内容发布更新时间 : 2024/5/7 3:31:49星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

D．二者根本无法比较

6．对采血容器中预先加入柠檬酸钠的目的是………………………………………( ) A．调节PH B．维持红细胞的能量供应 C．防止微生物生长 D．防止血液凝固

7．凝胶色谱法分离蛋白质中使用的凝胶是交联葡聚糖凝胶(SephadexG-75),其中G、75的含义分别是…………………………………………………………………………………( ) A．G表示凝胶的使用量，75表示加75克水 B．G表示凝胶的交联程度，75表示需加热75℃

C．G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围，75表示每克凝胶膨胀时吸水7.5克 D．G表示凝胶的膨胀体积，75表示每克凝胶膨胀后体积可达75cm3

8．取1ml血红蛋白溶液装入透析袋中进行透析，相关说法不正确的是…………( ) A．透析液为300ml 20mmol/L的磷酸缓冲液

B．透析时间至少为1－2h，时间过长血红蛋白也会渗漏出去 C．除去了相对分子质量较小的杂质，实现了样品的粗分离 D．透析也可用于更换样品的缓冲液

9．已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、电荷的性质和数量情况如右图所示，下列有关蛋白质分离的叙述正确的是………………………………( ) A．将样品装入透析袋中透析12h，若分子乙保留在袋内，则分子丙也保留在袋内

B．若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快 C．若将样品以2000r/min的速度离心10min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中

0

D．若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远

10．(多选)有关透析的叙述，正确的是…………………………………………………( ) A．用于透析的薄膜要具有选择透过性 B．透析膜一般是用硝酸纤维素制成的

C．透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内D．透析可用于更换样品的缓冲液 二、非选择题：

11．下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(左图)和洗脱(右图)示意图，请据图回答下列问题。

6

(1)一同学利用琼脂糖凝胶电泳技术将得到的蛋白质进行分离，在电泳过程中，影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的 、 以及分子的形状等。而另一位同学则利用凝胶过滤法分离蛋白质（右图），他在操作中加样的正确顺序是 。待蛋白质接近色柱底端时，用试管连续收集流出液。先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是 。 (2)用吸管加样时，应注意正确操作，分别是① ；② ；③ 。 (3)等样品 时，才加入缓冲液。

12．右图表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置，请回答下列问题： (1)血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主 要组成成分，其在红细胞中的作用体现了蛋 白质具有___________功能。

(2)甲装置中，B是血红蛋白溶液，则A是__ ；乙装置中，C溶液的作用是 。 (3)甲装置用于_________，目的是 ，用乙装置分离蛋白质的方

法叫 ，是根据 分离蛋白质的有效方法。

(4)用乙装置分离血红蛋白时，待 时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。 A

1．(1)样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定

(2)①防止血液凝固 ②血红蛋白的释放 ③去除血浆蛋白 离心后的上清液没有黄色 ④低速500r/min；短时间如2min；⑤离心速度过高和时间过长会使白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，影响后续血红蛋白的提取纯度

(3)①去除相对分子质量较小的杂质 ②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内 (4)①通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去②血红蛋白呈现红色 在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。 DDCDADCBA ;BCD 1．（4）带电性质 分子大小 ④①②③ 先收集到的蛋白质分子量大，后收集到的分子

量小（2分）

3． (1)不要触及破坏凝胶面 贴着管壁加样 使吸管管口沿管壁环绕移动

7

(2)完全进入凝胶层 33．（8分）选做题：

A.（1）运输（2）磷酸缓冲液 洗脱血红蛋白 （3）透析（粗分离） 去除样品中分子量较小的杂质 凝胶色谱法 相对分子质量的大小 （4）红色的蛋白质接近色谱柱底端

(呈现出红色、这一特点对你进行蛋白质的分离有什么意义？课后练习)

（本身有颜色，通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液。从而使血红蛋白的分离过程非常直观，大大简化了实验操作。待红色的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集）

2．红细胞含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，血红蛋白提取和分离的程序可分为四步：样品处理、粗分离 纯化 纯度鉴定。请回答下列有关问题：

①样品处理，它包括 、 、收集血红蛋白溶液。

②收集的血红蛋白溶液在透析袋中经过透析，这就是样品的粗分离。透析的目的是 透析的原理是 。 ③通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是 。

2．(1)a a相对分子质量大，无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快

(2)尼龙网和尼龙纱 (3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果

8

(4)凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围 凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水10g (5)相同 保持恒定 DD

2．① 红细胞的洗涤 血红蛋白的释放

②去除相对分子质量较小的杂质 透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在透析袋内

③通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去 (3)红色的蛋白质 5

3．在对固氮基因产物的生产研究中，需要从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质。下图表示蛋白质提取和分离实验涉及的相关原理。

①图甲表示相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶色谱法分离的过程。试管中收集到的液体最先出现的是相对分子质量较大的蛋白质，原因是

。 ②图乙所示实验模拟电泳现象，U型管左侧的颜色逐渐变深，原因是 。

9

Fe(OH)3胶体粒子带正电荷，在电场作用下向阴极移动。

10