内容发布更新时间 : 2024/11/5 20:31:52星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

题目：沉降菌测试标准操作规程 制定人： 年 月 日 编码： SOP-ZL-HJ-006-01 审核人： 年 月 日 颁发部门：质量管理部 批准人： 年 月 日 执行时间： 年 月 日 分发部门：质量管理部、档案室 目的：建立洁净室（区）中沉降菌的测试标准操作规程，保证药品在规定洁净级别的区域内进行生产。

范围：适用于洁净室（区）的沉降菌的测试。 职责：质量管理部、QA检测员 内容： 1、测试方法

本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平皿，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室(区)的洁净度。 2、仪器、设备、培养基

2.1培养皿：Φ90mm×15mm 培养皿 2.2培养基：营养琼脂培养基

2.3生化培养箱：必须定期对生化培养箱进行校验。 2.4自动台式灭菌器：使用时应严格按照仪器说明书操作。 3、测试条件

3.1温度和相对湿度：洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应，温度控制在18℃～26℃，相对湿度控制在45%～65%为宜。 3.2压差：空气洁净度不同的洁净室（区）之间压差应≥10Pa。

4、测试状态：动态测试和静态测试。静态测试时，室内测试人员不得多于2人；动态测试时，现场人员数按《洁净区人员控制管理制度》中规定执行，记录中注明现场人员数量及测试点位置。

5、测试时间：对单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于10分钟后开始；对非单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于30分钟后开始。

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6、采样点数量及布置 6.1最少采样点数目

房间面积（m2） ＜10 ≥10—＜20 ≥20—＜40 ≥40—＜100 ≥100—＜200 ≥200—＜400 ≥400—＜1000 ≥1000—＜2000 ≥2000 洁净度级别 100 2—3 4 8 16 40 80 160 400 800 10000 2 2 2 4 10 20 40 100 200 100000 2 2 2 2 3 6 13 32 63 6.2最少培养皿数

在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见下表

洁净度级别 100 10000 100000 6.3采样点布置类型

所需Φ90mm培养皿数(以沉降0.5 h /静态或4h /动态计) 14 2 2

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6.4采样点的位置

6.4.1一般布置在离地面0.8-1.5m之间或操作平台的高度，除受洁净室（区）的设备限制外，应在整个洁净室（区）均匀布置。

6.4.2每个采样点一般采样一次，也可以多于1次。

6.4.3布置采样点时，应避开回风口，测试人员应在采样口的下风侧。 7、培养基制备

7.1依据检测区域的取样点数，按照《培养基配制标准操作规程》制备适量的营养琼脂培养基。

7.2在超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区。

7.3将制备的营养琼脂平皿倒置于生化培养箱内35℃培养48小时，确认无菌落数后使用。 7.4培养皿传进洁净室（区）测试前要进行表面消毒。 8、测试

8.1将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。

8.2静态测试时，培养皿暴露时间为30min，动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4h。 9、培养：取样结束后将平皿倒置于生化培养箱内35℃培养72小时，并以未采样的营养琼脂平皿作对照皿。 10、结果计算

10.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。

10.1.1用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。

10.1.2 培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 10.2 每个测点的沉降菌平均菌落数的计算:

M1?M2???Mn

n 式中： M---平均菌落数 M=

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