TLC原理及应用 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/6/29 18:00:53星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ使荧光稳定,再在紫外光长波下照射2min。

结果:紫外灯下观察荧光。

②三氯化锑 检出物:黄酮类。

溶液:10%三氯化锑的氯仿溶液。

方法:喷板。

结果:紫外光长波下呈荧光。

⑧三氯化铝 检出物:黄酮类。

溶液:1%三氯化铝乙醇溶液。

方法:喷板。

结果:紫外光长波下显黄色荧光。 ④Benedict(硫酸铜/枸橼酸钠)试剂 检出物:含邻二羟基的黄酮类及香豆精类。

溶液:1.73g 硫酸铜(CuS04?5H20):17.3g 枸橼酸钠及10g 无水碳酸钠溶

于水并稀释至1 00ml。 方法:喷板。

结果:紫外光长波下观察,含邻二羟基的化合物,斑点荧光减弱或猝灭。

(14)含硫化合物 ①硝普钠

检出物:巯基-SH基(半胱氨酸)、双硫化物、-s-s-基(胱氨酸)及精氨酸。 溶液:I. 1.5g 硝普钠溶于5ml 2mol/L盐酸溶液及95ml甲醇中,加10ml 25%

氢氧化铵溶液,过滤,即得;

Ⅱ. 2g氰化钠溶于5ml水,用甲醇稀释至100ml。

方法:先喷溶液I、再喷溶液Ⅱ。

结果:巯基化合物呈红色;精氨酸由橙变为灰蓝色;双硫化物在黄色背景上显红

色。

②FCNP(硝普钠/铁氰化物)试剂

检出物:脂肪族含硫化台物,如氨基氰、硫脲及其衍生物。

溶液:10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液,10%铁氰化钾溶液与水按1:1:

1:3混合,用前与等体积丙酮混合,用时新鲜配制。

○3氯化铁/磺基水杨酸 检出物:硫代磷酸酯类。

溶液:I.1%氯化铁的80%乙醇溶液; Ⅱ.1%磺基水杨酸的80%乙醇溶液,

方法:薄层先置溴蒸气中10min后,喷溶液I,干燥15min,再喷溶液Ⅱ。

结果:紫色背景上呈白色。 、 :

④叠氮化碘

检出物:含硫氨基酸、硫化物与青霉素。

溶液:叠氮碘溶液-叠氮钠3g 溶乎100ml 0.05mol/L碘溶液中(新鲜配制,

固体叠氮碘有爆炸性)。 ⑤靛红/硫酸 检出物:噻吩衍生物。

溶液;0.4g靛红溶于100ml浓硫酸中。

方法:喷板后120oC加热。 结果:呈不同颜色。 (15)类脂化合物 ①磷钼酸

检出物:胆酸、类脂化物、脂肪酸及甾类。 溶液:250mg 磷钼酸于50ml乙醇中。

方法:唆后予120oC加热。

②罗丹明6G 检出物;类脂化物。

溶液:lg 罗丹明6G溶于100ml丙酮中.

方法:喷后置紫外光长波下观察。

③溴百里酚蓝 检出物:类脂化物。

溶液:O.04g溴百里酚蓝溶于100ml O.01mol/L氢氧化钠溶液中。

(16)阳离子 ①双硫腙

检出物:金属离子。

溶液:20mg双硫腙溶于100ml丙酮中,置棕色瓶中于冰箱内保存。

方法:上述溶液喷板后再喷25%氢氧化铵溶液。

②红氨酸 (二硫代草酰胺) 检出物:重金属离子。 溶液:0.5%红氨酸乙醇溶液。

方法:先喷上述溶液,稍干后置薄层于氨蒸气中。。

③茜素

检出物:众多阳离子、稀土及铀。 溶液:茜素乙醇饱和溶液。 方法:喷板后直接放入氨蒸气中。

④亚铁氰化钾

检出物:Fe3+、Cu2+、Cl、Mo、V、W离子。

溶液:新配制的2%亚铁氰化钾溶液。

⑤二苯卡巴肼

检出物:Ag+、pb2+、Hg2+、Cu2+、Sn2+、Mn2+、Zn2+、Ni2+、Co2+

及Ca2+离子。

溶液:I.1%~2%二苯卡巴肼乙醇溶液;

Ⅱ.25%氢氧化铵溶液。 方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ。

结果:Ni2+呈蓝色、Co2+呈橙褐色、Zn2+呈红紫色,Ag+、pb2+、Cu2+、

Sn2+、Mn2+呈褐色、乙酸汞加成物于80oC加热片刻,斑点呈蓝色。

(17)阴离子 ①硝酸银

检出物:含硫阴离子、砷酸盐、亚砷酸盐磷酸盐、亚磷酸盐及除氟外的卤素。 溶液:0.1~0.5mol/L硝酸银溶液中加氨水直至沉淀溶解。临用前配制、储

存会形成易爆物质。

方法:喷后于110~120oC加热l0min,必要时置紫外光下l0min。

②硝酸银/氢氧化铵/荧光素

检出物:卤素离子。

溶液:I.1g硝酸银溶于l00ml O.5mol/L氢氧化铵溶液中;

Ⅱ.1g荧光索溶于l00ml乙醇中。 方法:先喷溶液I,稍干,再喷溶液Ⅱ。

③钼酸铵/亚硫酸钠

检出物:硫化物、硫代硫酸盐与磷酸盐。 : 溶液:I.5%钼酸铵的lmol/L硫酸溶液;

Ⅱ.5%亚硫酸钠溶液。

方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ,于105℃加热30min。 结果:硫化物及硫代硫酸盐呈深蓝色,磷酸盐呈蓝灰色。

④番木鳖碱

检出物:溴酸盐、硝酸盐、氯酸盐。

溶液:I.0.02%番木鳖碱的lmol/L硫酸溶液;

Ⅱ.2mol/L氢氧化钠溶液。 方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ。

结果:溴酸盐、氯酸盐呈血红色,硝酸盐呈橙黄色。

(四).其他常用与专用显色剂:

碘:

适用于不饱和或者芳香族化合物

配制方法:在100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。

或者在瓶中,加入10g 碘粒,30g 硅胶

高锰酸钾

适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛

配制方法:1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +200mL 水.

使用期3 个月 磷钼酸(PMA) 广谱

配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇

紫外灯

适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物

硫酸铈: 生物碱

配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁

苯酚类化合物

配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.

桑色素(羟基黄酮) 广谱, 有荧光活性

配制方法:0.1% 桑色素+甲醇

茚三酮

适用于氨基酸

配制方法:1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸

二硝基苯肼(DNP) 适用于醛和酮

配制方法:12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL乙醇

香草醛(香兰素) 广谱

配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸

溴甲酚绿

适用于羧酸,pKa<=5.0

配制方法:在100ml 乙醇中,加入0.04g 溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的

NaOH 水溶液,刚好出现蓝色即至。

钼酸铈 广谱

配制方法:235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL浓硫酸

茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1

广谱

配制方法:135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL茴香醛,

剧烈搅拌,使混合均匀. 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2

适用于萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)经常需要利用溶剂的极性大

小,对展开剂的极性予以调整。