内容发布更新时间 : 2024/5/3 2:22:28星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

畅游学海敢搏风浪誓教金榜题名。决战高考，改变命运。凌风破浪击长空，擎天揽日跃龙门微生物的培养与应用

(60分钟，100分)

一、选择题(每小题2.5分，共50分)

上海卷利用枯草杆菌生产分泌性中性蛋白酶，以下符合该酶分离纯化的正确流1.

程是( )

①制成酶制剂 ②发酵液过滤 ③冷冻干燥 ④层析法提纯蛋白酶 A．③①④② B．②④③①

C．③④②① D．②④①③

【解析】 酶的分离、纯化流程为：用物理、化学或酶法破碎细胞→过滤获滤液→改变pH或加入硫酸铵使酶蛋白沉淀→通过层析提纯酶蛋白→通过冷冻干燥结晶酶蛋白→酶制剂。由于题中要分离纯化的中性蛋白质酶属于枯草杆菌产生的分泌物，因此不需要破碎细胞这一步了。

【答案】 B

2．下列是某种培养基的组成：蛋白胨10 g、乳糖5 g、蔗糖5 g、K2HPO42 g、蒸馏水1000 mL叙述正确的是( )

A．从化学成分看，属于天然培养基 B．含有三类营养成分

C．适合于培养自养型微生物 D．用于微生物的分离和鉴定

【解析】 天然培养基的化学成分不明确，常用于工业生产。而合成培养基的化学成分明确，常用于微生物的分离和鉴定等。

【答案】 A

3．高温灭菌的原理是( )

A．每种微生物生长的最适温度是一定的 B．微生物对高温环境不适应

C．高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动 D．高温降低了环境中氧的浓度 【答案】 C

4．要将能分解纤维素的细菌从土壤中分离出来，应将它们接种在( ) A．加入指示剂的鉴别培养基上 B．含有蛋白胨的固体培养基上

C．只含纤维素粉而无其他碳源的选择培养基上 D．含四大营养要素的培养基上 【答案】 C

上海卷在涂布有大肠杆菌的培养基上进行抑菌实验，在a、b、c处分别贴5.

浸有不同抗生素(浓度相同)的无菌滤纸片，d处滤纸片浸有无菌水。培养后的结果如图。以下判断错误的是( )

A．a处抑菌效果小于b处 B．b处的滤纸片没有沥干 C．c处抗生素无效 D. d为对照

【解析】 透明圈大的抑菌效果好，透明圈小的抑菌效果弱。d为空白对照，与d处的比较可说明a处抑菌效果大于b处；A错误。b处透明圈不规则，可说明 b处的滤纸片没有沥干；B正确。C处的与d处相同，说明c处抗生素无效；C正确。

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【答案】 A

珠海质检原油含有大量致癌的“多环芳烃”，6．(双选)分子结构十分稳定，

有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。某小组以如何筛选出能降解原油的菌株并投入除污为课题设计了有关实验。有关说法正确的是( )

A．用于筛选目的菌株的培养基其主要特点是以原油(多环芳烃)为唯一碳源 B．培养基配制完成之后需进行消毒处理

C．在选择培养基上形成的菌落，即为能分解多环芳烃的目的菌种 D．筛选出目的菌种，可用平板划线法在培养基上进行接种和计数

【解析】 为筛选出能降解原油的菌株，其培养基应该以原油(多环芳烃)为唯一碳源，A项正确；培养基配制完成之后需进行灭菌处理，B项错误；在选择培养基上，只有能利用原油中的多环芳烃这一碳源的菌种才能生长繁殖，形成菌落，即为能分解多环芳烃的目的菌种，C项正确；筛选出目的菌种，可用稀释涂布平板法在培养基上进行接种和计数，D项错误。

【答案】 AC

7．关于平板划线法和涂布平板法的叙述不正确的是( ) A．只能应用于固体培养基接种 B．都可以用于微生物的计数 C．接种培养后均可获得单菌落 D．接种用具都需进行严格灭菌

【解析】 A、平板划线法和稀释涂布平板法都只能 用于固体培养基上接种，A正确；B、稀释涂布平板法又称活菌计数，是由一个单细胞繁殖可成单个菌落这一培养特征设计的计数方法，可对微生物进行计数，而平板划线法不能用于计数，B错误；C、接种环上的菌液经过连续划线或逐步稀释，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落，C正确；D、接种环和涂布器都必须经过灭菌才能使用，D正确。

【答案】 B

8. 从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的( )

－3－5

A. 将土壤用无菌水稀释，制备10～10土壤稀释液 B. 将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上

C. 用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌 D. 从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株 【解析】 本题考查的是微生物的有关内容。加入刚果红指示剂的培养基为鉴别培养基，只能鉴别出是否为分解尿素的细菌，不能筛选。C错。故本题选C。

【答案】 C

9．在涂布平板操作时错误的是( )

A．将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B．取少量菌液滴加在培养基表面

C．将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用 D．涂布时可转动培养皿，使涂布均匀 【解析】 将涂布器先放入酒精中消毒，将沾有酒精的涂布器放在酒精灯火焰上引燃并放凉，即可涂布接种，A错误。

【答案】 A

10．有关微生物平板划线操作正确的是( )

A．平板划线数次后，在固体培养基上都可以形成由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落。

B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后无需通过火焰，马上塞上棉塞即可 C．将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可 D．最后将平板倒置，放入恒温培养箱中培养

【解析】 平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。其操作步骤是：

①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。④将冷却的

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接种环伸入到菌液中取出一环菌种。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。⑧将平板倒置放在培养箱中培养。

【答案】 D

11．(双选)在微生物的培养中下列说法不正确的是( )

A．培养基、手、接种针要分别用高压蒸汽、火焰灼烧、酒精进行无菌处理

B．统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数估计值

C．设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度

D. 纤维素分解菌产生的纤维素酶是一种复合酶，可把纤维素分解成葡萄糖

【解析】 培养基、接种针、手要分别用高压蒸汽、火焰灼烧、酒精进行无菌处理、统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以平均值作为该样品菌落数估计值，所以A、B选项符合题意。

【答案】 AB 12．(双选)下图是实验室使用某种接种方法在培养基上培养某种微生物的结果，相关叙述不正确的是( )

A．该图最可能是用平板划线法进行接种 B．该种微生物有可能是 H5N1 病毒

C．如果培养的是尿素分解菌，可加入酚红指示剂鉴定 D．该接种方法常用来准确统计样品中活菌的数目

【解析】 从图中可明显看出，这是在固体培养基上进行的平板划线法，用来接种某种微生物；病毒营寄生生活，不能用培养基进行培养，因此该种微生物不可能是H5N1病毒；在操作时，为防止杂菌污染，应进行严格的消毒和灭菌；平板划线法只能纯化该种微生物，并不能用来准确统计样品中活菌的数目，统计数目时应选用稀释涂布平板法。

【答案】 BD

13．获得纯净培养物的关键是( )

A. 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 B．用平板划线法或稀释涂布平板法接种菌种 C．适宜条件下培养 D．防止外来杂菌的污染

【解析】 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染。 【答案】 D

14．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时( ) A．葡萄糖在培养基中越多越好

B．尿素分解菌有固氮能力，故培养基中只需无机氮 C．尿素在培养基中越少越好

D．尿素分解菌无固氮能力，故培养基中的尿素为化合态氮

【解析】 尿素分解菌没有固氮能力，所以培养基中尿素作为氮源，需为化合态氮。 【答案】 D

15．在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是( ) A．对分离的菌种作进一步的鉴定 B．筛选出能分解尿素的细菌

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