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专题十六 生物技术实践
全国卷5年考情导向 考 点 考 题 2016·乙卷T39：培养基营养物质的确定、选择菌落数的误差分析 2016·丙卷T39：乳酸菌的分离纯化 2015·卷ⅠT39：微生物计数方法的选择 1.微生物的分离和培养 2014·卷ⅡT39：纤维素酶的作用、纤维素分解菌的筛选原理和方法等 2014·卷ⅠT39：水样中细菌含量检测方法及分离方法的应用 2013·卷ⅡT39：致病菌单菌落的选择培养及该致病菌对于抗生素的敏感性的检测方法 2016·丙卷T39：分离纯化乳酸菌培养基中加入碳酸钙的2.培养基对微生物的选择利用 作用 2015·卷ⅠT39：筛选微生物的方法 2014·卷ⅠT39：纤维素分解菌的鉴别 3.运用发酵加工食品的基本方法及利用微生物进行发酵来生产特定的产物 4.从生物材料中提取某些特定的成分 2016·甲卷T39：苹果醋的发酵原理、菌种等 2013·卷ⅠT39：泡菜制作的发酵原理、制作流程等 2015·卷ⅠT39：胡萝卜素的种类、性质及提取方法 考 情 1.近五年的考题中，对微生物的分离和培养的考查尤为突出，侧重考查微生物的分离纯化技术，对传统发酵技术的发酵原理、制作流程等的考查频度也在不断提高。对植物组织培养、胡萝卜素的提取仅有2012年、2015年卷Ⅰ进行了考查，前者侧重考查营养条件及有关植物激素的作用等；后者侧重考查胡萝卜素的萃取剂的选择等。 2．常借助某一特定的微生物的分离和培养考查微生物的营养、接种方法等；对于生物技术在食品加工中的应用，常借助发酵实例考查，填充内容多为教材中一些结论性语句等。植物组织培养技术、植物有效成分的提取的考查也多以教材基础知识为主。 3．备考时，从以下5个方面来把握： (1)掌握大肠杆菌的纯化原理、主要方法及菌种的保存方法。 (2)认真分析教材中两个微生物分离与计数的实例，并掌握微生物的筛选及技术方法。 (3)利用比较法归纳总结并掌握常见传统发酵技术的原理、流程及影响因素等。 (4)列表比较玫瑰精油、橘皮精油及胡萝卜素的提取方法、原理、实验步骤等异同。
考点串讲1| 微生物的利用和传统发酵技术
1．(2016·全国乙卷)空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究
小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：
①配制培养基(成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)； ②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37 ℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。 回答下列问题：
(1)该培养基中微生物所需的氮来源于________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________。
(2)步骤③中，实验组的操作是________。
(3)若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。若将30(即36—6)个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法________(填“正确”或“不正确”)。
【解析】 (1)牛肉膏和蛋白胨中均含有氮元素，因此微生物所需的氮来源于牛肉膏和蛋白胨。若要完成步骤②，需要进行倒平板操作，用到的是固体培养基，所以培养基中要有琼脂。(2)该实验的空白对照组为不进行处理的无菌平板，实验组的操作为将各无菌平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露相同时间。(3)若空白对照组的平板上出现了菌落，说明实验过程中出现了污染现象。空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，导致实验变量不唯一，不能确定实验组平板上的菌落是否仅由教室内不同高度空气中的微生物形成，因此不能求出实验组的菌落平均数。
【答案】 (1)牛肉膏、蛋白胨 琼脂 (2)将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间
(3)污染 不正确
2．(2016·全国丙卷)某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。回答下列问题：
【导学号：15482079】
(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是__________________________________________________
_____________________________________________________________________ ___________________________________________________________。
(2)推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有________和________。分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。
(3)乳酸菌在－20 ℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________(填“蒸馏