内容发布更新时间 : 2024/11/5 13:36:12星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
海藻糖对液态低温保存血小板保护作用的实验研究(一)
作者：崔云，刘璐，黄成垠，尹其华,黄鹰 〔摘要〕
目的：研究海藻糖对液态低温（4℃）保存血小板的保护作用。方法：采集兔心脏血，按常规方法制备浓缩血小板（CP），在CP中加入不同浓度的海藻糖，4℃储存，用51Cr铬酸钠进行标记后自体回输入兔体内，于回输后1、24、48、72h抽取兔耳动脉血，测定放射性计数率，计算24、48、72h血小板存活率，同时设常温对照组及单纯4℃储存的低温对照组进行比较。结果：加入不同浓度海藻糖各储存组的血小板寿命明显长于低温对照组，并且随着海藻糖浓度的增加而延长。结论：海藻糖可延长4℃液态保存血小板的寿命，对血小板具有保护作用。
〔关键词〕海藻糖；血小板；液态；储存；4℃；51铬 Abstract：ObjectiveTostudytheprotectionoftrehaloseforliquidrabbitplateletsstoredat4℃tracedby51Cr.MethodsCardiacbloodwastakenandmadeintoconcentratedplatelet(CP).CPwerestoredatdifferentconditions,suchaslowtemperatureandlowtemperature+differentdoseoftrehalosefor24h.Plateletsweretransfusedintorabbits’bodiesafterbeinglabelledwith51Crandplateletlifespanof24,48,72hwascalculated.ResultsAftertrehalosewasaddedintotheplateletsstoredat4℃,thelifespanwasobviouslylongerthanthatofplateletsstoredatlowtemperature.Andwiththedoseincreasing,thelifespanofplateletswesprolongedobviouslytillthedosewasmorethan50mg?ml-1.ConclusionTrehalose，protectingplatelets,canprolongthelifespanofliquidplateletsstoredatlowtemperature.
Keywords：trehalose;platelet;liquid;storage;4℃;51Cr
海藻糖对液态低温保存血小板保护作用的实验研究在对大量失血和化疗、放疗等处理造成血小板减少患者的治疗过程中,需要进行血小板输注。血小板在储存过程中存在的一些不足，使之不能适应临床需求，如：22℃常温振荡储存易使血小板遭受细菌污染，污染几率是低温储存的50倍，输入体内后可能会造成机体脓毒性败血症，并且储存时间短于5d；深低温可长期大量储存血小板,并能够进行远距离运输,有效利用全血中的血小板成分，但血小板深低温储存时所用的保护剂二甲基亚砜（DMSO）对患者有毒副作用，在洗涤去除DMSO的过程中，血小板易被激活、损伤而丧失其临床应用价值〔1〕。 近年来，血小板液态低温保存倍受关注。随着对液态低温下血小板诱导活化及在体内清除机制研究的不断深入，血小板保存技术取得了突破性的进展。液态低温可使血小板被激活、损伤，寿命缩短。海藻糖（trehalose）是一种非还原性双糖，能抑制寒冷所致的血小板膜侧向分离和血小板聚集〔1〕，阻止血小板活化、损伤，是很有潜力的血小板低温保护剂。本实验采用同位素51Cr示踪技术对海藻糖是否可延长4℃液态储存中血小板的寿命进行探索。 1材料和方法 1.1主要材料
海藻糖：C12H22O11?2H2O，相对分子质量378.33，上海恒信化学试剂有限公司（原上海试剂二厂）生产；ACD抗凝剂：型号DIN00788139，美国BaxterFenwal公司生产；GC911γ放射免疫计数器：科大创新股份有限公司中佳分公司生产。2.0～2.5kg健康雄性新西兰大白兔21只，9～12月龄，由东南大学医学院实验动物中心提供。 1.2方法
1.2.1制备浓缩血小板（CP）
每只兔取10ml心脏血，与1.5mlACD抗凝剂混匀，1000r?min-1离心10min；取上层血浆至另一离心管中，再以3000r?min-1离心20min（22℃）；之后将上层血浆移至另一试管中备用，下层血小板中加备用自体血浆1ml，使血小板悬浮。
1.2.2储存CP
第1组（常温对照组）：将以上制备的CP置于22℃水浴锅中温浴24h；第2组（低温对照组）：将以上制备的CP置于4℃冰箱储存24h；第3～8组：CP中依次加入浓度为20、30、40、50、60及70mg?ml-1的海藻糖1ml，混匀，37℃水浴锅中温浴后于4℃冰箱储存24h。