内容发布更新时间 : 2024/5/9 3:49:44星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

TLC（硅胶板薄层色谱）被广泛的称为“化学家的眼睛”，当“眼睛”看不清楚的时候，才会借助放大镜或者近视镜（HPLC，GC等等）。熟练准确快速的使用TLC技术对提高化学工作的效率至关重要

新药研发合成部分，在平时工作中，很多时候是靠TLC进行快速检测，如果仅靠紫外灯这种手段，会忽略掉很多有用的信息，导致重复劳动，或者武断放弃一种合成思路。一下为常用显色原理，均为个人理解整理，进攻参考。

TLC展开剂的显色原理介绍与讨论

一、显色原理

硫酸乙醇溶液

喷洒10%硫酸乙醇溶液而显色，是利用硫酸的碳化效果。

一般用来薄层层析分离的都是有机化合物，展开，溶媒挥发干以后，有机物就留在板上。浓硫酸理论上可以对任何有机物碳化。喷洒10%硫酸乙醇溶液，待烘干之 后并继续加热，有机物就因为碳化而现实偏黑色。乙醇挥发很快，留下硫酸使得有机物脱水，看到的颜色可能是褐色、灰色、偏蓝色，所以我前面写了偏黑色，实际 可能要淡一点的，有些扩散的样子。任何有机物都用可以用10%硫酸乙醇溶液。 溴甲酚绿（pKa≤5.0，与pH区别）

方法一：溴甲酚绿指示液：取溴甲酚绿0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液2.8ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围 pH3.6～5.2（黄→蓝）

方法二：溴甲酚绿指示液(1 g／L) ：称取0．1 g溴甲酚绿，溶于乙醇(95％)，用乙醇(95％)稀释至100 mL。

The acid dissociation constant (pKa) of this reaction is 4.8

2,4-二硝基苯肼

碘

碘为广谱可逆显色试剂，尤其对具有不饱和键，共轭体系（芳烃），含有孤电子对的杂原子官能团（羟基、氨基、巯基等等）有明显效果。

原理解释（仅供参考）为碘吸附作用，放置一段时间解吸附消失。可以理解为碘的较高极化性，是的带形式正电荷的碘正离子生成，对具有孤电子对、可极化的π电子产生亲电性吸附作用。

茚三酮

对α-氨基酸的显色机理：

对氨基（伯胺和仲胺）的显色机理：

三氯化铁

络合物为紫色化合物

高锰酸钾：含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛。配制方法 ：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月 。

钼酸铈：广谱。配制方法：235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + 0.5 g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1：广谱。配制方法 ：135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + 1.5 mL of 冰醋酸 + 3.7 mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.

茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 ：萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine) 。配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)

磷钼酸(PMA)：广谱。配制方法：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇

香草醛(香兰素)：广谱。配制方法：15g 香草醛 + 250mL 乙醇 +2.5mL 浓硫酸

二、展开剂选择以及点板经验分享

TLC技术的掌握有需要具备的三个因素：基本化学理论，展开剂选择，显色剂选择。

点板的基本要求：

进程跟踪：斑点为小米粒大小，不同斑点区分度较好，基本无交叉，比移值建议范围： 0.2~0.8

纯度观察：斑点可根据实际情况重一些，以观察杂质是否存在

1、基本化学理论，是对待检测结构有一个初步的判断，比如化合物极性、是否存在共轭体