液泡系和线粒体的活体染色 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/5/2 19:49:51星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

实验三 液泡系和线粒体的活体染色

1实验目的与原理

1.1实验目的:观察植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布; 掌握一些细胞活体染色的原理和技术。

1.2实验原理:活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。它的目的是显示生活细胞内的某些结构,而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。

詹纳斯绿B是毒性较小的碱性染料,可专一性地对线粒体进行超活染色,这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态(即有色状态),呈蓝绿色;而线粒体周围的细胞质中,这些染料被还原为无色的色基(即无色状态)。中性红为弱碱性染料,对液泡系的染色有专一性,只将活细胞中的液泡系染成红色,细胞核与细胞质完全不着色,这可能是与液泡中某些蛋白质有关。 2 实验材料与方法

2.1实验材料:洋葱鳞茎内表皮

2.2洋葱鳞茎细胞液泡的活体染色:

撕取洋葱鳞茎内表皮→1/3000中性红溶液染色5~10min→吸去染液,滴加Ringer液→盖上载玻片,显微镜观察。

2.3洋葱鳞茎细胞线粒体的活体染色:

撕取洋葱鳞茎内表皮→1/5000詹纳斯绿B溶液染色10min→吸去染液,滴加Ringer液→盖上载玻片,显微镜观察。 3 实验结果

图1中性红染色洋葱内表皮细胞 图2詹纳斯绿染色洋葱内表皮 (X100) (X100)

在图1中性红染色的洋葱鳞茎内表皮细胞中可见表皮细胞中央液泡所占据被染至砖红色,细胞核被挤至旁边

图2是经詹纳斯绿B染色的洋葱鳞茎内表皮细胞,图中细胞被染成蓝色可以看见有许多蓝色颗粒状物体,这就是经染色的线粒体。