AYL-S7-343 脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程3.0 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/6/16 19:07:52星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

安徽医科大学第一附属医院检验科

作业指导书 文件编号: AYL-S7-337 版本:3.0 页码: 第1页 共4页 编写者:沈继录 文件发放范围:微生物组 审核者: 批准人: 生效日期:2012.1.1 文件年度审核 审核者: 日期: 审核者: 日期: 审核者: 日期: 审核者: 日期: 脓及伤口标本细菌学检验标 准操作规程

1.目的

规范脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程,确保检验结果准确可靠。 2.适用范围

脓液培养或涂片检查。 3.标本

3.1 标本类型 脓液。 3.2 标本采集。

3.2.1 开放性脓肿和脓性分泌物 用无菌盐水或75%酒精擦去表面渗出物,用拭子深入溃疡深处采集2支拭子,一支为涂片检查用,1支作培养用。

3.2.2 大面积烧伤的创面分泌物 用灭菌棉拭取多部位创面的脓液或分泌物,置灭菌试管内(注明采集部位)送检。

3.2.3 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后,用注射器抽取,将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。疑为厌氧菌感染时,应作床边接种或置厌氧运送培养基内送检。

3.3 标本拒收标准。

3.3.1 标本标识与化验申请单不符。 3.3.2 标本不是无菌留取。

3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过2小时。 4.试剂、仪器

4.1 革兰染液、氧化酶试剂、3%过氧化氢、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等。

4.2 VITEK鉴定系统;革兰阴性菌鉴定卡(GNI+)、革兰阴性细菌药敏卡(GNS)、革兰阳性细菌鉴定卡(GPI)、革兰阳性细菌药敏卡(GPS)、真菌鉴定卡(YBC)、药敏纸

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作业指导书 文件编号: AYL-S7-337 版本:3.0 页码: 第2页 共4页 片、ATB板条等,有效期及储存条件参见试剂说明书。

4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、CO2培养箱等。 5.细菌鉴定和药敏质控 参见《质量管理程序》。 6.检验步骤

接受标本后。立即对标本进行编号、登记。

6.1 涂片检查 革兰染色镜检,报告“查见革兰X性菌,形似XX菌”或报告“未查见细菌”。

6.2培养

6.2.1 一般细菌培养 标本接种血琼脂平板和麦康凯琼脂平板(或EMB、中国蓝琼脂平脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程板),35℃培养18~24小时后,根据菌落特性和形态染色,作出初步判断,再按各类细菌的生物学特性进行鉴定。

6.2.2厌氧菌培养 取脓液标本接种厌氧血琼脂平板及其他厌氧选择平板,置于厌氧环境培养,根据生长情况及涂片染色结果,按厌氧菌生物学特性进行鉴定。

6.2 3嗜血杆菌及奈瑟菌培养 接种于巧克力琼脂平板,置5%~10%CO2环境中培养。

6.2 4结核分枝杆菌培养 参见《分枝杆菌属检验标准操作规程》 6 2.5真菌培养 可用沙氏培养基。

7.操作流程 脓液及创伤感染分泌物 涂片染色 需氧培养 厌氧培养

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作业指导书 文件编号: AYL-S7-337 版本:3.0 页码: 第3页 共4页 血琼脂平板、麦康凯 厌氧血琼脂平板 35℃培养18~24h 35℃厌氧培养平板,

观察菌落特征及涂片 耐氧试验 染色 仪器或手工细菌鉴定及 厌氧血平板生长 药敏试验 发出报告

8.结果报告

查见致病菌,报告菌名和药敏结果。 9.注意事项

9.1 对于某些特殊病人(如气性坏疽病人),在菌种鉴定及药敏试验结果尚未报出之前,根据涂片镜检情况,采取治疗措施。

9.2 厌氧菌培养取得样本后,拭子应立即置于厌氧运送管,尽可能少让样本暴露于空气中。穿刺时最好以针筒直接抽取,避免接触环境中氧气。

10.临床意义

从脓液及创伤标本中能检出的病原微生物种类很多,最常见的由葡萄球菌和链球菌引起的局部化脓性感染,包括有毛囊炎、疖、痈、甲沟炎、扁桃体炎、乳腺炎、中耳炎、外耳道疖肿、外耳道炎、细菌性结膜炎、脓疱疮、外科切口及创伤感染等。化脓性骨髓炎、化脓性关节炎的主要致病菌是金黄色葡萄球菌。慢性骨髓炎和慢性化脓性关节炎病原菌中,除上述细菌外,主要为结核分枝杆菌。脓液标本中可检出铜绿假单胞菌、变形杆菌和类白喉棒状杆菌等,常为继发性感染或污染所致。气性坏疽主要致病菌为产气荚膜梭菌,其次为水肿梭菌、败毒梭菌及溶组织梭菌等。坏疽常继发葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌或其它需氧菌感染。器官脓肿和机体深部组织的脓肿多为厌氧菌感染。

11.危急值报告

培养出产气荚膜梭菌及时按传染病报告。