内容发布更新时间 : 2024/10/1 15:25:14星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

精品文档 一．绪论

1、从某一动物培养的细胞中分离某一抗体(一蛋白的代表）的一般工艺过程。 答：生物工程下游技术的一般工艺过程（p12）

2、分离纯化某一酶制剂的主要步骤和结果如下表：

分离步骤 离心分离 硫酸铵盐析和透析 离子交换层析 亲和层析 分离体积/ml 1400 280 90 6 总蛋白含量/mg 10，000 3000 400 3 总活力单位/IU 100，000 96，000 80，000 45，000 （1） 根据上述结果，计算第2~4步骤中，每步的比活力和纯化倍数。

（2） 亲和层析的原理是什么？

3、产品的分离提取工艺应考虑那些因素？ 答：生物分离过纯化过程的选择准则（P16） 精品文档

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① 步聚少，成本低② 次序合理③ 产品规格 （注射，非注射）④ 生产规模 ⑤ 物料组成⑥ 产品形式 固体： 适当结晶， 液体：适当浓缩⑦ 产品稳定性⑧ 物性 溶解度， 分子电荷，分子大小，功能团，稳定性，挥发性⑨ 危害性⑩ 废水处理 第二章 发酵液预处理 1．

沉降速度离心的原理。（p15）

答：沉降速度法：主要用于分离沉降系数不同的物质。 2．

沉降平衡离心的原理。（p15）

答：沉降平衡法：用于分离密度不同的物质。如梯度密度离心。 3．

差速离心的概念。（p15）

答：采用不同的转速将沉降系数不同的物质分开的方法。 4． rpm与RCF的换算关系。

5.已知某一离心机的转子半径为25cm，转速为1200r/min，计算相对离心力为多大？ 第三章 细胞破碎

1除去发酵液杂蛋白质的常用方法有那些？ 答：杂蛋白质的除去（p6）

(1) 沉淀法：蛋白质是两性物质，在酸性溶液中，能与一些阴离子（三氯乙酸盐、水扬酸盐）形成沉淀；在碱性溶液中，能与一些阳离子（Ag+、Cu2+、Zn2+、Fe3+等）形成沉淀。

(2) 变性法：使蛋白质变性的方法很多，如：加热，调节pH，有机溶剂，表面活性剂等。其中最常用的是加热法。

(3) 吸附法：加入某些吸附剂或沉淀剂吸附杂蛋白质而除去。 2产品的分离提取工艺应考虑那些因素？ 答：(1) 是胞内产物还是胞外产物； (2) 原料中产物和主要杂质浓度；

(3) 产物和主要杂质的物理化学特性及差异； (4) 产品用途和质量标准； 精品文档

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(5) 产品的市场价格； (6) 废液的处理方法等。

3发酵液过滤与分离的困难的原因及解决方法。 答：第一节 发酵液过滤特性的改变 微生物发酵液的特性可归纳为： (P3)

①发酵产物浓度较低，大多为1％一10％，悬浮液中大部分是水； ②悬浮物颗粒小，相对密度与液相相差不大； ③固体粒子可压缩性大；

④液相粘度大，大多为非牛顿型流体；

⑤性质不稳定，随时间变化，如易受空气氧化、微生物污染、蛋白酶水解等作用的影响。

这些特性使得发酵液的过滤与分离相当困难。 改善发酵液过滤特性的物理化学方法（P4） 一、降低液体粘度：加水稀释法和加热法 二、调整pH：等电点沉淀法

三、凝聚与絮凝：可是悬浮颗粒间连接而体积增大，便于去除

四、加入助滤剂：助滤剂是一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。如：硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩、白土、炭粒、淀粉等。

五、加入反应剂：不影响目的产物，可消除发酵液中某些杂质对过滤的影响，提高过滤速率。

4、论述利用离心法和过滤法进行固液分离的原理、常用设备及优缺点。 答：一、离心分离（P8）

原理：利用转鼓高速转动所产生的离心力，来实现悬浮液、乳浊液的分离或浓缩。 优点：分离速率快、分离效率高、液相澄清度好等。

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