内容发布更新时间 : 2024/12/24 0:38:02星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

课后作业

1．(2018·成都龙泉二中月考)幽门螺杆菌简称Hp，主要寄生在胃幽门、胃窦等附近的黏膜上，是人类至21世纪初唯一的已知胃部细菌。Hp可产生高活性的脲酶，可将尿素分解成氨和CO2。

(1)制备幽门螺杆菌培养基时，需将培养基的pH调至________性。培养皿进行灭菌的常用方法是________。倒平板时要待平板冷凝后，将平板倒置，其主要原因是________________________。

(2)图①表示的是用________法接种培养后得到的结果。图②是在纯化过程中通过________法分离培养的结果，在培养基上接种时接种环需通过灼烧灭菌，完成图中划线操作，至少需要灼烧接种环________次。

(3)为检测某人体内是否感染了Hp，可让其服用为________法。

答案 (1)酸 干热灭菌 防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染 (2)稀释涂布平板 平板划线 4 (3)尿素 同位素标记(或同位素示踪)

解析 (1)因为幽门螺杆菌生活在胃部，所以其培养基的pH应偏酸性。对培养皿玻璃器皿可以采用干热灭菌法。平板冷凝后，将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。

(2)由图①分析可知菌落均匀分布，所以是利用稀释涂布平板法接种的，而图②是利用平板划线法接种的，在每次接种前和最后接种后都要对接种环进行灭菌，由图可知划线3次，所以至少需要灼烧4次。

(3)因为Hp可产生高活性的脲酶，所以可以让病人服用14C标记的尿素，尿素会被分解为二氧化碳和氨，定时收集呼出的气体，通过分析呼气中14C标记的CO2的含量即可判断。该方法利用了同位素标记法。

2．(2018·四川双流中学月考)莠去津是一种含氮的有机除草剂，在土壤中不易降解。为修复被莠去津污染的土壤，科研人员通过如图所示过程选育可高效降解莠去津的细菌(目的菌)。结合所学知识，回答下列问题：

14

C标记的__________，定时收集呼出的气体，

通过分析呼气中14C标记的CO2的含量即可判断。该检测方法和卡尔文研究光合作用的方法一样可称

(1)培养皿中的培养基比培养瓶中的培养基多添加了____________作为凝固剂，从功能上讲，这两

种培养基都属于____________培养基。若过程②使用的是平板划线法，则对接种环常用的灭菌方法是____________。

(2)分解莠去津的微生物属于____________(填“自养”或“异养”)微生物，培养若干天后，应选择培养液中莠去津含量____________的培养瓶进行过程②。为了避免杂菌污染，接种操作需要在____________________附近进行。图中培养过程重复多次的主要目的是____________。

(3)若要获得更高效分解莠去津的微生物，常用的方法是____________。 答案 (1)琼脂 选择 灼烧灭菌法

(2)异养 最少 酒精灯火焰 选择最高效的目的菌 (3)诱变育种

解析 (1)琼脂是固体培养基中的凝固剂，从功能上讲，这两种培养基都属于选择培养基，对培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法，对接种环常用的灭菌方法是灼烧灭菌法。

(2)莠去津是一种含氮的有机除草剂，只能利用现成的有机物作为碳源和能源的微生物属于异养型微生物。在选育过程中，因为目的菌能够分解莠去津，所以应该选择培养液中莠去津含量最少的培养瓶进行下一步接种，为了防止杂菌污染，接种操作应在酒精灯火焰旁进行，因为初选出来的培养瓶中可能不止一种微生物能够分解莠去津，所以要通过固体培养基进行纯化，而多次重复培养过程的目的就是选育最高效的目的菌。

(3)若要获得更高效分解莠去津的微生物，常用的方法是用诱变处理使其发生基因突变，即诱变育种。

3．(2018·安徽马鞍山质检)为了获得耐热耐辐射微生物资源，某生物兴趣小组在新疆库木塔格沙漠某区域取样，利用常规平板分离方法进行分离培养，定向筛选出耐高温耐辐射菌株，实验流程如下，分析并回答下列问题：

(1)生物兴趣小组选择在该区域取样的原因是______________________________。

(2)配制LB肉汤培养基需添加一定量的NaCl，其目的是____________________，对LB肉汤培养基一般采用________灭菌；驯化培养过程中，对活菌纯化并计数的方法是________，测得的活菌数往往比实际值________，原因是______________________________________。

(3)某同学为探究已纯化的菌株能否分解纤维素，他将此菌株接种在以纤维素为唯一碳源的培养基上，一段时间后，培养基上出现了菌落，该同学认为此菌株能分解纤维素，但其他的同学并不认同他的观点，你认为他们的理由是________________________________________________。

答案 (1)该区域温度较高、遭受辐射较强

(2)为微生物提供无机盐(或为微生物提供无机盐，调节渗透压) 高压蒸汽 稀释涂布平板法 低 当两个或多个细胞连在一起时，平板上只能观察到一个菌落

(3)实验缺少空白对照；操作不规范

解析 (1)根据筛选目的菌株的特点，生物兴趣小组之所以选择在该区域取样是因为该区域温度较高、遭受辐射较强。

(2)培养基中添加一定量的NaCl，其作用是为微生物提供无机盐，调节渗透压；对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法灭菌；驯化培养过程中，对活菌纯化并计数的方法是稀释涂布平板法，这种方法测得的活菌数往往比实际值低，是因为涂布培养时常常存在两个或多个细胞连在一起，而平板上只能观察到一个菌落。

(3)为探究已纯化的菌株能否分解纤维素，将此菌株接种在以纤维素为唯一碳源的培养基上，一段时间后，培养基上出现了菌落。结合实验设计要遵循对照实验的原则分析，该同学的实验设计中缺乏空白对照组，即不接种该筛选菌株，培养基中是否会出现菌落产生。此外，该同学未设置重复组，也可能会由于操作不规范等偶然因素导致培养基上出现菌落。

4．(2018·齐鲁名校二联)大肠埃希菌，俗称大肠杆菌。是人和动物肠道中的正常栖居菌。自来水一旦被它污染，就有可能引发肠道传染病，甚至流行病。因此，必须对自来水进行严格的检测，以确保饮水安全。我国规定1000 mL自来水中的大肠杆菌数不得超过3个。某同学欲对家中自来水中大肠杆菌含量是否达标，对饮用水中大肠杆菌进行了培养、计数和鉴定。回答下列问题：

(1)实验前应进行无菌处理。将漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行________灭菌。培养基进行________灭菌。对自来水龙头进行________灭菌。

(2)为测定大肠杆菌的数目，将已知________的水过滤后，将滤膜放在培养基上培养，注意滤膜与培养基完全贴紧，不能有________。可根据培养基上________的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。(取三份样品求平均值)

(3)为了鉴定大肠杆菌，在培养基中应加入________。在该培养基上，大肠杆菌的菌落呈现________色。

答案 (1)干热(或高压蒸汽) 高压蒸汽 灼烧 (2)体积 气泡 菌落 (3)伊红—美蓝 黑

解析 (1)微生物培养过程中要注意防止杂菌污染，培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，漏斗、培养皿、三角瓶和镊子等进行干热或高压蒸汽灭菌，而对自来水龙头进行灼烧灭菌。

(2)(3)欲测定饮用水中大肠杆菌数目，将已知体积的水过滤后，将滤膜放在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的菌落呈现黑色，注意滤膜与培养基完全贴紧，不能有气泡；可根据培养基上菌落的数目，计算出水样中大肠杆菌的数目。

5．(2018·湖南师大附中模拟)聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能产生PVA酶分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，请回答下列问题：

(1)下表是筛选能高效分解PVA的细菌的培养基配方，X物质最可能为________。实验中还应设置完全培养液对照组，将菌液稀释相同的倍数，通过比较菌落数目，说明选择培养基具有筛选作用。

(2)若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌________个，该方法的测量值与实际值相比一般会________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。

(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入________，用于鉴别PVA分解菌。若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，请用简洁的语言写出设计思路：____________________________________。

(4)对于挑选出的PVA分解菌，应当接种在________培养基上培养，长成菌落后，置于________℃冰箱中做临时保藏。若要长期保藏，则需采用________法。

答案 (1)琼脂 (2)1.6×109 偏小

(3)碘 配置相同PVA浓度的培养基来培养不同菌株，一定时间后通过测定白色透明圈大小来确定不同菌株降解PVA能力的大小

(4)固体斜面 4 甘油管藏

解析 (1)分析题意可知，表格是筛选出能高效分解PVA的细菌的培养基配方，应该是固体培养基，所以X物质最可能是琼脂；由于完全培养液中任何微生物都可以生长，因此对照组培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

(2)若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中PVA分解菌有：160÷0.1×104×100＝1.6×109个；由于两个或多个细菌聚集在一起只能观察到一个菌落，因此该方法的测量值与实际值相比一般会偏小。

(3)根据题意可知，“PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解时蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑”，因此要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，可在培养PVA分解菌的培养基中加入碘用于鉴别PVA分解菌；若用上述培养基比较不同菌株降解PVA能力的大小，可以用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株，一定时间后，通过测定白色透明斑的大小(或直径)来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

(4)对于挑选出的PVA分解菌，应当接种在固体斜面培养基上培养，长成菌落后，置于4 ℃冰箱中做临时保藏。若要长期保藏，则需要采用甘油管藏法。

6．(2018·哈三中模拟)回答下列有关土壤中微生物分离的问题：

(1)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择__________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是____________________________。

(2)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有____________________________(答出两点即可)。