度的杂质应进行界定。

可以用不同的检测方法对各破坏样品进行检测(例如,紫外和质谱),所用的检测器应具有三维数据分析的能力,例如,二极管阵列检测器或质谱分析能够检测到光谱的非均匀性。

当主峰和杂质峰紫外吸收图谱相似或者系统噪音水平过高从而掩盖了杂质或降解产物时,二极管阵列检测器可进行多波长检测。

具有相同分子量和官能团的化合物(例如非对映异构体)会呈现出相似的紫外吸收图谱。这种情况下,需要改变色谱参数以实现色谱峰的分离。应选定最佳波长来检测和定量潜在杂质和降解杂质。

如果被分析物、杂质和降解产物紫外吸收没有重叠，则应对样品进行多波长检测。在方法开发时，应对汇总不同检测波长下杂质的信息以发现峰值分布的异同。

2.2峰纯度检测

峰纯度是一种方法开发的辅助工具，当不同化合物共同洗脱时，依据化合物的光谱特性来反映峰纯度指标。

未破坏样品和破坏样品的峰纯度或峰均匀性是根据二极管阵列检测器的光谱信息确立的。

用于确定峰光谱纯度的仪器软件，相关参数应按照生产厂商的说明书进行设置，并确定峰纯度检测时对色谱峰峰高的要求。