内容发布更新时间 : 2024/5/12 9:56:36星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
①互补碱基之间的氢键；②碱基堆积力；③离子键；
8.一个未知肽的氨基酸组成为： Asp1, Ser1, Gly1, Ala1,Met1, Phe1和Lys2。对其进行一系列分析，结果如下：
①DNFB与之反应再酸水解得到DNP-Ala；
②经胰凝乳蛋白酶消化后从产物中分离出一个纯四肽，其组成为Asp1, Gly1, Lys1, Met1, 此四肽的DNFB反应降解产物为DNP-Gly；
③该八肽经胰蛋白酶消化后可得到组成分别为Lys1、Ala1、Ser1以及Phe1、Lys1和Gly1的两个三肽及一个二肽。此二肽经CNBr处理后游离出自由天冬氨酸。请推导该八肽序列。
答：根据结果①，该序列为：Ala-（Asp1, Ser1, Gly1, Met1, Phe1和Lys2）；
根据结果②，该序列为：Ala-（Ser,Lys）-Phe- Gly –(Asp, , Met,和Lys）； 根据结果③，该序列为：Ala-Ser-Lys-Phe- Gly –Lys-Met –Asp； 9. Southern印迹法的基本步骤是什么？
答：将DNA样品经限制性内切酶降解后，用琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段，将胶浸泡在NaOH中进行DNA变性，然后将变性DNA片段转移到硝酸纤维素膜上在80℃烤4-6小时。使DNA固定在膜上，再与标记的变性DNA探针进行杂交，杂交反应在较高盐浓度和适当温度（68℃）下进行10多小时，经洗涤除去未杂交的标记探针、将纤维素膜烘干后进行放射自显影即可鉴定待分析的DNA片段。
10.什么是凝胶过滤？试以葡聚糖凝胶过滤为例说明它是如何将大小不同的物质分离开的。
答：凝胶过滤又名分子筛层析或分子排阻层析，是指利用不同物质分子量的差异通过具有分子筛性质的凝胶对它们进行分离的方法。
常用的凝胶有多种，以葡聚糖凝胶为例。它是由葡萄糖和交联剂形成的具有三维空间的网状结构物，两者的比例和反应条件决定其交联度的大小，即孔径大小，用G表示。G越小，交联度越大，孔径越小。 当蛋白质的直径大于凝胶的孔径时，被排阻于胶粒之外；当蛋白质的直径小于凝胶的孔径时，则进入凝胶。在层析洗脱时，大分子受阻小而先流出，小分子受阻大而后流出，结果使得大小不同的物质分离。
11. 比较淀粉、糖原和纤维素在结构和组成方面的异同，并简述它们的理化性质 答：三者皆为由葡萄糖分子通过糖苷键连接而成的多糖生物大分子。
淀粉分直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉是葡萄糖分子通过α-1，4糖苷键相连而成的直链结构，支链淀粉中每两个直链间的连接键是α-1，6糖苷键。淀粉在冷水中不溶解，但是在加热的情况下可以吸收水分而膨胀成糊状。直链淀粉遇碘成蓝色，支链淀粉遇碘成紫红色。
糖原又称动物淀粉，与淀粉相同也是由α-D-葡萄糖构成的同聚多糖，结构上则与支链淀粉相似，也是带有α-1，6分支点的α-1，4葡萄糖多聚物，但分支比支链淀粉多。糖原遇碘成红色。
纤维素是由β-D-葡萄糖通过β-1，4糖苷键相连而成的同聚多糖。纤维素不溶于水，稀酸和稀碱。纤维素中每个葡萄糖残基含有三个自由羟基，因此能与酸形成酯。 12.什么是蛋白质的变性与沉淀？举例说明蛋白质变性与沉淀的关系。
答：蛋白质分子由于受到某些理化因素的影响，空间构象被破坏，失去了原有的生物活性的现象即蛋白质变性。蛋白质分子的溶解度下降导致其从溶液中析出的现象即蛋白质沉淀。使蛋白质沉淀的方法有盐析法，有机溶剂沉淀法等。如果采用某些较强烈的方法如加热，有机酸，重金属盐等使蛋白质沉淀的话，沉淀出的蛋白质会变性。但是用盐析等较温和的方法沉淀蛋白质时沉淀出的蛋白质不会变性。变性的蛋白质一般会沉淀，但是有些蛋白质的稀溶液用酸、碱或加热的方法变性后并不沉淀。例如，将牛奶煮沸，其中的酪蛋白变性了，但并没有沉淀出来。
13. lac操纵子的基本结构是怎样的？它是如何通过阻遏物和CAP调节基因表达的？
答：⑴ 乳糖操纵子结构如下图所示：结构基因部分由三个基因组成，它们是编码β-半乳糖苷酶的基因
Z，编码通透酶的基因Y，编码半乳糖苷乙酰化酶的基因a。
位于结构基因前面的是调控区，由启动子P和操纵区O组成。位于调控区前面的是阻遏物基因I。此外，启动子上游还有一段短序列是分解代谢基因活化蛋白CAP的结合区。
⑵ 结构基因表达调控的方式如下：
①无乳糖时，I基因表达产生的阻遏物可与操纵区结合，从而挡住RNA聚合酶前移的通路，结构基因无法转录；
②当乳糖存在时，乳糖作为诱导物可以与阻遏物结合，并使得阻遏物发生变构而不能与操纵区结合，因此结构基因转录，产生三种消耗乳糖的酶；
③当乳糖和葡萄糖都存在时，细菌通常会先利用葡萄糖然后再利用乳糖。在利用葡萄糖时乳糖操纵子表达较差。当葡萄糖消耗完时，乳糖操纵子的表达增强。这种作用是通过CAP实现的。
④当cAMP与CAP结合后，后者构象发生变化，对DNA的亲和力增强。乳糖操纵子中 CAP的结合位点紧接于启动基因上游区， cAMP-CAP复合物结合到 DNA上的 CAP位点后，则会促进 RNA聚合酶结合到该启动基因上，进行转录。葡萄糖能显着降低细菌细胞中 cAMP的含量，这样复合物 cAMP-CAP减少，影响乳糖操纵子转录的启动。当葡萄糖消耗完，cAMP含量上升时，乳糖操纵子的转录启动。所以CAP是一种正调节蛋白，其作用需要cAMP参与。
习题八
一、选择题
( B )1.下列关于?-螺旋结构的叙述中哪个是错误的？
[A]?为右手螺旋 [B]肽平面围绕多个轴旋转 [C]螺旋一周为个氨基酸残基 [D] 肽链内形成氢键 ( C )2.如果反密码子是UGA，它可识别下列哪个密码子？
[A] ACU [B] CUA [C] UCA [D] UAC
( B )3.血浆蛋白质pI大多在5～6之间，它们在血液中的主要存在形式是：??
A.带正电荷?? B. 带负电荷 ?C．兼性离子 ?D．非极性离子 E．疏水分子 ( C )4. 下列关于原核和真核生物DNA复制的描述中哪一项是不正确的?
A 以复制叉定点复制,通常为双向等速复制 B 复制方向为5'→3' C 前导链和随从链都是不连续复制 D 必有冈崎片断,必须切去引物 E 最后由DNA连接酶连接
( E )5. 关于酶的性质哪一种说法不对？ [A]高效催化性 [B]专一性 [C]反应条件温和 [D]可调节控制 [E]可使反应平衡向有利于产物方向移动 ( B )6.下列哪种试剂可使蛋白质的二硫键打开?
[A]溴化氰 [B]?-巯基乙醇 [C]碘乙酸 [D]2,4-二硝基氟苯
( C )7.氨基酸顺序测定仪是根据哪种方法建立的？
（A）2,4-二硝基氟苯法 (B)丹磺酰氯法 (C)苯异硫氰酸酯法 (D)酶水解法
( B )8. DNA复制需要①解链酶②引物酶③DNA聚合酶④拓扑异构酶⑤DNA连接酶。 其作用的顺序
A ①，②，④，③，⑤ B ④，①，②，③，⑤ C ①，④，③，②，⑤ D ①，④，②，③，⑤ E ④，③，②，⑤，①
( C )9.下列关于酶活性中心的描述哪个是正确的？
[A]酶分子上的几个必需基团 [B] 酶分子与底物的结合部位
[C]酶分子结合底物并发挥催化作用的三维结构区域 [D 酶分子催化底物转化的部位 ( C )中含有%的A时，其碱基C+G%总含量为多少？
[A] [B] [C] [D] ;
( E )作为蛋白质合成的模板，根本上是由于
A.含有核糖核苷酸；B.代谢快；C.含量少；D.由DNA转录而来；E.含有密码子 ( D )12.热变性的DNA具有下列哪种特征？
[A]核苷酸间的磷酸二酯键断裂 [B]形成三股螺旋
[C]260nm处的光吸收下降 [D] GC对的含量直接影响Tm值 ( C)13.下列关于氨基酸密码的叙述哪一项是正确的
A.由DNA链中相邻的三个核苷酸组成；B.由tRNA链中相邻的三个核苷酸组成；C.由mRNA链中相邻的三个核苷酸组成；D.由rRNA链中相邻的三个核苷酸组成；E.由多肽链中相邻的三个氨基酸组成 ( B )14.某一符合米氏方程的酶，当[S]=2Km时，其反应速度V等于： [A]Vmax [B]2/3Vmax [C]3/2 Vmax [D]2Vm
( D )15.下列那种因素不使酶活力发生变化？[A]增高温度[B]加抑制剂[C]改变pH [D]加 硫 酸 铵 ( D )16.生物体编码20种氨基酸的密码子个数 ；；；；
( E )17.真核生物在蛋白质生物合成中的启始tRNA是
A.亮氨酸TrnA；B.丙氨酸tRNA；C.赖氨酸tRNA；D.甲酰蛋氨酸tRNA E.蛋氨酸tRNA
( A )18.下列哪一项不是酶具有高催化效率的因素?
[A]有调控能力 [B]酸碱催化 [C]“张力”和“形变” [D]邻近定位效应
( A )19.反密码子中的哪个碱基在密码子阅读中摆动？
A.第一个；B.第二个；C.第一和第二个；D.第二和第三个；E.第三个 ( B )氨基酸氧化酶只能催化L-氨基酸的氧化，此种专一性属于：
[A]几何专一性 [B]立体异构专一性， [C结构专一性 [D]绝对专一性
( D )21.下列关于蛋白质四级结构的论述哪项是正确的。
[A]由多个相同的亚基组成 [B]由多个不同的亚基组成 [C]一定是由种类相同而不同数目的亚基组成 [D]亚基的种类和数目均可不同 ( A )22.下列关于蛋白质分子中肽键的叙述哪项是错误的？
(A) 能自由旋转(B)比通常的C-N单键短(C)通常有一个反式结构(D) 具有部分双键性质 ( B )23. 热变性的DNA在适当条件可以复性，条件之一是： [A] 骤然冷却 [B] 缓慢冷却 [C] 能缩 [D] 加入浓的盐 ( B )24.下列关于蛋白质分子三级结构的叙述哪项是错误的？
[A]天然蛋白质分子均有这种结构 [B]具有三级结构的多肽链都具有生物学活性[C]三级结构的稳定性主要由次级键维持 [D]亲水基团大多聚集在分子的表面
( B )25.原核生物蛋白质生物合成中肽链延长所需的能量来源于 ；；；； 二、判断题
( ?)1、胰岛素是一种能提高血糖的激素； (? )2、DNA是生物界中唯一的遗传物质；
(?)3、若DNA一条链的碱基顺序是pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱基顺序是pGpApCpCpTpG.； (?)4、天然氨基酸都有一个不对称的?-碳原子； (?)5、米氏常数是酶的特征性常数，与底物无关； (?)6、稀碱溶液可以水解DNA，但不可以水解RNA； (? )7、维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键；
(?)8、DNA 是遗传信息的载体，只存在于细胞核的染色质中；
(?)9、少量中性盐使得蛋白质溶解度升高，过量（如达到饱和程度）中性盐使得蛋白质溶解度下降； (?)10、在DNA 变性过程中，总是G—C 对丰富区先熔解开，形成小泡； (?)11、蛋白质分子的肽链数就是它的亚基数；
(?)12、糖类的主要生理功能之一是为生物提供能量；
(?)13、在底物浓度极低时，酶促反应初速度与底物浓度成正比； (?)14、糖酵解过程无需氧的参加；
(?)15、Sanger提出的核酸序列分析法是双脱氧链终止法。 三、填充题
1、 tRNA 上的 反密码 可以识别mRNA 上的密码。 2、 DNA和RNA中的碱基不同的是 T 和 U 。
3、脱氧核糖核酸DNA双链中若 G＋C% 含量高，则 Tm 值高。
4、转移核糖核酸tRNA的二级结构为 三叶草 形状，三级结构为 倒L 形状 5、脱氧核糖核酸（DNA）的基本结构单位是 脱氧核糖核苷酸 。
6、无论是DNA 还是RNA 都是由许许多多 核苷酸 组成，通过 磷酸二酯键 连接而成的。 7、两性离子是指 即带正电荷又带负电荷的离子 。
8、核酸研究中，地依酚法常用来测定 RNA ，二苯胺法常用来测定 DNA 。
9、 Watson-Crick提出的B-DNA双螺旋结构的螺距为_ nm，相邻两核苷酸之间的夹角是 36° 。 10、核糖核酸RNA主要分为 tRNA 、 mRNA 和 rRNA 三种类型。 四、问答题 1、新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖浓度高。可是掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了，因为50％糖已经转化为淀粉了。如果将新鲜玉米去掉外皮后浸入沸水几分钟，然后于冷水中冷却，储存在冰箱中可保持其甜味。这是什么道理？
答：采下的玉米在沸水中浸泡数分钟，可以使其中将糖转化成淀粉的酶基本失活，而后将玉米存放在冰箱中，可以使残存的酶处于一种低活性状态，从而保持了玉米的甜度。 2、为什么RNA易被碱水解，而DNA不容易被碱水解？? 答:因为RNA含有的2ˊ-OH起到分子内催化剂作用，水解能形成中间产物2ˊ,3ˊ-环状中间产物，而DNA为脱氧核糖核酸，2ˊ碳原子上连接的是两个氢原子，不含2ˊ-OH，因此无分子内催化剂的作用，磷酸二酯键不能被打断。
3、有一条脱氧核糖核酸链，结构如下：5?-ACCGTAACTTTAG-3? 请写出与该链互补的 DNA链和 RNA链的结构。如果该链为一条DNA编码链，写出由它转录产生的mRNA序列。 答：①与之互补的DNA链： 5?-CTAAAGTTACGGT-3?；
②与之互补的RNA链：5?-CUAAAGUUACGGU-3?； ③mRNA链：5?-ACCGUAACUUUAG-3?；
4、mRNA遗传密码排列顺序翻译成多肽链的氨基酸排列顺序，保证准确翻译的关键是什么？ 答：主要靠两点：⑴氨酰tRNA合成酶催化反应的专一性确保了什么氨基酸与什么tRNA结合形成氨酰tRNA，也就是说它们的结合是特异性的，而不是随机的；
⑵氨酰tRNA通过其上面的反密码子与mRNA上的密码子的特异性配对来进行结合，从而使得某种氨基酸与某种密码子一 一对应，这样也就确保了mRNA遗传密码排列顺序翻译成正确的多肽链的氨基酸排列顺序。
5、假如你从一种新的病毒中提取到它的核酸：⑴用两种不同方法确定它
是DNA还是RNA？⑵通过一种简易方法判断它是双链还是单链？ 答：⑴判断是DNA还是RNA：①颜色反应：DNA的二苯胺反应会形成蓝色化合物，RNA的苔黑酚反应会形成绿色化合物；②酸水解后进行单核苷酸分析（层析或电泳），含U无 T的为RNA，含T无U的为DNA；
⑵依据是否有增色效应可判断它是双链还是单链。双链核酸加热变性后有增色效应，单链核酸没有这种现象。
6、别构酶有何特性？