内容发布更新时间 : 2024/5/11 3:47:21星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

生物化学实验报告

姓 名：

学 号：

专业年级： 2015级护理本科

组 别： 第四实验室

生物化学与分子生物学实验教学中心

实验名称 肝糖原的提取、鉴定与定量 实验日期 2016-12-20 合作者 评分

一、实验目的

1、了解肝糖原提取、糖原和葡萄糖鉴定与蒽酮比色测定糖原含量的原理和注意事项，掌握其操作方法。

2、了解离心管和分光光度计使用的原理并掌握操作步骤。 3、熟悉吸量管、可调式微量移液器的操作步骤。

4、熟悉溶液的转移操作；熟练运用溶液混匀的各种方法（视具体情况，采用合适的混 匀方法）。 5、了解呈色反应。

实验地点 指导老师

第四实验室

教师签名

批改日期

二、实验原理

(一) 肝糖原的提取与鉴定 1.糖原的分离

采用研磨匀浆使细胞破碎，用低浓度的三氯醋酸使蛋白质变性，破坏肝组织中的酶从而使其沉淀，而糖原仍稳定保持在上清液中，从而使糖原与蛋白质等其他成分分离开来。糖原不溶于乙醇而溶于热水，故用95%乙醇溶液将糖原沉淀，再用热水溶解。

2.糖原的鉴定

(1)糖原螺旋链吸附碘分子：

糖原水溶液呈乳样光泽，其长链形成的螺旋中，依靠分子间引力吸附碘分子，呈现出红棕色。

(2)呈色反应——利用葡萄糖的还原性：

?CuSO4+2NaOH = NaSO4 + Cu(OH)2↓

?2Cu(OH)2 + C6H12O6 = 2CuOH + 氧化型葡萄糖+ H2O ?2CuOH = Cu2O↓(红色) + H2O ④Cu(OH)2 = C u O ↓（黑色）+ H2O （二）肝糖原定量测定

1.糠醛衍生物的生成及其性质

糖原的水解产物葡萄糖可以在浓硫酸的作用下生成糠醛衍生物-5-羟甲基呋喃甲醛，其可以和蒽酮生成蓝色的化合物，该物质在620nm处有最大吸收。 2.标准对照法进行定量

糖含量在10μg～100μg，溶液颜色的深浅与可溶性糖的含量成正比，利用此反应与同样处理的已知葡萄糖含量标准溶液比色，通过标准对照法即可计算出样品中糖原的含量。

三、材料与方法：

（一）肝糖原的提取与鉴定 1.实验材料：（1）样品：鸡肝

（2）试剂：5%三氯乙酸溶液、95％乙醇溶液、蒸馏水、浓盐酸、50%氢氧

化钠溶液、班氏试剂、碘试剂 （3）仪器和器材：剪刀、天平、镊子、圆纸片、研钵、试管、离心机、刻