内容发布更新时间 : 2024/5/2 12:27:47星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

第1课时 大肠杆菌的培养和分离

考试要求

知识内容 考试属性及要求 考情解读 1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进大肠杆菌的培养和分离 行细菌培养的操作。 加试 2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的画线培养。 3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。 一、微生物培养的基本条件

1.微生物基础知识

(1)微生物的特点：结构简单，形体微小。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构。体内一般不含叶绿素，不能进行光合作用。 (2)细菌的外形与大小 ①外形分类

②大小：单细胞不分枝的原核微生物，细胞微小而透明。通常用适当染料染色后，再显微镜观察。

(3)细菌的繁殖：细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20分钟分裂一次。 (4)菌落

①概念：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。(如图)

②作用：细菌的菌落特征因种而异，菌落是鉴定菌种的重要依据。 2.培养基的种类 (1)按物理性质分类

种类 固体培养基 液体培养基

(2)按培养基的用途分类

种类 选择培养基 鉴别培养基

3.无菌技术

是否含凝固剂 是 否 用途 主要用于微生物的分离与鉴定等 主要用于扩大培养或工业生产 制备方法 加入某种化学物质 加入某种试剂 用途 从众多的微生物中分离所需微生物 鉴别不同种类的微生物 (1)含义：无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，保持微生物的纯培养，而且在分离、转接时亦能防止其他微生物污染。 (2)无菌操作

①对实验空间、操作台可用紫外线或酒精消毒，操作者的手用酒精消毒。

②实验用的培养器皿和培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种环用灼烧方法灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

1.结合所学知识，完成下图横线上大肠杆菌的结构名称，然后思考：

(1)大肠杆菌与酵母菌相比，在结构上最主要的区别是什么？

答案 大肠杆菌是原核生物，与酵母菌相比，最主要的区别是没有由核被膜包被的细胞核。 (2)大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌，在肠道中一般对人无害，但也有一些菌株对人体是有害的，可以侵袭肠黏膜并产生毒素。但是，任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。

(3)应用：大肠杆菌是基因工程技术中被广泛采用的工具。 2.判断下面培养基的各种成分能提供的营养物质类别

成分 FeSO4 蔗糖 (NH4)2SO4 维生素

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提供的营养

无机盐 碳源 氮源 生长因子 小贴士 ?1?碳源的种类是判断微生物同化作用类型的依据，能利用无机碳源的生物是自养型的，只能利用有机碳源的生物是异养型的。含氮的有机物如蛋白质既可作为氮源，也可作为碳源。“细菌喜荤，霉菌喜素”，细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制。霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁。 ?2?其他条件：在提供几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质及氧气的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素；培养霉菌时需要将培养基的pH调至中性偏酸；培养细菌时需要将pH调至中性或微碱性；培养厌氧型微生物时需要提供无氧的条件。 3.比较消毒和灭菌的不同之处

比较项目 理化因素的作用强度 较为温和 强烈 消灭微生物的数量 部分对人体有害的生活状态的微生物 全部微生物 芽孢和孢子能否被消灭 消毒 灭菌

不能 能 小贴士 ?1?每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人，可保持几年到几十年的生活力。 ?2?孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞，个体微小，通常是适应于从不利环境条件中存活下来，并在条件改变时产生新的营养体，能直接发育成新个体。 4.几种消毒和灭菌方法及其适用范围

类型 煮沸消毒法 消 毒 方 法 化学药剂 紫外线 灭菌 方法 灼烧 巴氏消毒法 适用范围 日常生活 不耐高温的液体 操作方法 100 ℃煮沸5～6 min 70～75 ℃煮30 min或80 ℃煮15 min 擦拭等，如用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源 紫外线照射30 min 直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧 生物活体、水源等 房间、仪器设备 接种工具、接种时用的试管口或瓶口等

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