内容发布更新时间 : 2024/12/31 6:21:29星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

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三维结构测定： （1）X射线衍射法

原理：X射线通过晶体发生衍射，得到衍射图案；对其进行数学计算，可得到电子密度图；可推测出蛋白质的三维构象。 对象：蛋白质晶体 （2）核磁共振（NMR）法

原理：蛋白质中的原子核由于自旋形成了自己的小磁场，受电磁辐射照射会发生能量吸收，原子核从低能态翻转到高能态，称此核与外加磁场发生共振，由此得名。 对象：蛋白质溶液

3、蛋白质的分子设计及其类型 答：蛋白质分子设计

（1）概念：为实现蛋白质工程而对蛋白质实施改造的方案，按照改造部位的多寡分为小改、中改和大改三类。

（2）类型

1）小改：通过定点突变或者化学修饰实现对蛋白质分子中的少数氨基酸残基的改造。是分子设计中最主要的方法。

2）中改：对不同蛋白来源的结构域进行拼接组装。 3）大改：完全从头设计全新的蛋白质分子。 4、简述蛋白质工程通常包括哪些主要步骤。 答：蛋白质工程的主要步骤通常包括： （1）从生物体中分离纯化目的蛋白； （2）测定其氨基酸序列；

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（3）借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段，尽可能地了解蛋白质的二维重组和三维晶体结构;

（4）设计各种处理条件，了解蛋白质的结构变化，包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响；

（5）设计编码该蛋白的基因改造方案，如点突变； （6）分离、纯化新蛋白，功能检测后投入实际使用。

第八章 蛋白质工程 一、名词解释 1. 蛋白质工程：

2. 定点突变（概念、技术和类型）：

二、简答题

1. 蛋白质分离纯化的一般程序

蛋白质的抽提；粗分级（沉淀、透析、超滤、冷冻干燥）；细分级（凝胶过滤层析、离子交换层析、PAGE、SDS-PAGE等）；鉴定：含量测定、分子量及等电点测定、纯度分析、性质鉴定。

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2. 简述蛋白质空间结构分析一般方法

一级结构：二硫键打开，末端氨基酸测定；大肽断成小肽，小肽分离及测序，序列组合

二级结构：圆二色谱（说说原理） 三维构象：X衍射、核磁共振

3. 蛋白质分子设计及其类型和分子设计及方法（小改、中改和大改）

4. 简述蛋白质工程通常包括哪些主要步骤和蛋白质工程实施的五大要素

三、重难点

1．蛋白质结构预测及方法

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