内容发布更新时间 : 2024/11/15 0:09:55星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

变产生或是失去一个酶切位点，可以造成限制性片段长度多态性 (RFLP).

15.高等动物线粒体基因组具有独特的特点：①母系遗传②线粒体DNA损伤后不易修复，突变率较高，可能与衰老及某些疾病有关。③遗传密码与通用遗传密码存在差别。

16.结构基因组学目的是在生物体的整体水平上测定出全部蛋白质分子、蛋白质－蛋白质、蛋白质与其他生物分子复合体的三维结构。

17. 双向凝胶电泳是利用蛋白质的等电点与分子量差异分离之，其第一向是等电聚焦 IEF；第二向是SDS-PAGE

18.蛋白质染色方法主要有考马斯亮蓝染色、银染（不含戊二醛）、荧光染色（Cy3, Cy5），放射性同位素标记等

19. 2-DE 的缺点是①难以有效分离极酸、极碱性蛋白质，极大、极小蛋白质，及低丰度蛋白质。②胶内酶解过程费时、费力，难以与质谱实现自动化联用。

20.鉴定与注释蛋白质的路线有，通过肽指纹图谱（PMF）和数据库搜寻匹配。目前应用最普遍的数据库是NRDB 和dbEST 数据库。PMF或二级质谱匹配检索常用搜索引擎是MASCOT。 21. 抗体芯可用于研究在不同生理状态或病理状态下蛋白水平的量变。其优点是微型化，集成化，高通量化。

22.影响生物大分子提取效果的因素有pH、盐浓度（离子强度）、温度、水解酶、搅拌与氧化、有机溶剂。

23.生物大分子的分离纯化的方法有，盐析法、有机溶剂沉淀法、透析、超滤。

24.无论是进行核酸结构还是功能研究，首先需要对核酸进行分离和纯化。核酸分离纯化的原则 一是保持核酸碱基序列的完整性。二是尽量清除其它分子的污染，保证核酸制品的纯度。 25. 核酸制备的技术路线包括：核酸的释放、核酸的分离和纯化、核酸的浓缩与沉淀。其中沉淀是浓缩核酸的最常用且高效的方法，其优点：①改变核酸的溶解缓冲液； ②重新调整核酸的浓度； ③去除溶液中某些盐离子与杂质

26.核酸分子中的碱基具有共轭双键结构因而可以吸收紫外线，其最大吸收波长为260nm，紫外分光光度法定量鉴定核酸要求核酸样品要较纯，无显著蛋白质、酚、琼脂糖及其他核酸污染。测定浓度应大于0.25 μg/ml

27.核酸在荧光染料溴化乙锭（EB）嵌入碱基平面后，本身无荧光的核酸在UV激发下发出红色荧光，且荧光强度的积分与溶液中核酸的含量呈正比。

28.紫外分光光度进行核酸纯度鉴定的方法主要通过A260与A280的比值来判定有无蛋白质的污染。在TE缓冲液中，纯DNA的A260/A280为1.8，纯RNA的比值为2.0。比值升高与降低均提示不纯。太高说明有降解或其他核酸干扰，太低说明蛋白质过多。

29.用EB等荧光染料示踪的核酸电泳结果可判定核酸制品的纯度。DNA分子较RNA大得多，电泳迁移率低。总RNA电泳后可呈现特征性的三条带。按多少分别为rRNA、tRNA、mRNA。 30.以EB为示踪剂的核酸凝胶电泳结果为依据。基因组DNA片段如发生降解，电泳图呈拖尾状。完整的或降解很少的总RNA电泳图谱中，三条带的荧光强度积分应呈特定的比值，如有改变则提示有RNA的降解。此外，若在点样孔附近有着色条带，则说明存在DNA 的污染。 31.玻棒缠绕法有两个关键步骤：一是基因组DNA沉淀在细胞裂解液和乙醇的交界面；二是将DNA沉淀缠绕在带钩玻棒上。

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