内容发布更新时间 : 2024/6/4 9:58:13星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

PCR仪操作指南 步骤：

1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”,显示10秒中后，显示RUN-ENTER菜单:准备执行程序。

2、放入样本管，关紧盖子。

3、如果要运行已经编好的程序，则直接按《Proceed》，用箭头键选择已储存的程序，按《Proceed》，则屏幕显示:按《Proceed》选择ENABLE，则开始执行程序。

二、如果要输入新的程序，则在RUN-ENTER菜单上用箭头键选择ENTER PROGRAM,按《Proceed》，屏幕显示 按《Proceed》，

1）选择NEW,命名新的程序，最多8个字母，输入后按《Proceed》确认(如何输入字母、数字)。

2）输入程序步骤：名字输入后，显示 按《Proceed》则可以输入温度（0～100℃），按《Proceed》确认后，则可以输入孵育时间，用《Select》键移动光标，输入数字，完成后按《Proceed》确认，跳到下一步，输入方式同上。

3）选择GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达9999次）(为实际循环数－1)。

4) 选择option,显示 再选择increment,按《Proceed》确认，输入初始的温度，确认后输入时间，按《Proceed》确认，然后输入每个循环增加或减少的温度，增加用正值，减少用负值（－0.1℃～6℃），按《Proceed》确认。 选择extend, 按《Proceed》确认,输入每个循环增加或减少的时间（－60～60秒），按《Proceed》确认。 选择slop（指温度上升或下降的速率）,输入温度的改变值（－0.1～1.5℃）按《Proceed》确认，然后输入加热或致冷的速度，按《Proceed》确认。 4）选择End,输入结束步骤。

5、输入完成的程序后，到RUN-ENTER菜单，选择新程序，开始运行。 6、其它：用《pause》可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。 用《stop》或《Cancel》可停止运行的程序。 编辑程序：

1、可以用《Cancel》键删除输错的值，输入新的值后按《Proceed》确认。 2、对于未输完的程序，要先输入END，按《Proceed》将程序储存后才能删除。 3、删除已经储存的程序：从RUN-ENTER菜单中选择RUN－PROGRAM，按《Proceed》，显示主菜单，选择DELET,用《Select》选择删除。

4、查看程序的步骤：在主菜单上选择LIST，按《Proceed》，用《Select》将选择名称，再按《Proceed》，显示程序的第一步，用《Select》键向前、向后翻页查看，此时不能改变程序的值。

编辑已有的程序： 1、从RUN-ENTER菜单中选择RUN－PROGRAM，按《Proceed》，显示主菜单，选择EDIT，按《Proceed》确认，用《Select》键选择要编辑的程序，按《Proceed》显示程序的第一步。 2、用《Select》键将光标移到要改变的温度或循环的值上，键入新值，按《Proceed》确认，按《Cancel》 删除键入的值，出现空格，键入新值后确认。 注：一旦值被改变或删除，原来的值不能恢复，必须重新键入。 3、编辑时间值：必须重新键入小时、分钟、秒，按《Proceed》。 如何设置一个PCR体系： 一般分为8步：

1、预变性：可用94～95℃，2～10min,一般用5min。

2、变性：一般用94℃，30s~2min,一般45s~1min。 3、退火：温度自定，30s~2min。 4、延伸：70～75℃，一般72℃，对于〈2kb,<1min;>2kb,每增加1kb加1min。 5、循环数：一般25～35个循环。 6、最终延伸：72℃，5～15min。 7、保存：10℃，时间设为0。

8、END 半定量RT-PCR电泳图如何分析

核酸电泳仪

电泳仪主要用途是分离，鉴定，也可以纯化（将我们需要的条带割下来，进一步处理得到我们需要的核酸或蛋白）主要可以分离核酸和蛋白质。

电泳仪正是基于上述原理设计制造的。电泳是指带电粒子在电场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的不同，因此在电场中运动速度不同，根据这一特征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析，或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备，这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。

1 ．在电泳仪工作时，不要用手触摸电泳仪的输出部位。

2 ．在对电泳仪与电泳槽进行改变操作时，必须停止电泳仪输出，

3 ．不能在通电时任意插拔输出电线，这样会导致电泳仪输出保护或导致器件损坏。

使用方法 1 ．准备

在做电泳实验前，将需要做的实验内容准备好后，检查电泳槽内的液体，在确定液体没有超过电泳槽的指定线后，将电泳槽的电极端插入电泳仪的输出电压孔内，电泳槽电极的红、黑线应分别对应插入电泳仪的输出端子的红、黑插孔之中，插入时要将电极插入到底。

2 ．开机

打开电泳仪开关，电源指示灯亮，数码管显示上次实验的设定值，若本次实验与上次实验相同，则可不必再修改实验参数。

3 ．实验参数

选择“功能／设定”键，可检查：定时（t ）、电压（u ）和电流（c ）的设置状态，对于每种指定状态，可通过上、下键来修改实验参数。

1 ）定时

当定时为0 时，则将电泳仪输出设置为不定时输出（时间为正计时）。若设定的定时时间大于0 ，则将电泳仪设置为定时输出状态（时间为倒计时），该定时的时间为电泳仪工作的时间，若定时时间到，电泳仪将停止输出。

2 ）恒压输出

设定“恒压”时，该电压值为电泳仪输出的恒定电压值。此时电泳仪通过改变输出电流的大小来达到恒压输出的状态。此时电泳仪的电流设定值为允许输出的最大电流值。

若电泳仪运行时，山于电泳仪的输出负载太小，导致电泳仪的电流输出超过了电流设定值，则EPS300 自动地将恒压方式转换为恒流输出方式，此时实际输

出的电流为电泳仪的电流设定值，同时电压将小于设定值。若要避免此类情况的发生，可将电流设定值增大，或加大电泳的输出负载。

3 ）恒流输出

设定“恒流”时，该电流值为电泳仪输出的恒定电流值。此时电泳仪通过改变输出电压的大小来达到恒流输出的状态。此时电泳仪的电压设定值为允许输出的最大电压值。

若电泳仪运行时，由于电泳仪的输出负载太小，导致电泳仪的电流输出超过了电流设定值，则EPS300 自动地将恒流方式转换为恒压输出方式，此时实际输出的电压为电泳仪的电压设定值，同时电流将小于设定值。若要避免此类情况的发生，可将电流设定值增大，或加大电泳的输出负载。

三、输出

当电泳仪工作时，数码管上显示的为当前选择参数的数据。若选择的是电压或电流，则显示的是当前输出的电电压或电流的数据。电压、电流和定时的显示刚用“显示模式”来选择。 当定时运行时，若此时电泳仪为定时输出，则数码管显示的剩余实验时间，当剩余时间为1 分钟时，电泳仪发出“嘟…嘟…”间断报警音，以提醒实验者注意。当实验结束时，电泳仪停止输出，关闭数码管显示，同时发出5 秒左右的长音，以示实验结束。当报警音结束后，电泳仪恢复正常。

当设定为未定时运行，则数码管显示的实验累计时间。

电泳仪 使用方法

1． 首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。

2． 电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。

3． 接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。

4． 工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态，并拨出电泳插头。 注意事项

1． 电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。

2． 仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。

3． 由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。

4． 在总电流不超过仪器额定电流时（最大电流范围），可以多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容易影响仪器寿命。

5． 某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时，允许在稳压状态下空载开机，但在稳流状态下必须先接好负载再开机，否则电压表指针将大幅度跳动，容易造成不必要的人为机器损坏。

6． 使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外事故。