内容发布更新时间 : 2024/9/22 1:13:42星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

第二节 分子生物学技术

[随堂检测] [学生用书P59]

知识点一 多聚酶链式反应程序

1. 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历30多次下述循环：90～95 ℃下使模板DNA变性、解链→55～60 ℃下退火(引物与DNA模板链结合)→70～75 ℃下引物链延伸。下列有关PCR过程的叙述中，不正确的是( )

A．变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键 B．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸

C．退火过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高

解析：选B。变性过程的目的是解链，与解旋酶的作用相同，所以变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键，A项正确；PCR技术是在较高温度条件下进行的，该过程需要热稳定TaqDNA聚合酶，且由于该过程的产物是DNA，所以需要的原料是四种游离的脱氧核苷酸，故B项错误；退火过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的，C项正确；PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高，D项正确。

2．下图是PCR反应过程中哪次循环的产物( )

A．第一次循环 B．第二次循环 C．第三次循环 D．第四次循环

解析：选A。在PCR反应中，以引物为标记，第一次循环时加入的DNA为模板，两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的每个子代DNA中只有一种引物。

知识点二 目的DNA片段的体外扩增

与鉴定

3．下列关于DNA双链的叙述，错误的是( )

A．通常将DNA的羟基末端称为5′端，而磷酸基团末端称为3′端 B．通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团末端称为5′端 C．通常DNA只能从3′端延伸DNA链

D．通常DNA不能从5′端延伸DNA链

解析：选A。通常将DNA的羟基末端称为3′端，磷酸基团末端称为5′端。 4．下列关于操作过程的叙述中，错误的是( )

A．PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌

B．PCR缓冲液和酶应分装成小份，在－20 ℃储存 C．PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化

D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换

解析：选C。为避免外源DNA等因素污染，PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌，A正确。PCR缓冲液和酶应分装成小份，在－20 ℃储存，使用前，将所需试剂从冰箱取出，放在冰块上缓慢融化，B正确，C错误。微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换，以免其他成分污染，D正确。

5．DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( ) A．砖红色 C．紫色

B．橘黄色 D．蓝色

解析：选D。DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，D正确。还原糖与斐林试剂水浴加热生成砖红色沉淀，A错误。脂肪被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色，B错误。蛋白质与双缩脲试剂生成紫色化合物，C错误。

6．多聚酶链式反应(PCR)是一种体外扩增DNA片段的技术。可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。回答以下问题：

(1)

细

胞

内

DNA

复

制

过

程

中

，

引

物

的

作

用

是

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________， 而且DNA复制的前提是________。

(2)PCR利用了________原理，可通过控制温度来控制双链的解旋与结合。

(3)PCR技术用到的酶是________________，与细胞内DNA复制时发挥相同作用的酶相比区别在于______________________。

(4)下面表格是DNA体内复制与PCR反应的部分比较结果。通过比较分析，请推导出PCR反

应

合

成

DNA

子

链

时

能

量

来

源

于

_____________________________________________________。

原料 ATP