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2013年福建省高考《考试说明》要求掌握的16个课本实验（2013年5月6日整理）
实验一：观察DNA、RNA在细胞中的分布（必修一P26）
一．实验目的：初步掌握观察DNA和RNA在细胞中分布的方法
二．实验原理：甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同 1． 甲基绿+DNA 绿色
两种试剂不是单独使用，应混合使用且现配现用
吡罗红+RNA 红色
2． 8%盐酸：改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色质中的DNA
几种液体
和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。 0.9%NaCl的作用 溶液：保持口腔上皮细胞正常形态 蒸馏水：配制染色剂，冲冼载玻片 三．方法步骤
操作步骤 注意问题 解释 在洁净载玻片的中央，滴一滴质量分防止污迹干扰观察效果 数为0.9%的NaCl溶液（生理盐水） 保持细胞原有形态 取口腔上皮 细胞制片 用消毒牙签在漱净的口腔内侧壁上轻消毒为防止感染，漱口避免取材失败 刮几下并在载玻片的液滴中涂抹几下 杀死细胞并固定装片；烘干时应来回将载玻片在酒精灯下烘干 移动，防止载玻片受热不均破裂 将烘干的载玻片放入装有质量分数为①改变细胞膜的通透性，加速染色剂水解 8%的盐酸（HCl）溶液的小烧杯中，并进入细胞 一起放入装有300C温水的大烧杯中，②促进染色质的DNA与蛋白质分离（无染水浴保温5min 色体）而使DNA被染色，细胞为死细胞 冲冼涂片 用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10S 洗去残留在载玻片上的盐酸 缓水流：防止细胞被冲走 用吸水纸吸去载玻片上多余的水分 染色 滴2滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5min 吸去多余的染色剂并盖上盖玻片 先低倍镜观察：选择染色均匀、色泽观察 浅的区域，移至视野中央，调节清晰 使观察效果最佳 后才换用高倍物镜观察： 现象 细胞核大部分被染成绿色 细胞核也有小部分被染成红色 细胞质大部分被染成红色 细胞质也有小部分被染成绿色 结论 DNA主要集中分布于细胞核中 在细胞质中也有DNA分布 连城三中 高三生物组 胡士勇整理 第 1 页 共 18页
RNA主要集中分布于细胞质中 在细胞核中也有RNA分布 实验二： 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质（必修一P18）
一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1．还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）+ 斐林试剂 水浴加热 砖红色沉淀。 甲液：0.1g/ml NaOH 溶液 斐林试剂 乙液：0.05g/ml CuSO使用时：甲乙液等量混匀后立即使用 4 溶液
实质：是还原糖（全部单糖、麦芽糖、果糖、乳糖）与新制的Cu( OH ) 2反应生成砖红色氧化
亚铜（Cu 2O）。注：淀粉、蔗糖是非还原糖
2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）。
3．蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性NaOH溶液中能与双缩脲试剂中的Cu2+作用，产生紫色反应。） A液：0.1g/ml NaOH 溶液
B双缩脲试液：0.01g/ml CuSO4
溶液
使用时：先加A液后加B液 实质：在碱性条件下，肽键结构与铜离子反生络合反应，生成紫色络合物。 4. 淀粉遇碘变蓝色。
三．实验材料
1．做还原糖鉴定实验：应选含还原糖高，颜色为白色或近白色的植物组织，如苹果、梨。（因为
组织的颜色较浅，最好无色，防止颜色干扰且易于观察。）
2．做脂肪的鉴定实验：应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3～4小时
（也可用蓖麻种子）。
3．做蛋白质的鉴定实验：可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清等。 四、实验试剂
斐林试剂、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。 五、方法步骤
（一）还原糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，（去皮、切块、研磨、过滤） 要取组织的颜色较浅，最好无色，组织液很易被氧化成褐色，防止颜色干扰且易于观察。 将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液 3. 向试管内注入1mL新制的分别配制、储存，使用前才将甲、斐林试剂很不稳定，易分解。 斐林试剂，振荡（此时呈现乙液等量混匀配成斐林试剂，要 斐林试剂的颜色：浅蓝色）。 现配现用； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果甲、乙液分别加入时可能无组织样液中进行检测。 Cu( OH )2生成。 yong037 第2 页 共 18页 4. 试管放在盛有50-650C温水最好用试管夹夹住试管上部，使防止试管内的溶液冲出试的大烧杯中，加热约2分钟，试管底部不触及烧杯底部，试管管，造成烫伤； 观察到溶液颜色：浅蓝色 → 口不朝向实验者。 棕色 → 砖红色（沉淀） 也可用酒精灯对试管直接加热。 缩短实验时间。 要留适当组织样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有还原糖 （二）脂肪的鉴定
⑴显微镜观察法（要用显微镜） 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、用刀片切下一干种子要浸泡3～4小因为浸泡时间短，不易切片，浸些子叶薄片，将薄片放入盛有清水的时，新花生的浸泡时间泡时间过长，组织较软，切下的培养皿中待用。 可缩短。 薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 取最理想的薄片，放在载玻片中央 在子叶薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ或苏染色时间不宜过长。 丹Ⅳ染液，染色1分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液，滴1～2①防止浮色影响对橘黄色脂肪滴滴体积分数为50%酒精洗去浮色，吸酒精用于洗去浮色 的观察。 去酒精。 ②酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上 滴上清水可防止盖盖玻片时产生1～2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 色圆形小颗粒。 ⑵制备组织样液法：（不需要用显微镜） 花生种子匀浆 + 苏丹III染液 橘黄色 或 花生种子匀浆 + 苏丹IV染液 红色 三、蛋白质的鉴定
操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也（浸泡、去皮研磨、过滤。） 可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定：加样液约2ml于试管中 A液和B液要分开配先加NaOH溶液，提供一个碱性的环境。 制，储存。 A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变加入双缩脲试剂A，摇匀 鉴定时先加A液后加B成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 液。 再加入双缩脲试剂B液3～4 滴，摇匀 溶液变紫色 CuSO4溶液不能多加。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 连城三中 高三生物组 胡士勇整理 第 3 页 共 18页
如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 留适当样液与反应后溶液做对照，结论：组织样液中含有蛋白质 附：淀粉的检测和观察 用试管取2ml待测组织样液，向试管碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 内滴加2滴碘液，观察颜色变化。 实验三：用显微镜观察多种多样的细胞（必修一P7）
一．实验目的
（1）使用高倍显微镜观察几种细胞，比较不同细胞的异同点
（2）运用制作临时装片的方法
二．实验原理：利用高倍镜可以看到某些在低倍镜下无法看到的细胞结构，例如：可以看到叶绿
体、线粒体等细胞器（能看到细胞器，无法看清细胞器结构），从而能够区别不同的细胞。 光学显微镜 显微镜 细胞显微结构图：不能显示细胞器的内部结构 电子显微镜 细胞亚显微结构图：能显示细胞器的内部结构 三．显微镜的使用：不能直接使用高倍显微镜，一定是先低倍后高倍观察
低倍显微镜的使用：取镜 安放 对光 压片 调焦 观察
高倍显微镜的使用：在低倍镜下找到目标 移装片使观察对象位于视野中央 转动转换器换高倍镜 调焦 观察
注：移中央：观察对象在哪往哪移；由低倍换高倍镜后一定不能转动粗准焦螺旋（容易压坏
玻片），只需轻轻转动细准焦螺旋微调即可 四．相关问题
物镜：有螺纹，镜头越长，放大倍数越大，距离装片的距离越近 镜头 目镜：无螺纹，镜头越长，放大倍数越小
放大倍数 总放大倍数＝目镜放大倍数×物镜放大倍数
显微镜放大倍数是指物体的长度与宽度放大倍数
物像大小 视野范围 看到细胞数目 视野亮度 物镜与装片距离 低倍镜 小 大 多 亮 远 高倍镜 大 小 少 暗 近 调光 光线暗：凹面镜，大光圈 光线亮：平面镜，小光圈 为什么要先用低倍镜观察清楚后，把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察？ 提示：如果直接用高倍镜观察，往往由于观察的对象不在视野范围内而找不到。因此，需要先用
低倍镜观察清楚，并把要放大观察的物像移至视野的中央，再换高倍镜观察。 五：讨论
1.试归纳所观察到的细胞在结构上的共同点，并描述它们之间的差异，分析产生差异的可能原因： 答：共同点是：有细胞膜、细胞质和细胞核，植物细胞还有细胞壁。可能原因是：这些细胞的位
置和功能不同，其结构与功能相适应，这是个体发育过程中细胞分化产生的差异
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2.低倍镜换为高倍镜后，若看不到或看不清原来的像，可能原因？（ABC）
A、物像不在视野中 B、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜 3.污点判断：
(1）污点随载玻片的移动而移动，则位于载玻片上；
(2）污点不随载玻片移动，换目镜后消失，则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜； (3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。
实验四：用高倍镜观察线粒体和叶绿体（必修一P47）
一、实验目的
使用高倍镜观察叶绿体和线粒体的形态和分布。 二、实验原理
叶肉细胞中的叶绿体：因其本身含有色素，呈绿色故不需染色，呈扁平的椭圆球形或球形。 线粒体：本身无色，需染色体才能观察到。线粒体+健那绿染液 蓝绿色
健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料，染色后细胞仍然是活的。
三、实验材料 观察叶绿体时选用：藓类的叶、黑藻的叶。取这些材料的原因是：叶子薄而小，叶绿体清楚，
可取整个小叶直接制片，所以作为实验的首选材料。（若用菠菜叶作实验
材料，要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉。因为表皮细胞不含叶绿体。）
观察线粒体时选用：人口腔上皮细胞或紫色洋葱鳞片叶内表皮细胞（无色）
四、方法步骤 实验 步 骤 注 意 问 题 分 析 观 1．制片：用镊子取一片黑藻的小叶，制片和镜检时，临时装片中否则细胞或叶绿体失察 放入载玻片的水滴中，盖上盖玻片。 的叶片不能放干了，要随时水收缩，将影响对叶绿叶 保持有水状态 体形态和分布的观察。 绿 2．低倍镜下找到叶片细胞 体 3．高倍镜下观察叶绿体的形态和分布 观 在洁净载玻片中央滴一滴健那绿染液是活细胞察 1．制作人的口腔上皮细胞临时装片 健那绿染液→用牙签取口染料（不影响细胞生线 腔上皮细胞→盖盖玻片 命） 粒 2．低倍找到口腔上皮细胞后，换高蓝绿色的是线粒体，细胞质体 倍镜观察线粒体 接近无色。 专一性染线粒体的 五、讨论（注：这两个实验都要保证细胞鲜活，在整个实验过程中细胞都具有活性，都是活细胞） 1、细胞质基质中的叶绿体，是不是静止不动的？为什么？
答：不是。呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动，这种运动能随时改变椭球体的方
向，使叶绿体既能接受较多光照，又不至于被强光灼伤。 2、叶绿体的形态和分布，与叶绿体的功能有什么关系？
答：叶绿体的形态和分布都有利于接受光照，完成光合作用。如叶绿体在不同光照条件下改变方
向。又如叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多，这可以接受更多的光照。
实验五：观察植物细胞的质壁分离和复原（必修一P61“探究”）
连城三中 高三生物组 胡士勇整理 第 5 页 共 18页
一、实验目的
1．学会观察植物细胞质壁分离与复原的方法。 2．了解植物细胞发生渗透作用的原理。 二．实验原理
1．质壁分离的原理：当细胞液浓度<外界溶液浓度时，细胞就会通过渗透作用而失水，细胞液
中的水分就透过原生质层进入到溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大，当细胞不断失水时，
原生质层就会与细胞壁分离。
注意：质壁分离后，在原生质层与细胞壁之间存在外界溶液（因为细胞壁是全透的）。 2．质壁分离复原的原理：当细胞液浓度>外界溶液浓度时，细胞就会通过渗透作用而吸水，外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，紧贴细胞壁，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原 3．原生质层：包括细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质；相当于一层半透膜。 二、实验材料（必须选择有大液泡并有颜色的活的植物细胞）
紫色洋葱鳞片叶的外表皮。因为液泡呈紫色，易于观察。也可用水绵代替。0.3g/ml的蔗糖溶液。用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。 三、实验步骤
步 骤 注 意 问 题 分 析 1．制作洋葱外表皮细胞的临时装盖盖玻片应让盖玻 片:在载玻片上滴一滴水，撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平片的一侧先触及载防止装片产生气泡。 【也可挑取几条水绵放入水滴玻片，然后轻轻放中】。盖上盖玻片。 平。 2．观察洋葱（或水绵）细胞 液泡含花青素，所以液泡呈紫色。 可看到：液泡大，呈紫色，原生质 层紧贴着细胞壁。【或水绵细胞中本次用显微镜观察先观察正常细胞与后面的“质壁分离”有带状叶绿体，原生质层呈绿色，的是正常细胞的形起对照作用。（前后对照——分离前与紧贴着细胞壁】。 态 分离后对照） 3．观察质壁分离现象: 本次观察的是质壁蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度，细胞通从盖玻片的一侧滴入0．3g/ml的分离后的细胞形态 过渗透作用失水，细胞壁伸缩性小原生蔗糖溶液，在另一侧用吸水纸吸 质层的伸缩性大，液泡和原生质层不断引，重复几次。镜检。 重复几次 收缩，所以发生质壁分离 观察到：液泡由大变小，颜色由浅 为了使细胞完全浸入蔗糖溶液中。 变深，原生质层与细胞壁分离。 推测：原生质层与细胞壁之间充满糖液浓度不能过高 否则，细胞严重失水死亡，看不到质壁蔗糖溶液。 分离的复原。 4．观察细胞质壁分离的复原现象:发生质壁分离的装细胞液的浓度高于外界溶液，细胞通过从盖玻片的一侧滴入清水，在另一片，不能久置，要渗透作用吸水，所以发生质壁分离复原侧用吸水纸吸引，重复几次。镜检。 马上滴加清水，使现象。 观察到：液泡由小变大，颜色由深其复原。 因为细胞失水过久，也会死亡。 变浅，原生质层恢复原状。 重复几次。 为了使细胞完全浸入清水中。 yong037 第6 页 共 18页