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高考模拟生物试题

_______________________________________(答出一条即可)。

(4)念珠菌病主要是由白假丝酵母菌引起的，该菌会通过人体的感染部位进入血液。糖尿病患者的感染部位尤其需要保持干燥和清洁，避免滋生白假丝酵母菌，其依据是_____________________________________。

【答案】 (1). 让酵母菌先进行有氧呼吸大量繁殖，然后进行酒精发酵 (2). 抑制细菌等杂菌的生长 (3). pH缓冲剂 (4). 酵母菌培养过程中积累了大量代谢产物，导致pH下降 (5). 灼烧 (6). 使聚集的菌体逐步减少，以便获得单个酵母菌形成的菌落 (7). 划线操作时接种环灼烧后未冷却；未从上一次划线末端开始划线 (8). 酵母菌适宜在潮湿且含糖较多的环境中生长 【解析】 【分析】

1、微生物接种常用的两种方法：

①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。

2、微生物培养的培养基根据功能可以分为选择培养基和鉴别培养基两种，该培养基按照功能来分属于选择培养基。培养基中的营养成分主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，培养基还需要满足微生物生长对特殊营养物质、酸碱度以及氧气的要求。

【详解】（1）制作果酒过程中，利用的菌种是酵母菌，属于兼性厌氧菌，在发酵过程中，发酵瓶先通气，让酵母菌进行有氧呼吸进行大量繁殖，然后密封，制造无氧的环境，让酵母菌进行无氧呼吸产生酒精。在工业发酵时，培养酵母菌的培养基中要添加丰富的（有机）碳源和（有机）氮源等物质和青霉素，其中青霉素的作用是抑制细菌和放线菌的生长，将酵母菌从微生物群体中分离出来。

（2）因为酵母菌营养物质的分解利用和代谢产物的形成、积累会导致培养基中pH下降，可能使酵母菌生长速度减慢和代谢产物的量减少，所以在培养基配制过程中要添加pH缓冲剂从而为酵母菌生长提供适宜的pH。

（3）采用平板划线法分离样液中的酵母菌时，接种环需通过灼烧灭菌法进行灭菌；平板划线操作的目的是为了通过多次划线延伸，使菌种数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。因此在划线操作中从第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做使聚集的菌体

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逐步减少，以便获得单个酵母菌形成的菌落。划线操作过程中，每次灼烧接种环后必须冷却后再进行划线，如果划线操作时接种环灼烧后未冷却或未从上一次划线末端开始划线，会导致有的线上长满了菌落，有的线上无菌落的现象。

（4）根据题意分析可知，酵母菌适宜在温暖潮湿且含糖较多的环境中生长，血糖浓度太高有利于酵母菌的生长。

【点睛】本题考查酵母菌的应用与培养的知识点，要求学生掌握酵母菌的代谢特点和果酒的制作过程，理解酵母菌的培养所需的营养条件和培养基的作用及种类，这是该题的重点。题目本身难度不大，识记平板划线法的操作和酵母菌的应用是解决问题的关键。

12.鸡干扰素是一种具有高效和广谱抗病毒作用细胞因子，广泛用于动物领域的抗病毒治疗。科研人员将鸡干扰素基因作为目的基因，构建基因表达载体，通过农杆菌介导法导入烟草，以获得抗病毒烟草。回答问题：

(1)目的基因合成后可在Taq酶的作用下通过PCR技术大量扩增，该技术的原理是

________________________。利用PCR技术扩增干扰素基因时，需要加入两种引物，原因是_____________________________________。

(2)基因表达载体中应有RNA聚合酶识别和结合的部位，该部位称为_________________。将基因表达载体导入农杆菌常用的方法是___________________________________。

(3)该实验中，将农杆菌转入烟草细胞的原生质体，原生质体再生出细胞壁。请从理论角度提出实验室检测原生质体是否再生出细胞壁的一种方法：________________________。

(4)科研人员提取烟草愈伤组织细胞的RNA后，先通过__________获得DNA，再进行PCR

扩增。若最终未能检测出干扰素基因，可能原因是____________________；若转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，可能原因是__________________。

【答案】 (1). DNA的热变性（或DNA双链复制） (2). DNA两条链反向平行，DNA

聚合酶只能从3′端延伸DNA链，用两种引物才能确保DNA两条链同时扩增 (3). 启动

2+

子 (4). 感受态细胞法（或Ca转化法） (5). 将细胞置于高渗溶液中，用显微镜观察

的细胞是否发生质壁分离（或将细胞置于清水中，用显微镜观察细胞是否胀破） (6). 逆转录 (7). 鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞（或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素 (8). 转基因烟草体内干扰素的合成量较低 基因未能转录）（或合成的干扰素生物活性低）【解析】 【分析】

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1、基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。 （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。 （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

2、PCR技术扩增目的基因：①原理：DNA双链复制；②过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。

【详解】（1）利用PCR技术扩增干扰素基因时，依据的原理是DNA双链复制的原理，设计引物序列的主要依据是干扰素基因两条链两端的部分核苷酸序列，由于DNA两条链反向平行，而DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA子链，用两种引物才能确保DNA两条链同时扩增。

（2）基因表达载体必需具备的成分有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，将基因表达载体导入农杆菌（微生物）时，

2+2+

常用Ca处理，使其处于感受态，因此将基因表达载体导入农杆菌的方法是Ca转化法。

（3）根据题意，该实验中将农杆菌转入烟草细胞的原生质体后，需再生细胞壁，实验室检测原生质体是否再生出细胞壁，可以将细胞置于高渗溶液中，观察是否发生质壁分离，如果发生质壁分离说明新的细胞壁已经形成。

（4）提取的愈伤组织细胞的RNA通过逆转录过程得到DNA；最终未能检测出干扰素基因，可能是因为鸡干扰素基因未能导入烟草愈伤组织细胞或导入烟草愈伤组织细胞的鸡干扰素基因未能转录。若转基因烟草植株对病毒的侵染表现出一定的抗性，但抗性较低，说明转基因烟草体内干扰素的合成量较低或者合成的干扰素生物活性低。

【点睛】本题考查基因工程的知识点，要求学生掌握基因工程中PCR扩增技术的原理和过程以及条件，尤其理解需要2种引物的原因；识记目的基因的获取方法和将目的基因导入微

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生物的方法，理解目的基因表达产物的检测或鉴定，这是该题的重点。掌握基因工程的操作步骤是解决该题重点的方法。

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