内容发布更新时间 : 2024/4/24 6:16:29星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

实验一 坐骨神经-腓肠肌标本的制备

实验原理：

蛙类的一些基本生命活动和生理功能与哺乳动物有相似之处，且其离体组织器官的生活条件较为简单，易于掌握，因此在生理学实验中常用蛙类的坐骨神经－腓肠肌标本来观察神经肌肉的兴奋性和肌肉收缩特点。

双毁髓成功的标志：彻底捣毁脊髓时，可看到动物的后肢突然蹬直，而后瘫软如棉，此时的动物为双毁髓动物。如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如，必须重新毁髓

任氏液是0.65%的生理盐水。

制备完整的坐骨神经-腓肠肌标本应包括：连有坐骨神经的脊椎、坐骨神经、腓肠肌、股骨头或胫腓骨头四部分。

直流电刺激可兴奋细胞时之所以使细胞产生兴奋，从根本上讲是电刺激改变了细胞原来膜内外之间的电位差。细胞的静息膜电位为外正内负，如果刺激使膜电位差值减小，即去极化，细胞则兴奋；如果使膜电位差值增大（超级化），细胞则兴奋性降低（抑制）。因此在细胞膜外使用直流电刺激细胞，通电时兴奋只发生在负极，正极的兴奋性下降，在持续通电期间不形成刺激；断电时产生反向电流，兴奋只发生在正极；通电的刺激强度大于断电。

实验步骤： 1、破坏脑和脊髓

将头部抬起，在离吻端约1.5cm 处的背部皮肤会形成V 形皱褶，V 形皱褶中心的皮肤下方为枕骨大孔。

2、剪去躯干上部及内脏，分离后肢。 3、剥皮。 4、分离两腿。 5、分离坐骨神经。

从肱二头肌和半膜肌中间分离坐骨神经，剪断细小神经。 6、分离腓肠肌。 7、分离股骨。

刮净股骨上的肌肉，在距膝关节约1cm处剪断股骨。 8、分离膝关节以下部分。 9、检查标本兴奋性。

用手术镊轻轻提起标本的脊椎片，使神经离开玻璃板。再用经任氏液蘸湿的锌铜弓，将其两级接触神经，如腓肠肌发生迅速收缩，则表示标本机能正常。

注意事项：

1、双毁髓时应注意使蟾蜍头部前俯，防止耳后腺分泌物射入实验者眼内，如被射入，应立即用清水冲洗眼睛。

2、尽量减少神经与金属器械及污染物接触。（？） 金属因为有电子的移动会刺激神经。 3、避免过度牵拉和压迫神经。

4、分离神经时一定要将周围组织剥离干净。

5、要常用任氏液浸润标本，防止干燥，勿用清水冲洗。 6、分离肌肉时要按层进行，不要乱剪。 思考题：

为何锌铜弓刺激神经会引起肌肉收缩？

锌铜弓在溶液中沾湿以后，锌的表面电离出正离子，里面形成负离子；而铜的表明电离出负离子，里面形成正离子。当锌铜弓接触活组织时，电流便沿着锌片→活组织→铜片的方向流动而产生刺激效应。所以锌相当于正极，而铜相当于负极发挥刺激作用。当断开时，则发生相反的效应。

实验二 刺激强度与收缩反应的关系；骨骼肌的单收缩与强直收缩

实验目的：

1、学习神经-肌肉实验的电刺激方法 2、观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系 3、记录单收缩与强直收缩

基本原理非常重要！！！

阈强度/阈值/阈刺激：引起肌肉收缩反应所需的最小刺激强度。 阈下刺激：刺激强度小于阈值的刺激，不引起肌肉发生收缩反应。 阈上刺激：刺激强度大于阈值的刺激。

最适刺激：引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度。

（名词解释！！！）

单收缩：肌肉组织对于一个阈上强度的刺激，发生一次迅速的收缩反应。一般经过潜伏期、收缩期和舒张期三个时期。

从刺激开始到收缩开始这一段无明显外部表现的时间,即为潜伏期。这是兴奋的产生、传导和传递以及兴奋-收缩耦联所耗费的时间。

由潜伏期末到肌肉开始收缩到收缩达到高峰，是肌肉长度缩短或张力增加的时间，曲线较陡，称为收缩期。

从收缩高峰开始，曲线较缓慢地下降至基线，是长度或张力恢复过程，称为舒张期。

受到连续单刺激时，肌肉能够发生强直收缩。 不完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的舒张期。

完全强直收缩：后一收缩发生在前一收缩的收缩期内，各收缩不能分开，肌肉维持稳定的收缩状态。

如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩；如果刺激间隔小于单收缩的过程而大于不应期，则出现两个收缩反应的重叠，即收缩的总和；但如果第二个刺激在第一个收缩反应的不应期内，则第二个刺激不产生收缩反应。

实验步骤：

1、坐骨神经－腓肠肌标本的制备；

2、将标本置于屏蔽盒内，坐骨神经放在刺激电极上，结扎肌腱的棉线与张力换能器相连，此连线不宜太紧或太松，并应与桌面垂直。

3、连接装置和计算机采集系统；

4、刺激观察。

①刺激强度对肌肉收缩幅度的影响

1）刺激方式用单刺激,刺激强度初始值设为0.01-0.05V，增量0.005V，然后采样； 2）将刺激强度逐步增大，记录阈刺激和最适刺激强度数值。 ②刺激频率对肌肉收缩形式的影响

1）选用单刺激，用刚能引起最大收缩的刺激强度采样，刺激间隔时间大于肌肉收缩时程，记录肌肉的单收缩张力曲线；

2）逐渐增加刺激频率，观察肌肉收缩形式的变化，记录出现不完全强直收缩和完全强直收缩时的刺激频率。

注意事项：

1．分离坐骨神经时，避免过度牵拉神经，绝对不允许用手或镊子夹神经。 2．股骨要牢固地固定在肌槽的小孔中。

3．坐骨神经要与刺激电极和记录电极紧密接触，但不要损伤神经。