内容发布更新时间 : 2024/11/5 23:31:23星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

实验八 色谱-质谱联用实验

一、实验目的

1．了解质谱仪的构造及各主要部件的结构原理。

2．了解气质联用仪及液质联用仪的组成及应用，分析条件的设置，分析的一般过程及主要操作。

3．通过对EI 源的谱图解析，加深对有机化合物断裂机理的理解并初步掌握谱图解析方法。

4．通过采用不同电离方式对样品进行分析，初步掌握液相色谱－质谱联用的不同电离源的应用及谱图识别方法。

5．通过混合样品的液质联用分析，了解仪器联用技术的优势及在痕量分析中的应用。

二、实验原理

混合物样品经GC或LC分离成一个一个单一组分，并进入离子源（或样品直接进入离子源）。在离子源中样品分子被电离成离子，离子经过质量分析器之后即按m/z顺序排列成谱，经检测器检测后得到质谱。计算机采集并储存质谱，经过适当处理便可得到样品的总离子流色谱图和质谱图。经计算机检索后可得到化合物的定性结果，由总离子流色谱图可以进行各组分的定量分析。

三、仪器与试剂

仪器：HP5890 气相色谱－质谱联用仪，液相色谱－质谱联用仪 样品：有机混合物样品

单组分有机化合物（纯品）

四、实验内容与步骤

1．气相色谱-质谱联用分析

（1）质谱仪的调整

质谱仪开机到正常工作需要一系列的调整，否则，不能进行正常工作。这些调整工作包括：

① 抽真空 质谱仪需在真空下工作，要达到必要的真空度需要由机械真空泵和扩散泵（或分子涡轮泵）抽真空。如果采用扩散泵，从开机到正常工作需要2 h左右；若采用分子涡轮泵，则只需20 min左右。如果仪器上装有真空仪表，真空指示需＜10空下才能正常工作。

② 分析条件的设置 根据仪器操作说明和样品情况，设置GC条件（汽化温度、升温程序、载气流量等）和MS条件（质量范围、扫描速度、电子能量、扫描方式、倍增器电压等）。

上述操作完成之后，GC－MS即进入正常工作状态。 （2）样品测试步骤

－4

Pa或更高的真

① 样品制备

有机混合物样品：进行GC－MS分析的样品其沸程应该不大于300℃，样品中应避免大量水存在。对于不满足要求的样品需进行预处理，经常采用的样品处理方法有萃取、浓缩、衍生化等。用1μL微量注射器进样，进样量不大于0.1μL。

单组分有机化合物（纯品）：液体和固体的单组分有机化合物可采用直接进样法进样。具体操作为：首先用针沾取少量样品，置于毛细管中，然后通过进样杆把样品直接送入离子源。

② 采集数据：将数据系统与主机联机，进样信号被接受。

③ 采集数据结束之后，色谱降温，关闭质谱仪高压，然后进行数据处理。

④ 显示并打印总离子流色谱图，显示并打印每个组分的质谱图，对每个未知谱进行计算机检索。

2．液相色谱-质谱联用分析

（1）ESI电离方式测定样品

① 进样方式：直接进样，通过改变试验参数观察化合物谱图的变化。 ② 仪器实验条件：根据样品结构选择合适电离方式。 （2）APCI电离方式测定样品

① 进样方式：直接进样，通过改变试验参数观察化合物谱图的变化。 ② 仪器实验条件：根据样品结构选择合适电离方式。 （3）液质联用分析复杂基质中痕量物质的实验

五、思考题

1．质谱仪为什么要在真空下工作？

2．如果把电子能量由70 eV变成20 eV，质谱图可能会发生什么变化？ 3．如果检索结果可信度差，还可用什么办法进行辅助定性分析？

4．拿到一张质谱图如何识别化合物的分子离子峰？如何判断分子量？如果没有分子量，可用什么办法得到分子量？