内容发布更新时间 : 2024/12/27 14:11:26星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

中压液相层析（MPLC）> 5~20大气压 高压液相层析（HPLC）> 20大气压

粒径约小，分离效果越好，流速越慢，则加压增大效率，而分离规模逐步降低。 逆流层析法与液-液分配柱层析法的比较：

1）运作成本低 2）制备样品量大

3）不会产生不可逆吸附（因为没有固体载体） 凝胶过滤法

又称凝胶渗透层析、分子筛过滤、排阻层析。 （15）原理

分子大小不同，渗入凝胶颗粒内部的程度也不同。

越小越易进入，则路径越长。按照分子由大到小的顺序先后流出并分离。 Ve = K1 – K2 lgM（Ve：洗脱体积，M：分子量） （16）常用的凝胶种类及其性质 1. 葡聚糖凝胶（Sephadex G）：分子筛作用，如G-25（只适于水中应用） 2. 羟丙基葡聚糖凝胶（Sephadex LH-20）：分子筛作用、反相分配色谱（可使用极性有机溶剂） 膜分离技术

以选择型透过膜为分离介质，当膜两侧存在压力差、浓度差或电位差等时，组分选择性透过而达到分离目的。 包括微滤、超滤、纳滤和反渗透。 离子交换层析法 （17）原理

离子交换，利用大分子树脂网状结构内存在的交换基团而进行的交换性柱层析方法。 流动相为含水溶液，通过调整盐浓度、pH值进行洗脱。 （18）离子交换树脂的结构、性质及其分类 1. 母核：苯乙烯-二乙烯苯 2. 离子交换基团：

阳离子型：强酸型：-SO3-H

弱酸型：-COOH

阴离子型：强碱型：-N+-(CH3)3X-

弱碱型：-NH2、-NHR、-NRR’

（一般地，考虑到结合的可逆性等，用强酸/碱型分离弱碱/酸性化合物，弱酸/碱型分离强碱/酸性化合物）

3. 影响离子交换的因素：溶液的酸碱度、对交换离子的选择性、被交换物质在溶液中的浓度、温度、溶剂、其他因素。

4. 应用

用于不同电荷离子的分离，如水提取物中的酸性、碱性、两性化合物的分离；用于相同电荷离子的分离，如碱性大小不同的生物碱的分离。

天然产物结构研究法

1、结构研究主要内容与程序 （1）初步推断化合物结构类型 （2）测定分子式、计算不饱和度

（3）测定分子中含有的官能团，或结构片段，或基本骨架 （4）推断并确定分子的平面结构

（5）推断并确定分子的立体结构（构型、构象） 注意：文献检索、调研工作贯穿于结构研究的全过程

2、结构研究方法 （1）查阅文献

（2）化合物纯度的测定 1. 外观：晶型与色泽 2. Mp（熔点） 3. TLC

（3）物理常数测定 （4）分子量的测定 1. 经典方法 2. 现代方法

HR-MS（EI-MS、FAB-MS、ESI/APCI-MS、TOF-MS） （5）分子式的测定 1. 元素分析法 2. 质谱法

HR-MS、同位素丰度法 3. 1H-NMR、12C-NMR （6）不饱和度的计算 Ω= IV – I/2 + III/2 + 1

（IV：四价原子数，I：一价原子数，III：三价原子数） （7）分子结构骨架的测定 1. 专属性反应 2. 植物亲缘相关性 3. 光谱特性 4. 部分合成 5. 化学降解

（8）官能团的判断 1. 化学法 2. 光谱法

（9）光谱分析

推断并确定未知化合物结构的一般顺序 研 究 顺 序 1. 初步推断化合物类型 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.

1研 究 方 法 及 内 容 ● 样品来源和参考文献 ● 注意观察样品在提取分离过程中的行为. ● 测定有关物理化学性质 ● 利用质谱(MS)测定分子量 (其他的分子量测定法也可, 但精确度低). ● 通过高分辨质谱(HR-MS)结果直接计算可得. ● 通过1H-NMR的积分曲线高度和13C NMR的谱线数可分别推定氢原子数及最低碳原子数. ● 元素定量分析 ● 从分子式计算求得. Ω= IV – I/2 + III/2 + 1 ● 推定某特征官能团、不饱和键等是否存在. ● 推定是否存在不饱和键、尤其是共轭不饱和键及芳香环. ● 从分子离子的裂解离子碎片推定官能团及结构单元, 进而从相应残基的质量数推定可能的组成式. ● 从积分曲线高度可求得各不等价氢原子的相对数. ● 通过化学位移(δ值)、多重度、偶合常数(J值)对各1H信号进行归属、确定化合物骨架结构. 分子量 分子式 不饱和度 IR UV MS H NMR

9. 10. 11. 12. 13. 13● 从全氢去偶图中的谱线数可得不等价碳原子的相对数. ● 从化学位移及通过各种去偶谱的测定得到的谱峰的多重度、偶合常数等可对各13C信号进行归属，进而推定碳链骨架结构.（COM、DEPT、SPD等） 2D-NMR ● 确定一维核磁共振谱上的1H、13C信号的归属及化合物的平面、立体结构. ● 综合从上述研究中推测出的各部分结构, 推定可能的分子结构. 分子结构 ● 判定所推测结构与所有的谱图结果是否矛盾. 顺反异构 ● 通过UV的λmax及1H NMR的偶合常数来判断. 立体结构 ● 通过旋光光谱来推定化合物分子的立体化学结构(构型、构象) C NMR 糖和苷

1、糖类又称碳水化合物（carbohydrates），是植物光合作用的初生产物，是一类丰富的天然产物。

（糖类、核酸、蛋白质、脂质——生命活动所必需的四大类化合物。）

2、苷类（glycosides)：由糖或糖的衍生物与另一非糖物质（苷元或配基，aglycone）通过糖的半缩醛或半缩酮羟基与苷元脱水形成的一类化合物。

3、分类

单糖：不能水解的最简单的多羟基类半缩醛（酮），是组成糖类及其衍生物的基本结构单元，如葡萄糖等。 低聚糖：水解后生成2~9个单糖分子的糖，如蔗糖、麦芽糖。

多糖：水解后能生成多个单糖分子的糖类化合物，如淀粉、纤维素等。

4、差向异构——含两个或两个以上手性中心的化合物，当只有一个手性中心手性不同时，即为差向异构。 5、单糖的结构表示式

（1）单糖是多羟基醛或酮，从三碳糖至八碳糖天然界都有存在。

以Fischer式表示，氧化态最高的碳在上、最低的碳在下（即氧化在上、还原在下）。 （2）单糖在水溶液中形成半缩醛环状结构，即成呋喃糖和吡喃糖。 具有六元环结构的糖——吡喃糖（pyranose） 具有五元环结构的糖——呋喃糖（furanose）

CHOO~O～ 糖处游离状态时用Fischer式（横外竖内）表示，溶液中或苷化成环后用Haworth式（上左下右）表示。

（3）糖的相对构型（α、β） 端基碳（anomeric carbon）：即原羰基碳；端基差向异构体：因端基碳上羟基取向而分为α、β异头碳。 Fischer式：C1-OH与原C5（六碳糖）或C4（五碳糖）-OH，同侧为α，异侧为β。

Haworth式：C1-OH与C5（六碳吡喃糖）C4（五碳呋喃糖）上取代基之间，同侧为β，异侧为α；与C4-OH（五碳吡喃糖或六碳酮糖）同侧为α，异侧为β。

（4）单糖的变旋光性

如普通的葡萄糖结晶主要是α-型，α-型葡萄糖结晶溶于热的吡啶或冰醋酸后再次结晶析出时，可得到β-型葡萄糖。其在水溶液中相互转换，达到平衡。

（5）糖的绝对构型（D、L）

以α-OH甘油醛为标准，将单糖分子的编号最大的不对称碳原子的构型与甘油醛作比较而命名分子构型的方法： Fischer式中最后第二个碳原子上-OH向右的为D型，向左的为L型；Haworth式中C5-R向上为D型，向下为L型（六碳吡喃型）。

（6）α-L与β-D端基碳绝对构型一致，α-D与β-L端基碳绝对构型一致。

CH2OHD-葡萄糖

Xyl Rha Glc

CHOCHOHCH2OHCOHCH3CHOCH2OHD-葡萄糖OD 型α-OH甘油醛β-D-葡萄糖α-L-鼠李糖L-鼠李糖OCH3 六碳醛糖和甲基五碳糖 CH2OHCHOOOCHOORR'OOHCH2OH

CH2OH

CH2OHOHOH D-木糖（D-Xylose，五碳糖） D-果糖（D-Fructose，六碳酮糖） D-半乳糖（D-Galactose）