血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/5/5 3:26:54星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

血清天门冬氨酸氨基转移酶IFCC推荐方法测定

1. 实验原理:国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法。

L-天门冬氨酸+ ?-酮戊二酸

AST

草酰乙酸+L-谷

氨酸

草酰乙酸+ NADH +H2. 标本:

+ MDH苹果酸脱氢酶

L-苹果酸+NAD+H2O

+

2.1 病人准备:12小时禁食。 2.2 类型:血清,肝素或EDTA血浆。

3. 标本存放:3天内的活性损失:2~8℃保存:<8%;15~25℃保存:<10%;标本稳定性:-20℃保存至少可稳定3个月。

4. 标本运输:常温条件下保存运输。

5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染的标本。 6. 实验材料

6.1 试剂:奥林巴斯AST测定试剂盒 试剂1:;试剂2: 6.1.1 试剂准备:试剂为即用式。

6.1.2 试剂稳定性与贮存

试剂保存于2~8℃,若无污染,可稳定至失效期。试剂不可冰冻。

6.1.3 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。

6.1.4 注意事项:试剂中含叠氮钠(0.95g/L)为防腐剂。不可入口!避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。

6.2 校准品:使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。

7. 仪器:奥林巴斯AU2700生化分析仪 8. 操作步骤

8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件

8.2 仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件 9. 检验结果的判断与分析

10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析,以2S为质控警告限,3S为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法:以TruCal U复合校准品AST校准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果。不使用校准品进行AST活力检测,可以直接使用ΔA/min均值乘以计算因子得到结果,但是这样所得结果的可靠性不如使用校准品。计算ALT活力的计算因子见下表:

ΔA/min×因子 = AST活力[U/L]

底物起始的反应(37℃) 样品起始的反应(37℃)

340 nm 2143 1745 334 nm 2184 1780