内容发布更新时间 : 2024/5/18 5:39:29星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

实验背景：

?某细菌肥料是由相关的不同微生物组成的一个菌群并通过混合培养得

到的一种产品。活菌数的多少是质量好坏的一个重要标志之一，请设计一个实验方案来检测该细菌肥料的质量？在实验过程中为减少实验误差提高数据的可靠性，应该注意那些操作步骤？ 我们的思路：

①题目分析②实验设计③解题总结

一、题目分析

某细菌肥料是由相关的不同微生物组成的一个菌群并通过混合培养得到的一种产品。活菌数的多少是质量好坏的一个重要标志之一，请设计一个实验方案来检测该细菌肥料的质量？在实验过程中为减少实验误差提高数据的可靠性，应该注意那些操作步骤？

从题目我们可以看出该题目的要求是检测单位质量细菌肥料中的活菌数；减少实验误差。因此，必须考虑以下几个问题： 1、该细菌肥料中的不同微生物有哪几种？

通过查找资料我们了解到细菌肥料，一般有瘤菌剂、固氮菌剂、磷细菌剂、抗生菌剂和复合菌剂等分成。由此，我们推断该细菌肥料中大概有细菌、真菌和放线菌。

2、如何分离纯培养这些微生物？ 选择性培养基培养； 用平板分离法分离。 3、怎样减少实验误差？ 解决方法

采用平板培养计数法要求操作熟练、准确，否则难以得到正确结果。 要求样品成分混匀，保证每个活细胞都能分别形成菌落；尽可能选用选择性培养基，保证计数菌落围有效菌落。

思考之后，鉴于，以上几点我们综合考虑，最终决定采用稀释涂布平板法分离纯化微生物并测定样品中活菌数。 二、实验设计 1、实验目的

检测单位质量样品细菌肥料中的活菌数 。 2、实验原理

利用选择培养基，分离培养样品中的不同微生物。不同的培养基，由于营养成分不同，因此具有选择性，适合改培养基的微生物就可以生长；反之，则不能生长，根据不同的选择培养基，我们可以分离出样品中的不同微生物。

平板菌落计数法 ，是种统计物品含菌数的有效方法。方法如下：将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液涂布到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞；统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。 3、实验过程

（一）样品的处理和稀释

1.以无菌操作取检样10g，放于盛有90ml灭菌蒸馏水的灭菌三角瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠)，经充分研磨、摇床震荡制成1：10的均匀稀释液。

2.用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌蒸馏水

稀释液的试管内，振摇试管混合均匀，制成1：100的稀释液。 3.另取1ml灭菌吸管，按上项操作顺序，制10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次即换用1支1ml灭菌吸管。 操作示意图：

【注意1：样品稀释误差】

1、为减少样品稀释误差，在连续递次稀释时，每一稀释液应充分振摇，使其均匀，同时每一稀释度应更换一支吸管。

2、在进行连续稀释时，应将吸管内液体沿管壁流入，勿使吸管尖端伸入稀释液内，以免吸管外部粘附的检液溶于其内。

3、为减少稀释误差，最好采用取10mL稀释液，注入90mL缓冲液中。 （二）培养基的配置及倒平板

1、牛肉膏蛋白胨培养基（培养细菌用) 2、高氏I号培养基（培养放线菌用） 3、马丁氏琼脂培养基（分离真菌用） 倒36个培养皿，操作图如下：