内容发布更新时间 : 2024/5/3 1:41:37星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
磷钼蓝分光光度法
1 适用范围和应用领域
适用于海水中活性磷酸盐的测定
2 方法原理
在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，用抗坏血酸还原为磷钼蓝后，于882 nm波长测定吸光值。
3 试剂及其配制
3.1 硫酸溶液[c(H2SO4)=6.0 mol/L] 在搅拌下将300 mL硫酸(H2SO4,ρ=1.84 g/mL)缓缓加到600 mL水中。酒石酸锑钾-钼酸铵混合溶液
3.2 钼酸铵溶液： 溶解56 g钼酸铵〔(NH4)6Mo7O24·4H2O〕于400 mL水中。溶液变混浊时，应重配。
3.3酒石酸锑钾溶液：溶解12 g酒石酸锑钾(C4H4KO7Sb·1/2H2O)于400 mL水中 ，贮于聚乙烯瓶中。溶液变混浊时，应重配。
3.4混合溶液: 搅拌下将45 mL钼酸铵溶液加到200 mL硫酸溶液中，加入5 mL酒石酸锑钾溶液，混匀。贮于棕色玻璃瓶中。溶液变混浊时，应重配。 3.5 抗坏血酸溶液 ：溶解20 g抗坏血酸(C6H8O6)于200 mL水中，盛于棕色试剂瓶或聚乙烯瓶。在4℃避光保存，可稳定1个月。
3.6 磷酸盐标准贮备溶液：（0.300 mg/mL -P）称取1.318 g磷酸二氢钾(KH2PO4)，优级纯，在110～115℃烘1～2 h)溶于10 mL硫酸溶液及少量水中，全量转入1 000 mL量瓶，加水至标线，混匀，加1 mL三氯甲烷(CHCL3)。此溶液1.00 mL含0.300 mg磷。置于阴凉处，可以稳定半年。
3.7 磷酸盐标准使用溶液：（3.00 μg/mL-P）量取1.00 mL磷酸盐标准贮备溶液至100 mL量瓶中，加水至标线，混匀，加两滴三氯甲烷(CHCL3)。此溶液1.00 mL含3.00 μg磷。有效期为一周。
4 仪器及设备
仪器及设备如下
---分光度计：配5cm测定池；
---量筒：容量10ml、50ml、100ml、250ml、500ml
---量瓶：容量100ml、1000ml ---带刻度具塞比色管：50ml ---刻度吸管：容量1ml、5ml、10ml ---自动加液器：容量1ml ---一般实验室常备仪器和设备
5 分析步骤
5.1 绘制标准曲线
5.1 量取磷酸盐标准使用溶液0，0.75，1.50，2.25，3.00，3.75，4.50 ，6mL于25 mL具塞比色管中，加水至25 mL标线，混匀。
5.2 各加1.5 mL混合溶液，1.5 mL抗坏血酸溶液，混匀。显色5 min后，注入5 cm测定池中，以蒸馏水作参比，于882 nm波长处测定其吸光值Ai。其中零浓度为标准空白吸光值A0。
5.3 以吸光值(Ai-A0)为纵坐标，相应的磷酸盐浓度(mg/L)为横坐标，绘制标准曲线。 5.2 水样测定
按以下步骤测定样品
A）量取25 mL经0.45 μm微孔滤膜（用0.5mol/L的盐酸浸泡1~2个小时）过滤的水样至具塞比色管中，按标准曲线绘制的步骤测定吸光值Aw。
b)同时量取25 mL水按相同步骤测定分析空白吸光值Ab。
6 记录与计算
将测定数据记入表1及表2中，据(Ai-A0)做在工作曲线上查得水样中活性磷酸盐浓度(ug/L-P)，亦可用工作曲线的线性回归方程计算。
7 精密度和准确度
相对误差1.8%；重复性（r）0.015ug\\L；重复性相对标准偏差2.1%；再现性（R）0.13ug\\L，再现性相对标准偏差2.4%。
8 注意事项
本方执行中应注意如下事项：
---除非另作说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为二次水或等效纯水。 ---水样采集后应马上过滤，立即测定。若不能立即测定，应置于冰箱中保
存，但也应在48h内测完。
---过滤水样的微孔滤膜，需用0.5mol\\L盐酸浸泡，临用时用水洗净。 ---硫化物含量高于2mg\\L-S时干扰测定。此时，水样用硫酸酸化，同氮气15in，强硫化氢除去，可消除干扰。
---磷钼蓝颜色在4h内稳定。
9 实验结果
标准曲线
0.80.70.60.5吸光值0.40.30.20.10.00123456磷酸盐浓度标准曲线Y=0.1034+0.1015*x
实验数据及结果 海水样品标号 实验数据 磷酸盐浓度 海水样品标号 实验数据 磷酸盐浓度 海水样品标号 实验数据 磷酸盐浓度 海水样品标号 实验数据 磷酸盐浓度
1-1 0.500 3.91 2-1 0.709 5.96 3-1 0.665 5.53 4-1 0.523 4.13 1-2 0.551 4.41 2-2 0.682 5.70 3-2 0.772 6.59 4-2 0.506 3.96 1-3 0.541 4.31 2-3 0.730 6.17 3-3 0.726 6.13 4-3 0.505 3.96