内容发布更新时间 : 2024/5/30 5:19:42星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
Waters e2695高效液相色谱仪操作规程
1 目的
指导和规范Waters e 2695高效液相色谱仪的操作。 2适用范围
该操作规程适用于Water e 2695高效液相色谱仪的操作。 3职责
检验员应按操作规程进行仪器操作，质量监督员负责监督该操作规程的正确执行。 4操作
4.1仪器组成和开机 4.1.1仪器组成
本仪器由Waters e 2695分离单元、Waters 2998二极管阵列检测器、Waters ELSD 2424 蒸发光散射检测器、Empower3色谱工作站和打印机组成。
Waters e2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气，可 容纳120个样品瓶的自动分离单元，柱温箱，内置的柱塞杆密封垫清洗系统，溶剂瓶托盘； 显示器，键盘用户界面。 4.1.2开机
4.1.2.1依次接通Waters e 2695分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。 4.1.2.2接通Waters e2695分离单元后，约20s仪器开始自检，约3mn内各部件的 初始化完成，待主屏幕上方标题区出现“Idle”时，仪器进入待命状态。 4.2溶剂管路系统的准备 4.2.1流动相脱气
确认所有溶剂管路都充满溶剂，按[Menu／Status】，进入“Status(1)”屏幕，光标选 “Degasser”，按[Enter】。 4.2.2灌注
当色谱仪流路没有溶剂或系统中有空气时，需进行干灌注(DryPrime)，注入流动相。 否则，进行湿灌注(Wet Prime)以驱除气泡。干灌注：按主机面板上[Menu／Status】，进入 “Status(1)”显示，按[Direct Function】，选择“Dry Prime”，选溶剂通道，如Open A，选 “DurationIIi按数字键输入5分钟，按”COntinue”，待限定时间结束后，重复操作，使所需 的溶剂通道注满流动相。湿灌注：进入“Status(1)”显示，选溶剂通道，输入100％，按[Direct Function]，选“Wet Prime”，按【OK】，根据面板提示设置流速及时间(默认流速为7．5ml ／min，一般不用更改，时间可设置为5min)，按【0K】。 4.3样品管理系统的准备 4.3.1冲洗自动进样器 在“status(1)”，屏幕下，光标选“Composition”，输入流动相的组成。按【Direct Function]， 光标选“Purge Injector”，按【Enter]，显示“Purge Injector”屏幕，输入“Sample Loop Volumes 6．0”，光标下移“Compression Check”，按任意数字键，按【OK]。 4.3.2冲洗进样针
在主屏幕下，按【Diag]，显示“Diagnostics”屏幕，按【Prime Ndl Wash】，显示“Prime Needle Wash”屏幕，按[Start]，30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close】、【Exit】。 4.3.3冲洗柱塞杆密封垫
在主屏幕下，按【Diag]，显示”Diagnostics”屏幕，按【Prime Seal Wash】，显示“Prime Seal Wash”屏幕，按[Start]，30s内应见溶剂从废液排放口流出。按【Close】、【Exit】。待排放口有水流出，按【Half】、【Close】、【Exit】。
4.3.4装入样品与转盘
打开样品舱门，显示\屏幕，将样品盘取出，把样品瓶插入样品盘后， 装 入样品盘，按【Next】直至所有样品盘装毕，关好舱门。 4.4色谱柱平衡
换上检验所需的色谱柱和流动相，进入\”显示，选择流路、设定流速、柱温， 按【Enter】开始注入流动相，通常情况下约1 5～30分钟色谱柱可达到平衡，可以开始进样， 采集数据。
5 Empower 3软件的应用 5.1 建数据采集方法
5.1.1双击电脑屏幕上的\快捷图标，出现Empower登录界面，输入用户名 和密码。
5.1.2单击高级键，选择用户类型和QuickStart界面。 5.1.3选择QuickStart界面，点击“确定”，然后选择选定的操作项目以及色谱系统(仅 查看数据可选择色谱系统中的“没有系统”)，单击“确定”。 5.1.4登录Empower的QuickStarlt界面。
5.2 编辑仪器方法和方法组（以e2695_2998为例）。 5.2.1．采集栏单击“方法组编辑向导”： 5.2.2选择“新建”选项。 5.2.3弹出仪器方法编辑器。 5.2.4单击“2695”，弹出2695编辑界面。
5.2.4.1 Aliance系统(包括2695、2795和2695D)通用编辑页面中，可选择“单次输送 体积”，请针对不同的流速选定适当的单次输送体积，以确保最佳的流速精度与准度。 5.2.4.2查看脱气选项，确认设置正确。 5.2.4.3流量选项中设置“泵模式”、“总流量”以及流动相配比。 5.2.5单击2998，弹出2998编辑界面。
5.2.5.1 3D数据采集：在通用栏中选择启用3D数据，输入检测波长的范围； 5.2.5.2采集2D数据，点击“2D通道”，最多可同时采集8个不同波长的通道的数据。 5.2.6点击“文件”，选择“另存为”：输入仪器方法名称，点击“保存”；点击“文件”， 选择“退出”。
5.2.7在被选项中选择所需的仪器方法名称，点击“下一步(N)”。
5.2.8在下拉菜单中选择所需的处理方法和报告方法（如果没有合适的方法选择“无处 理”、“无报告”)，点击下一步。
5.2.9输入方法组名称，单击“完成”。 5.3进样
点击进入“平衡系统／监视基线”界面，选择相应的仪器方法，点击“平衡／监视器， 在监视窗口监视基线至系统平衡，停止系统监视状态，点击“进样”。
5.3.1．单进样：点击，进入“定义单进样参数”编辑界面，输入样品名、功能、方法组 等参数，点击“进样”。
5.3.2使用向导建立样品组和样品组方法。 5.3.2.1选择“运行样品”，然后单击“样品队列”，进入样品列表。 5.3.2.2单击“新建样品组向导”，建立样品组。 5.3.2.3选择创建样品组方法类型为“Lc或PDA”，然后点击“定义样品板”。
5.3.2.4在“选择标准进样在那里开始”中选择合适的选项。检查开始加载样品瓶的位置 是否正确，点击“下一步”。
5.3.2.5在描述标样中需要设置一下内容：样品组中的标样数：×；每瓶标样进样次数：X；进样体积：x；运行时间：XX；方法组XXX；点击“选项”：输入下一进样延迟时间X；点击 下一步。
5.3.2.6样品数：X；每瓶样品进样次数：X；进样体积：X；运行时间：X；方法组X；点 击选项：输入下一进样延迟时间X；点击下一步。
5.3.2.7在识别标准样界面中，输入标样名称，增量后缀使用1．在识别样品界面中，输入样品名称，增量后缀使用a。点击下一步。 5.3.2.8运行模式选项中选择“只测试”。查看摘要，点击下一步。【注：弹出组分编辑器，输入标样中每个组分的名称(内标不需要输入含量)。可以直接关闭该窗口，在处理数据的时候再添加】。
5.3.2.9点击完成，在菜单栏中选择文件。 5.3.2.10为方法组命名并保存样品组方法。 5.3.2.11单击“样品队列”，打开运行样品窗口，点击运行当前样品组方法键，选择运行。 5.3.2.11选择需运行的样品组名称，点击运行。
5.3.2.13样品组运行过程中，在“正在运行”栏中正在运行以及运行完毕的样品以红色 显示。(注：以向导建立的样品组首行功能一般为清除校正，一般在运行样品前删除该行或 改为“平衡”。)
5.4建立数据处理方法 5.4.1 2D数据处理方法
5.4.1.1单击“浏览项目”键，在“样品组”中选择目标样品组。 5.4.1.2在样品组上点击鼠标右键选择“查看相关→通道”，样品组在单个通道中显示。 5.4.1.3选择定最低浓度的标样，点击鼠标右键，选择下拉菜单中的查看，会显示未处 理的色谱图形。
5.4.1.4点击处理方法向导快捷键，选择创建新处理方法，点击确定。
5.4.1.5确认处理类型为LC，积分方式可选择为传统，再点击使用处理方法向导，选择 确定。
5.4.1.6常按鼠标左键，选择色谱图上最窄峰。(注：在色谱图区域方可以放大某个需 要监测的峰。点击鼠标右键全视图可以还原色谱图。)
5.4.1.7在色谱图的积分界面选择一段典型基线作为积分的阈值，点击下一步。 5.4.1.8常按鼠标左键，在基线上选取积分的起止时间点。
5.4.1.9建议选择最小峰高，选择所要积分的高度最小峰(或键入相应数值)。小于此 峰高90％的峰将不被积分。点击下一步。
5.4.1.10定量方法选择面积，组分信息选择含量，校正类型选择线性。点击下一步。 5.4.1.11跨通道内标样界面点击否。
5.4.1.12因为选择的是标样，点击峰1可以看到一个下拉菜单选择相应的组分名称或 者键入运行样品相应的名称。添加组分名称相匹配的标准含量，然后点击下一步。 5.4.1.13如果是多点校正样品，跳过添加含量的窗口直接点击下一步。(单点校正可在 这里添加含量)。
5.4.1.14选择外标法：
5.4.1.15选择单一内标样，需要在下拉菜单中选择或键入内标相应的名称，然后点击 下一步。
5.4.1.16选择多重内标需要输入所有内标的名称。
5.4.1.17为处理方法命名，点击完成。色谱图界面会显示该处理方法应用后的色谱结 果，包括积分。