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第十四、二十一章 基因工程、分子生物学常用技术段里原理及其应用

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（一）名词解释 1．DNA重组 2．基因工程

3．限制性核酸内切酶 4．基因组DNA文库 5．cDNA文库

6．聚合酶链反应（PCR） 7．载体 8．转化 9．感染

10．核酸分子杂交

11．Southern印迹杂交 12．Northern印迹杂交 13．斑点印迹 14．原位杂交 15．DNA芯片 16．基因诊断 17．基因治疗 （二）选择题 A型题：

1．限制性核酸内切酶作用特点不包括： A．在对称序列处切开DNA

B．DNA两链的切点常不在同一位点

C．酶切后产生的DNA片段多半具有粘性互补末端D．DNA两链的切点常在同一位点 E．酶辨认的碱基一般为4～6个

2．限制性核酸内切酶： A．可将单链DNA任意切断 B．可将双链DNA序列特异切开 C．可将两个DNA分子连接起来 D．不受DNA甲基化影响 E．由噬菌体提取而得

3．cDNA文库包括该种生物的： A．某些蛋白质的结构基因 B．所有基因组

C．结构基因与不表达的调控区 D．内含子和调节区 E．内含子和外显子

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4．下列关于建立cDNA文库的叙述哪项是错误的： A．从特定组织或细胞中提取mRNA

B．将特定细胞的DNA用限制性核酸内切酶切割后，克隆到噬菌体或质粒中 C．用逆转录酶合成mRNA的对应单股DNA

D．用DNA聚合酶，以单股DNA为模板合成双链DNA E．加S-腺苷甲硫氨酸（SAM），以使新生的DNA双链甲基化

5．限制性核酸内切酶的通常识别序列是： A．粘性末端

B．RNA聚合酶附着点 C．回文对称序列 D．聚腺苷酸

E．甲基化“帽”结构 6．pUC系列是指：

A．经人工改造的大肠杆菌质粒 B．天然的大肠杆菌质粒 C．天然的酵母质粒

D．经人工改造的大肠杆菌噬菌体 E．经人工改造的酵母质粒

7．用于转染哺乳类细胞的常用载体是： A．质粒 B．噬菌体

C．逆转录病毒RNA D．结构基因 E．乳糖操纵子

8．转化常指： A．噬菌体感染 B．基因的转位

C．摄取外来DNA，引起细胞生物学类型的改变 D．产生点突变 E．产生移码突变

9．基因工程的操作程序可简单地概括为： A．载体和目的基因的分离、提纯与鉴定 B．分、切、接、转、筛

C．将重组体导入宿主细胞，筛选出含目的基因的菌株 D．将载体和目的基因接合成重组体 E．限制性核酸内切酶的应用 ．用于基因治疗较为理想的载体是： A．质粒

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B．噬菌体

C．经改造的逆转录病毒 D．人类DNA E．酵母质粒

11．常用质粒有以下特性： A．是线形双链DNA

B．插入片段的容量比λ噬菌体DNA大 C．含有抗生素抗性基因

D．含有同一限制性核酸内切酶的多个切口 E．不随细菌繁殖而进行自我复制

12．在重组体中切出插入片段最常用的方法是： A．以重组时所用限制性核酸内切酶将其切出 B．用其它限制性酶将其切出 C．用S1核酸酶将其切出 D．用DNA酶将切出

E．用多种限制性内切酶将其切出 13．利用PCR扩增特异DNA序列主要原理之一是： ．反应体系内存在特异DNA片段 ．反应体系内存在特异RNA片段 ．反应体系内存在特异DNA引物 ．反应体系内存在特异RNA引物

．反应体系内存在的TaqDNA聚合酶具有识别特异DNA序列的作用14．表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是： ．大肠杆菌表达体系 ．原核表达体系 ．酵母表达体系 ．昆虫表达体系

．哺乳类细胞表达体系 15．限制性核酸内切酶切割DNA后产生： ．3′-磷酸基末端和5′-羟基末端 ．5′-磷酸基末端和3′-羟基末端 ．3′-磷酸基末端和5′-磷酸基末端 ．5′-羟基末端和3′-羟基末端

．3′-羟基末端和5′-羟基末端及磷酸 16．下列描述最能确切表达质粒DNA作为克隆载体特性的是： ．小型环状双链DNA分子 ．携带有某些抗生素抗性基因

．在细胞分裂时恒定地传给子代细胞 ．具有自我复制功能

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A B C D E

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