实验二乙酸正丁酯中杂质的气相色谱分析 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/12/23 11:07:05星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

实验二 药物中残留有机溶剂的的气相色谱分析测定

——乙酸正丁酯中杂质的含量测定

一、目的要求

1.学习内标标准曲线法定量的基本原理和测定试样中杂质含量的方法。 2.复习并巩固气相色谱分析原理及其操作步骤。 3.掌握药物中常见有机残留溶剂的测定原理及其方法。

二、实验原理

对于试样中少量杂质的测定,或仅需要测定试样中某些组分时,可采用内标法定量。由实验二可知:当假定内标物的校正因子fs=1时,待测组分的含量可由下式求得。

wi?msfiAi×100%

m试样As从公式可知,若想求得待测组分的含量,需先求出待测组分的校正因子fi。

而内标标准曲线法,即配制一系列的标准溶液,测得相应的Ai/As,mi/ms。以Ai/As对mi/ms作标准曲线。这样就可以在无需预先测定fi的情况下,称取一定量的试样m由标准曲线求得mi/ms,再根据公式wi?求得待测组分的质量分数wi。

试样

和内标物ms,混合进样,根据Ai/As之值

msmi×100%

m试样ms三、仪器与试药

1.FL9500气相色谱仪

2.微量进样器(1 ?L,0.5 ?L, 5 ?L) 3.移液管(0.5 mL、1 mL、2 mL) 4.高纯氮、高纯氢、低噪声空气净化源

5.异丙醇(?=0.785 g/cm3)、正庚烷(?=0.68 g/cm3)、环己烷(?=0.779 g/cm3)、甲醇(?=0.7914 g/cm3)、乙酸乙酯(?=0.901 g/cm3)、乙酸正丁酯(?=0.8824 g/cm3)均为分析纯

6.标准溶液按下表配制,分别置于5支25 mL的容量瓶中,用乙酸正丁酯稀释,混匀备用。

编号 1 2 3 4 5 m正庚烷/g 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 m甲醇/g 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 m异丙醇/g 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 m环己烷/g 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 m乙酸乙酯/g 0.25 0.50 0.75 1.00 1.25 7.未知试样25 mL(含1.0 g正庚烷)。

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四、实验条件

1. 固定液:聚甲基硅烷(非极性);色谱柱:毛细管0.32×30 mm/m 2. 柱温:70 oC;气化室(辅助I)温度:150 oC;检测器温度:150 oC 3. 载气:氮气; 检测器:氢火焰离子化检测器(FID) 4. 进样量:标准溶液1 ?L;未知试样0.5 ?L;纯物质:0.2 ?L。

五、实验内容及步骤

1. 根据实验条件,按仪器操作步骤将色谱仪调节至可进样状态,待仪器的电路和气路系统达到平衡,色谱工作站的基线平直时,即可进样。

2. 吸取各纯物质0.2 ?L进样,记录各纯物质的保留时间。

3. 吸取标准溶液1 ?L进样,记录各组分的保留时间和色谱峰面积。

4. 在同样条件下,吸取未知试液0.5 ?L进样,记录各组分的保留时间和色谱峰面积。

六、数据记录及处理

1. 记录纯物质的保留时间

保留时间(min) 甲醇 异丙醇 乙酸乙酯 正庚烷 环己烷 乙酸正丁酯 2. 记录标准溶液及未知试样各色谱图上各组分色谱峰面积

编号 1 2 3 4 5 未知 A甲醇(mV.s) A异丙醇(mV.s) A乙酸乙酯(mV.s) A环己烷(mV.s) A正庚烷(mV.s) 3.以正庚烷为内标物质,计算mi/ms,Ai/As值

4.以Ai/As 对 mi/ms 作图(Origin软件),绘制各组分的标准曲线,得到线性回归方程和线性相关系数。 5. 根据未知试样Ai/As的值,由标准曲线计算出相应的mi/ms的值。 6. 计算未知试样中甲醇、异丙醇、乙酸乙酯、环己烷的质量分数。

七、实验注意事项

进样前一定要将微量注射器用相应试剂清洗干净,清洗干净的微量注射器应该专用,不能与准备进样别的试剂的微量注射器混用;

八、思考题

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1. 简要说出气相色谱的主要仪器部件,并画出其简易流程图。

2. 实验中是否需要严格控制进样量,实验条件若有变化是否会影响测定结果,为什么? 3. 内标标准曲线法中,是否需要校正因子,为什么?

4. 根据纯物质的保留时间,确定各物质的沸点大小,并说明理由。

附录: FL9500气相色谱仪操作步骤

1 . 开N2钢瓶:1逆时针转动减压阀手柄至放松位置,此时减压阀处于关闭状态. 2逆时针打开钢瓶上的总阀门,并记录瓶中余气压力. 3顺时针旋紧减压阀,直至分压值达所需压力0.5 Mpa. 2. 接通电源,开净化器,三个全打开.

3. 调节毛细管柱前压(主机顶上表压力)为0.06 Mpa,开色谱仪上的两电源. 4. 设置参数,选择优化条件:1.柱温(柱箱键). 2. 汽化室(辅助I). 3. FID(检测器).

5. 待所设参数达到设置条件时(显示键查看),开H2钢瓶. H2钢瓶的开法:1.逆时针转动减压阀手柄至放松位置. 2.逆时针打开钢瓶上的总阀门.

3.逆时针打开减压阀左边的小通道(使用阀). 4. 顺时针旋紧减压阀直至分压值达所需压力0.2 Mpa. 6. 调色谱仪主板上H2表Ⅱ的压力为0.1 Mpa.

7. 开低噪声空气净化源, 调色谱仪主板上空气压力为0.03 Mpa.

8. 点火,若点火困难,可先调高氢气至0.15 Mpa,点火后调回至0.1 Mpa. 9. 打开电脑,点桌面上的FL9500色谱工作站图标进入系统,点通道1或2。

10. 待基线平直后,即可进样,进样后按工作站的通道A或B上的按时器或在工作界面上点击开始按钮即

进行进样分析。(注意:进样前一定要将微量注射器用相应试剂清洗干净,清洗干净的微量注射器应该专用,不能与准备进样别的试剂的微量注射器混用).

11. 采样结束后点停止,若想处理色谱图点进样后处理,点转入再处理,打印结果,待所有样品采样结束

后,关色谱程序窗,关电脑.

12. 关H2,先关总阀(顺)—减压阀(逆)—使用阀(顺)—稳压阀. 13. 关低噪声空气净化源.

14. 设置气化室,FID,柱箱温度为50℃,到达后关主机.

15. 关N2, 先关总阀(顺)—减压阀(逆)—稳压阀,关净化器,随后关掉一切电源.

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