内容发布更新时间 : 2024/11/9 9:38:00星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

实验 紫外等吸收双波长光度法测定阿司匹林的含量

一、实验目的

1、掌握等吸收双波长法测定组分含量的方法。

2、了解UV2300双光束紫外可见分光光度计及UV Analyst的使用方法 二、实验原理

光度法测定多组分混合物时，可以通过联立方程式，求出各组分的含量。但是对于吸收光谱相对重叠的两份混合物，若只想测定其中某一组分的含量，可利用等吸收光度法达到测量目的。

当测定二元组分a和b混合物中a时，若干扰组分b在某两个波长λ

1和λ2

处具有相同的吸光度，且被测组分a在这两个波长处的吸光度差别显著，则可采用“等吸收双波长法”消去干扰组分b的吸收，直接测定混合物在此两波长处的吸光度差值△A，即可达到测定组分a的目的。

计算公式如下：

A?1?Aa1?Ab1A?2?Aa2?Ab2

?A?A?1?A?2?Aa1?Ab1?（Aa2?Ab2）因为b在某两个波长λ

1和λ2处具有相同的吸光度，即Ab1?Ab2

所以?A?Aa1?Aa2?（??1???2）bca

上式表明，试样溶液在两个波长λ双波长的选择要符合下列条件：

与溶液中待测物质1和λ2处吸光度之差，

a的浓度呈正比关系，这是双波长法测定的依据。

（1）干扰成分在这两个波长要具有相同的吸光度，且随浓度的变化小； （2）待测组分在波长λ三、仪器与试剂

1、UV2300双光束紫外可见分光光度计 2、石英比色皿一套

3、容量瓶（25ml、50ml），吸量管5ml 4、标准品：阿司匹林，水杨酸 溶剂：无水乙醇 样品：自合成产品 5、标准储备液：

标准阿司匹林储备液1mg/ml：精密称取标准阿司匹林约0.0500g，用无水乙

1和λ2处的吸光度差△A

应足够大。

1和λ2的实例。

下面是水杨酸存在下测定阿司匹林，利用作图法选择波长λ

醇溶解，于50ml容量瓶中定容、摇匀。

标准水杨酸储备液0.2mg/ml：精密称取标准水杨酸约0.0100g，用无水乙醇溶解，于50ml容量瓶中定容、摇匀。 四、实验步骤

1、吸收曲线的绘制和双波长的选择

分别于25ml容量瓶中配制阿司匹林（吸取1ml储备液）40ug/ml和水杨酸（吸取储备液1.25ml）10ug/ml的乙醇溶液。在uv2300分光光度计上240~330nm范围内扫描吸收光谱，然后以作图法选择双波长λ2. 工作曲线的绘制和试样的测定

于5个25ml容量瓶中，分别加阿司匹林标准储备液1.00、1.50、2.00、2.50、3.00ml，并加入2.5ml水杨酸标准储备液，用无水乙醇稀释至刻度。在uv2300分光光度计上，利用双波长测量在λ五、注意事项

1、阿司匹林易水解，试剂现用现配。 2、注意安全使用石英比色皿。 3、实验前应熟悉仪器的使用方法。 4、为了选择有利于测量的λ用作图法确定λ轴的平行线。 六、思考题

1、如何用作图法选择λ

1和λ2？

1

1

1和λ2。

以△A1和λ2波长处测定吸光度，

和c作图。

样品以相同的工作条件测定吸光度，从工作曲线中求出阿司匹林的含量。

和λ2，应先分别绘制它们单一组分的吸收曲线，

和λ2。在待测组分a吸收峰处选择测定波长λ1，作一条垂直

于X轴的直线，在干扰组分b的吸收光谱曲线上可得到一个交点。由此交点作X

2、本实验与普通的分光光度法有何异同？

3、如需同时测定两组份的含量，应如何设计实验？测量波长应如何选择？