内容发布更新时间 : 2024/12/29 23:03:37星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
药理学基础实验
实验一 药理学实验的基本知识和技术 6课时
一、动物实验的基本知识和技术 (一)实验动物的要求和选择
药理学实验要求根据不同的实验目的选用相应合格的医学实验动物。实验动物按微生物控制分为四级:一级为普通动物,要求不带有人兽共患病的病原体以及体外寄生虫;二级为清洁动物,在一级要求基础上还必须不带有动物传染病的病原体;三级为无特定病原体的动物;四级为无菌动物。药理教学实验可选用一级普通动物,科研实验必须用二级以上的实验动物。
1.青蛙和蟾蜍 其心脏能在离体情况下保持较持久地节律性搏动,可用来观察药物对心脏的作用;其坐骨神经腓肠肌标本可用来观察药物对周围神经、横纹肌或神经肌肉接头的作用,用于局麻药和肌松药实验。
2.小鼠 最为常用,易大量繁殖,适用于需要大量动物的实验,如半数致死量测定和药物的初筛实验。
3.大鼠 用途与小鼠基本相同。主要用于一些用小鼠不便进行的实验,如血压实验等。大鼠对炎症反应较为灵敏,其踝关节炎模型常用于观察药物的抗炎作用。
4.豚鼠 对组胺特别敏感,是筛选平喘药和抗组胺药最理想的动物。
5.家兔 性情温顺,易饲养,亦是药理实验中最常用的动物之一,用于观察药物对心脏、血压、呼吸的影响。
6.狗 易于通过驯养与人合作,因而很适合于慢性实验,如用手术造成胃瘘、肠瘘以观察药物对胃肠蠕动及分泌功能的影响;高血压的实验治疗;新药临床前毒性试验等。
(二)实验动物的捉持方法
2.小鼠 右手提起鼠尾,放在鼠笼(或其他粗糙面)上,向后轻拉其尾,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤,并以左手小指、无名指压其尾部于手掌尺侧。另一方法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺侧和小指夹住尾根部,然后用左手拇指和食指捏住头颈部皮肤。
(三)实验动物的给药方法 1.灌胃
小鼠:左手捉持小鼠,使头部朝上,颈部拉直,腹部朝向操作者,右手持灌胃管,自口
角插入口腔,使灌胃管与食管成一直线,再从舌面紧沿上腭缓慢进入食管2cm~3cm,将药液缓慢注入。注意操作要轻柔,防止损伤食管。如遇阻碍应退出重插,不可用力强插,以免刺破食管或误入气管,致动物死亡。
2.皮下注射
小鼠:一般需两人合作,一人左手捏住小鼠头部皮肤,右手拉住鼠尾使小鼠固定;另一人左手捏起背部皮肤,右手持注射器将针头刺入背部皮下。拔针时左手捏住针刺部位片刻,以防药液逸出。亦可由一人操作,将小鼠放在粗糙面上,左手拉鼠尾,趁小鼠向前爬动时,右手持注射器迅速将针头刺入小鼠背部皮下,推注药液。或左手捉持小鼠,右手持注射器,针尖从右侧肋缘上刺入皮下,向前推至右前肢腋下部位,将药液推入。
3.肌内注射
小鼠和大鼠:因其肌肉较少,肌内注射不常用。 4.腹腔注射
小鼠:左手捉持小鼠,使腹部朝上,头部下倾,右手持注射器,取30度角在下腹左侧或右侧向头端刺入腹腔。注意刺入腹腔时有落空感,刺入不能太深、太靠上,以免伤及肝脏。
5.静脉注射
小鼠:多采用尾静脉注射。将小鼠置入一特制的固定筒内,使鼠尾露在外面。用75%酒精涂擦鼠尾或将鼠尾置入45℃左右温水中浸泡半分钟,使血管扩张。左手捏住鼠尾,右手持注射器,选择鼠尾两侧静脉中扩张最明显者,使针头(选用4号针头)与鼠尾呈3~5°角(几乎与鼠尾平行)刺入血管,推入药液。注意穿刺时应从远端(近尾尖)开始,以便失败后可在第一次穿刺点的近心端重新穿刺。注射完毕,用棉球按压穿刺点止血。
(四)实验动物的麻醉方法
1.吸入麻醉 小鼠、大鼠常用乙醚吸入麻醉。将5~10ml乙醚浸湿的脱脂棉球放入一玻璃容器底部,随即将动物放在该容器的网状隔板上,盖上盖,约20~30s动物进入麻醉状态。亦可将浸湿乙醚的棉球放入小烧杯中,扣置在动物的口鼻部,让其吸入麻醉。
2.注射麻醉 是最为常用的一种麻醉方法。常用药物有戊巴比妥钠、硫喷妥钠、乌拉坦等。
实验二 不同剂量对药物作用的影响 6课时
【实验目的】 观察不同剂量水合氯醛对小鼠作用的差异。 【实验材料】
器材:粗天平、1ml注射器。
药品:2.5%、5%、10%水合氯醛溶液。 动物:小白鼠4只。 【实验步骤】
1.取小鼠4只编号并以1%品红/乙醇溶液涂毛作不同记号。正常对照组不作标记。 2.分别称其体重及观察小鼠正常活动情况。
3.各鼠经腹腔注射2.5%、5%、10%的水合氯醛溶液0.1ml/10g,正常对照组腹腔注射生理盐水0.1ml/10g。
4.分别置于小笼中,密切注意先后出现的反应。 【实验提示】
1.注射药物前,应密切观察小鼠正常的活动情况,以便用药后对照观察。 2.掌握腹腔注射的正确方法,给药剂量一定要准确。
3.小鼠对水合氯醛可能出现的反应,按由轻到重程度有:活动增加、呼吸抑制、翻正反射减弱、消失、反射亢进、麻醉、死亡等。
4.比较各鼠所出现反应的严重程度和发生快慢。 【实验思考】
根据所学的药理知识,思考各鼠出现反应快慢程度的原因。 【实验体会】
1.掌握小鼠的捉拿方法及正确的腹腔注射方法。 2.学会观察药物剂量对药物作用的影响
不同剂量水合氯醛对小鼠作用的差异
鼠号 体重(g) 剂量(ml/10g) 潜伏期 给药前表现 给药后表现 1 2 3 4
【实验测试】
了解药物的剂量和作用的关系对于进行药理试验和临床用药有何重要意义?
实验三 不同给药途径对药物作用的影响 4课时
【实验目的】 观察不同给药途径对硫酸镁作用的影响 【实验材料】
器材:粗天平、1ml注射器、小鼠灌胃针头。 药品:15%硫酸镁(含水)溶液。 动物:体重相近的小白鼠4只。 【实验步骤】
取小鼠4只,分别称重标记。一只由腹腔注射15%硫酸镁溶液0.1ml/10g;另一只用同样剂量的硫酸镁灌胃,其他两只小鼠按体重分别腹腔注射和灌胃生理盐水,再将两组小鼠置小笼中,观察其表现有何区别。
【实验提示】
1.不要误插气管或插破食管,前者可致窒息,后者可出现如同腹腔注射时的吸收症状,重则死亡。
2.注射后作用发生较快,需留心观察。 【实验思考】
根据所学的药理知识,思考各鼠出现不同反应的原因。 【实验体会】
1.熟练掌握小鼠的捉拿方法及正确的灌胃技术。 2.密切观察小鼠的反应,及时记录动物的情况 【实验报告】
不同给药途径对硫酸镁作用的影响
鼠号 体重(g) 给药量(ml/10g) 给药途径 给药前表现 给药后表现 1 2 3 4
【实验测试】
给药途径不同时,药物的作用为什么有的会出现质的差异,有的则产生量的不同?