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济南市中心医院 中心实验室 文件编号 06 全自动标记免疫发光 检测实验室 第 1 页 共 10 页 第 1 版 第 1次修改 颁布日期2003年08月31日 AxSYM 游离三碘甲腺原氨酸FT3检测方法和步骤 1． 目的：准确理解正确使用试剂盒，保证实验结果的准确性 2． 范围：AxSYM游离三碘甲腺原氨酸FT3检测试剂盒 3． 责任人：实验室工作人员

4． 内容：AxSYM游离三碘甲腺原氨酸FT3检测试剂盒专用 4．1 简介

3，5，3‘三碘甲腺原氨酸是一种分子量为651道尔顿的半衰期为1.5天的甲状腺激素。T3在血液中以游离的和与蛋白结合两种形式循环。T3与甲状腺素结合蛋白（TBG）、前白蛋白和白蛋白结合。T3在这些结合蛋白中的实际分布倍受争议，TBG占38%--80%，前白蛋白占9—27%，白蛋白占11—35%。

4．2生物学检测原理

AxSYM游离三碘甲腺原氨酸FT3是根据微粒子酶免发光技术（MElA）原理来测定的。

AxSYM游离三碘甲腺原氨酸FT3试剂和样本按下列顺序加入： 样本中心

· 测试所需的样本和所有AxSYM FT3试剂由样本中心的探针加到RV杯不同的小池里。

· 样本被吸入到RV杯的一个小池里。

· 抗-游离三碘甲腺原氨酸包被的微粒子、抗-游离三碘甲腺原氨酸碱性磷酸酶共轭物、样本稀释液和TRIS缓冲液加到RV杯的另一个小池里。

加样完毕RV被迅速被转入运行中心，而后的加样由运行中心的探针完成加样。 运行中心

· 样本稀释液、共轭物、微粒子和TRIS缓冲液混合物与样本混合。

· 游离三碘甲腺原氨酸II、酶标抗体和微粒子牢固结合形成抗体-抗原-抗体复合物。

· 反应混合物被转入纤维杯，微粒子牢固结合在玻璃纤维网上。 · 冲洗掉纤维杯上未结合的物质。

· 将底物，4-甲基伞型酮磷酸盐加入纤维杯，用微粒子酶免发光技术光学元件测量发荧光的产物的比率。 4．3试剂盒包装内容 100人份/盒 AxSYM FT3试剂盒

·1瓶（6.9ml）包被抗-游离三碘甲腺原氨酸II（鼠，单克隆）的微粒子TRIS缓冲液，含蛋白稳定剂。防腐剂：叠氮钠。（试剂瓶1）

·1瓶（4.3ml）抗-游离三碘甲腺原氨酸（兔）：包含碱性磷酸酶和蛋白稳定剂的TRIS缓冲液。最小浓度：0.1μg/ml。防腐剂：叠氮钠和杀菌剂。（试剂瓶2） ·1瓶（7.5ml）样本稀释液。含表面活性剂和蛋白稳定剂的TRIS缓冲液。防腐剂：叠氮钠。（试剂瓶3）

·1瓶（50.2ml）含有0.3M氯化钠的TRIS缓冲液。防腐剂：叠氮钠和杀菌剂。（试剂瓶4） 4．4 定标液

4．4．1 AxSYM FT3两点定标液

AxSYM FT3两点定标液2瓶(各4ml)。在含有蛋白稳定剂的磷酸盐缓冲液里加入游离三碘甲腺原氨酸II(人脾)而制备，其含量如下表： 瓶

1 2

防腐剂：叠氮钠。 4．4. 2 CEA六点定标液 AxSYM FT3六点定标液6瓶(各4ml)。在含有蛋白稳定剂的磷酸盐缓冲液里加入游离三碘甲腺原氨酸II(人脾)而制备，其含量如下表：

瓶

A B C D E

FT3含量（ng/ml）

0 10 50 250 500 FT3含量（ng/mL）

0 50

F

防腐剂：叠氮钠。 4．5质控液 FT3质控液

1000

FT3质控液3瓶（各8ml）在含有蛋白稳定剂的磷酸盐缓冲液里加入游离三碘甲腺原氨酸II(人脾)而制备，其含量范围如下表：

瓶 L M H

防腐剂:叠氮钠。 4．6其他试剂 ·1号溶液（MUP）

1号溶液4瓶（各230ml）：含有4-甲基伞型酮磷酸盐，1.2mM的AMP缓冲液 防腐剂：叠氮钠。 ·3号溶液（纤维杯冲洗剂）

3号溶液4瓶（各1000ml）：含有0.3M氯化钠的TRIS缓冲液。 防腐剂：叠氮钠和杀菌剂。 ·4号溶液（稀释液）

4号溶液（10L）1瓶：0.1M的磷酸盐缓冲液。防腐剂：叠氮钠和杀菌剂 AxSYM探针清洗液

AxSYM探针清洗液4瓶（各110ml）2瓶（各220ml）含2%的氢氧化四乙基铵（TEAH）。 5．警告和预防措施 5．1 安全注意事项 · 警告：

生成物含有来自人的细胞上的在用之前通过层析法净化了的抗原物质。没有测试方法能完全保证源自于人的产物不会传播传染病，所有来源于人的物质都必须考虑它有潜在的传染性。

· AxSYM探针清洗液含有2%的氢氧化四乙铵（TEAH），对眼睛有轻微的刺激作用。如果此溶液触到了眼睛里，应立即用清水冲洗（其他资料请参见AxSYM

FT3含量（ng/ml）

20

150 400

范围（ng/ml）

16----24 120--180 320--480