内容发布更新时间 : 2024/11/14 15:25:59星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

红细胞裂解液的配制

我在一个公司的网站上看到的红细胞裂解液的说明书上说操作要点是：1.在37度预热；2.充分混匀细胞我就是这样做的，效果还可以。不过我只做流式细胞仪的检测，活性没测。我的裂解液是0.16M NH4Cl， 0.13mM EDTA， 12mM NaHCO3

我用的方法：

全血：裂解液=1：3，如2ml的全血加上6ml的红细胞裂解液，充分混匀后，室温静置5mim，1000rpm离心6~10min。红细胞裂解得非常充分。

0.15 M NH4CL, 0.01 M NaHCO3 and 1 mM EDTA (Sigma)

Ammonium chloride (NH4Cl) 8.29 g 0.155 M Potassium bicarbonate (KHCO3) 1 g 10mM EDTA 0.37 g 1mM H2O 1l.

Filter with 0.45μm filter aliquot in 100 ml aliquots

filter the solution to be used with 0.2μm filter.

我们用的是Tris-NH4Cl, 具体配方如下:

NH4Cl:4.15克加双蒸水500ml,取450ml;

Tris:1.0297克加双蒸水50ml,再加上上面的450ml,共计500ml,高压灭菌, 用时加10-20ml,静置5min,效果蛮好.

9月29日我用的配方

氯化铵3.735g，tris 1.3g，加在500ml水中，ph约7.2。

将全血约5ml加入配好的加入30ml裂解液的50ml试管中5分钟或15分钟，发现5分钟组细胞要多些，15分钟组细胞要少些，而且红细胞仍然有。