内容发布更新时间 : 2024/5/10 10:32:47星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
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2在高效液相色谱中,六通阀属于 ( )
A. 进样系统 B. 分离系统 C. 检测系统 D. 数据处理系统 三、名词解释 1容量因子：
2分离度：
四、 问答题
1 制备型HPLC与分析型HPLC的主要不同点是什么？
2简述制备型高效液相色谱常见问题及解决办法
3 一般来讲在设计分离方案时应考虑哪些事项？
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第十三章 生化药物(答案)
一.填空
1、生化药物的主要资源有动物来源、血液及其它分泌物、海洋生物、现代生物技术产品 、 微生物、植物和化学合成。
2、氨基酸有水解法，发酵法，酶转化法，化学合成法四类生成方法。其中酶转化法通用性好，是最有前途的方法。水解法中 碱水解法 解法会引起消旋作用 ， 酶水解法 解法不够彻底，故以 酸水解法 解法较为常用。
3、肽合成中，由于顺序合成的需要，必须对暂不参加反应的基团加以保护。用于保护氨基的基团常有 卞氧羰基， 叔丁氧羰基 和 9-芴甲氧羰基 。
4、以动物组织为原料提取多肽和蛋白质类物质时，为了获得安全性高，活性高，收率高的目的物，在选材上应注意的问题有 种属 、发育生长阶段 、 生物状态、 原料来源 和 原料解剖学部位 。
5、目前采用重组DNA技术制造人胰岛素的两条途径为 AB链合成法 和 发转录酶法 。 6、利用产氨短杆菌发酵法生产肌苷酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏 SAMP合成 酶的 腺嘌呤 缺陷型菌株，在发酵培养基中提供亚适量的 腺嘌呤 ；另外，改变细胞膜对5′-IMP的透性，选育Mn2?不敏感的变异株。
7、依据核酸类药物的结构特点及临床应用情况，可将此类药物分为两类，即
具有天然结构的核算酸物质类和 天然结构碱基核苷、核苷酸类结构类似物或聚合物。 8、酶在制备过程中，为了保持酶的活力，要注意防止 酶蛋白变性 ，防止 辅因子的流失 ，防止 酶被蛋白水解酶降解 。一般酶的纯度愈高，其稳定性愈 不稳定 。
9、常用的纯化多糖的方法有 乙醇沉淀法 ， 分级沉淀发 ， 季铵盐络合法 ， 离子交换层析法 ，凝胶过滤法，还有 乙醇分级沉淀法 和 电泳法 适用于粘多糖的纯化。 10、以动物的组织为原料提取纯化酶时常常需要对动物材料进行预处理，常用的预处理的方
法有 机械处理 ， 反复冻融 和 丙酮粉 。
11、粘多糖是一类含有糠醛酸 和 硫酸化的糖残基 的 酸性 糖，它
们在组织中常与 蛋白质 结合为复合物。故提取时须先经 酶解法 或 碱解法 使糖-蛋白质间的结合键断裂。 二、 名词解释：
1、生化药物：运用生物化学理论方法和技术从生物资源制取的生物活性物质，通常是aa蛋白、多肽、核酸或核苷酸类、酶及辅酶、维生素、激素等。
2、粘多糖：由动物来源的含有氨基己糖的多糖统称为粘多糖，又称糖胺聚糖。
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3、肽的固相合成：将氨基酸的C-末端固定在不溶性树脂上，然后在此树脂上依次缩合氨基酸、延长肽链、合成蛋白质的方法。 三、问答
1、生化药物的特点？
答：（1).分子量不是定值 生化药物除氨基酸、核苷酸、辅酶及甾体激素等属化学结构明确的小分子化合物外，大部分为大分子的物质（如蛋白质、多肽、核酸、多糖类等），其分子量一般几千至几十万。对大分子的生化药物而言，即使组分相同，往往由于分子量不同而产生不同的生理活性。例如肝素是由D-硫酸氨基葡萄糖和葡萄糖醛酸组成的酸性粘多糖，能明显延长血凝时间，有抗凝血作用；而低分子量肝素，其抗凝活性低于肝素。所以，生化药物常需进行分子量的测定。
（2）.需检查生物活性在制备多肽或蛋白质类药物时，有时因工艺条件的变化，导致蛋白质失活。因此，对这些生化药物，除了用通常采用的理化法检验外：尚需用生物检定法进行检定，以证实其生物活性。
（3）.需做安全性检查由于生化药物的性质特殊，生产工艺复杂，易引入特殊杂质，故生化药物常需做安全性检查，如热原检查、过敏试验、异常毒性试验等。 （4）.需做效价测定生化药物多数可通过含量测定，以表明其主药的含量。但对酶类药物需进行效价测定或酶活力测定，以表明其有效成分含量的高低。 （5）.结构确证难在大分子生化药物中，由于有效结构或分子量不确定，其结构的确证很难沿用元素分析、红外、紫外、核磁、质谱等方法加以证实，往往还要用生化法如氨基酸序列等法加以证实。
2、简述氨基酸输液的组方原理和原则，常用的氨基酸输液有哪几种类型？
答: 氨基酸输液的组方原理和原则:输入人体的氨基酸种类，数量的比例需符合机体的要求，否则不仅其利用度将下降，还会引起代谢失调，拮抗及中毒等代谢并发症。因此，所供氨基酸除质量要合格外，尚需根据组合原理确定氨基酸的比例及组成。一种优良的氨基酸输液注入身体后，各种氨基酸能得到最有效的利用，其组成平衡，使临床症状改善，体重增加而无代谢并发症，血浆游离氨基酸谱无显著变化。在氨基酸输液里，含必需氨基酸的同时，假如恰当组成的非必需氨基酸，不仅能满足合成蛋白质对这些氨基酸的要求，还会减少必需氨基酸的消耗，提高氨基酸输液的疗效。E/N之比一般在1:1~1:3之间。在氨基酸输液中，为了不使氨基酸转化为能量而被消耗，常用糖类作添加剂。
常用的氨基酸输液的类型：氨基酸营养输液、 代血浆用输液 、 止血用氨基酸输液、 婴幼儿氨基酸输液、 治疗用氨基酸输液。
3、以生物组织为原料提取纯化多肽和蛋白质，在选择分离纯化方法时应注意哪些问题？ 答：（1）根据蛋白质等电点的不同来纯化蛋白质； （2）根据蛋白质分子形状和大小的不同来纯化蛋白质；
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（3）根据蛋白质溶解度的不同来纯化蛋白质； （4）根据蛋白质电离性质的不同来纯化蛋白质； （5）根据蛋白质功能专一性的不同来纯化蛋白质；
（6）根据蛋白质疏水基团与相应的载体基团结合来纯化蛋白质； （7）根据蛋白质在溶剂系统中分配的不同来纯化蛋白质； （8）根据蛋白质选择性吸附性质来纯化蛋白质； （9）根据蛋白质的某些特殊性质进行纯化。 4、填写胰岛素生产工艺流程中的空格（字母A—N表示）。
Ａ：乙醇、草酸 Ｂ：ｐＨ2.5~3.0 Ｃ :碱化 Ｄ：ｐＨ8.0~8.4 Ｅ :碱化液 Ｆ： 酸化 Ｇ：ｐＨ3.6~3.8 Ｈ：去脂 Ｉ：ｐＨ2.0~2.5 Ｊ：盐析 Ｋ：除酸性蛋白Ｌ：ｐＨ6.0 Ｍ:除碱性蛋白结晶 Ｎ：ｐＨ6.0
5、如何使用突变菌株（产氨短杆菌）和代谢调控生产肌苷酸（IMP）？
答：第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏SAMP合成酶的腺嘌呤缺陷型菌株，在发酵培养基中提供亚适量的腺嘌呤，这些腺嘌呤除了通过补救合成途径合成菌体适量生长所需的DNA和RNA之外，没有多余的嘌呤衍生物能够生产反馈抑制或阻遏，从而解除了PRPP转酰胺酶的活性影响。此外，产氨短杆菌自身的5’-核苷酸降解酶活力低，故生产的肌氨酸不会再被分解成其他产物。在培养基中锰离子限量的情况下，产氨短杆菌的成长细胞呈伸长、膨胀或不规则形，此时的细胞膜不仅易于透过肌氨酸，而且嘌呤核苷酸补救合成所需的几个酶和中间体核糖—5’—磷酸都很易透过，在胞外重新合成大量肌苷酸。 6、如何使用突变菌株和代谢调控生产XMP?
答：黄苷酸是鸟苷酸的前体产物，选育丧失ＧＭＰ合成酶的鸟嘌呤缺陷型菌株就可能积累大量的黄苷酸，也可以再加上腺嘌呤缺陷型遗传标记，并在发酵过程中添加限量的鸟嘌呤和腺嘌呤，完全解除鸟嘌呤对肌苷酸脱氢酶的反馈抑制和鸟嘌呤、腺嘌呤衍生物对ＰＲＰＰ转酰胺酶的反馈抑制，从而使ＸＭＰ在发酵培养基中的积累大大提高。 7、填写肝素生产工艺流程中的空格（□A~□G）
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