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板块六 选考

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专题十五 现代生物科技专题 第1讲 基因工程和细胞工程

全国卷5年考情导向 考 点 1.基因工程的诞生(Ⅰ) 2016·丙卷T40：限制酶的考 题 考 情 1.近五年的全国卷高考试题中对于基因工程的考查识别序列特点、DNA连接频度较高，侧重考查操作酶的种类及功能、基因表工具的种类、功能以及操达载体的组成 2016·乙卷T40：质粒载体作基本程序的应用等。动物细胞工程技术中的核移具备的基本条件及目的基植技术及单克隆抗体的制因的筛选 2.基因工程的原理及技术(含PCR)(Ⅱ) 2015·卷ⅠT40：目的基因的获取方法 2014·卷ⅡT40：基因组文备也有所考查。 2．题目常借助简洁的文字材料或模式图等考查有关基因工程、动物细胞工程库和cDNA文库的概念及的原理、技术手段等，尤基因工程的操作程序 为注重对教材中一些关键2013·卷IT40：基因工程的词的填充及对结论性语句操作工具及农杆菌转化法的准确表述等。 中农杆菌的作用 2012·课标卷T40：基因工3．备考时，应从以下四个方面入手复习： 程的三种操作工具及应用 (1)列表比较法掌握限制3.基因工程的应用(Ⅱ) 4.蛋白质工程(Ⅰ) 2014·卷ⅡT40：利用转基因技术培养耐旱植物 2015·卷ⅡT40：蛋白质工酶、DNA连接酶和载体的作用。 (2)实例分析法理解基因程的基本途径 2013·卷ⅠT40：蛋白质工程的概念 5.植物的组织培养(Ⅱ) 2013·卷ⅡT40：植物体细胞杂交的过程 2016·甲卷T40：核移植技6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ) 工程的原理和过程。 (3)列表比较法理解两个不同，即植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。 术的操作过程、原理及结(4)图解法分析并掌握单果，动物细胞培养中遗传克隆抗体制备过程。 物质的变化 7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ) 2014·卷ⅠT40：杂交瘤细胞的制备

考点串讲1| 基因工程与蛋白质工程

1．(2016·全国乙卷)某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamH Ⅰ酶切后，与用BamH Ⅰ酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆

菌有的未被转化，有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：

(1)质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有________(答出两点即可)，而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。

(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是____________；并且________________和________________的细胞也是不能区分的，其原因是________。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落，还需使用含有________的固体培养基。

(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于________。

【解析】 (1)质粒作为载体，应具备的基本条件有：有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段(基因)插入其中；在受体细胞中能自我复制，或能整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制；有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；等等。(2)在培养基中加入氨苄青霉素进行筛选，其中未被转化的大肠杆菌和仅含环状目的基因的大肠杆菌，因不含氨苄青霉素抗性基因而都不能在此培养基上存活，二者不能区分。含有质粒载体的大肠杆菌和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中都含有氨苄青霉素抗性基因，都能在此培养基上存活，二者也不能区分。若要将含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌进一步筛选出来，还需要使用含有四环素的固体培养基。(3)某些噬菌体经改造后作为载体，导入受体细胞后，其DNA复制所需的原料来自于受体细胞。

【答案】 (1)能自我复制、具有标记基因(答出两点即可)

(2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 含有质粒载