7500荧光定量PCR仪使用说明 - 图文 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/3/29 22:45:36星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

7500荧光定量PCR仪使用说明

! 注意事项:

实验过程必须戴干净的一次性乳胶手套进行操作。 ?

? PCR反应所用的96孔板、8联管或单管必须为ABI7500专用,凸盖PCR管禁止使用。 ? 使用8联管两侧需用空管支撑,使用单管四角需用空管支撑,以防止板槽受力不均。 ? 实验数据用光盘刻录,禁止U盘拷取,数据可暂存于本机电脑硬盘中,各实验室D盘中有

指定文件夹,中心外部人员数据存于FUWU文件夹下的子文件夹中。

操作步骤

?

开机

依次打开电脑显示屏、主机,输入开机密码“7500”。 待电脑启动稳定后,按压7500仪器电源按扭,等待仪器启动(约30 s)。 当仪器只显示Power状态指示灯时,方可按压托盘以打开它。

? 放入反应板

按压此处

注:关闭仪器托盘时,应按一个角度推压托盘的右侧。

(以下过程按字母顺序a→q进行操作)

? 创建反应板文件

双击电脑桌面上SDS软件图标 打开SDS软件;

在对话框中选择Create New Document … ,或选择菜单栏File > New; a. 从 Assay下拉列表中选择反应板类型 反应板文件类型有以下几种: 1. Relative Quantification (ddCt) Plate(相对定量) 2. Absolute Quantification (Standard Curve)(绝对定量,标准曲线) 3. Allelic Discrimination(等位基因鉴别) 4. Plus/Minus(阳性/ 阴性实验) b. 为反应板文件命名 c. 单击Next

d. 选择要添加到反应板文件的探针(引物),单击Add添加选中探针 e. 如果在列表中未列出所需探针,请单击New Detector创建新探针 f. 单击Next ? 为每个反应孔指定探针和任务 j h g. 选取探针相同的反应孔 i g k h. 点击反应孔对应的探针。 i. 单击 Task栏的下边指定探针任务。 j. 选择 Use (使用)。 k. 单击 Finish (完成)。 ? 为反应孔设置样品名 l. 选取反应孔,直接输入相应样品名(也可右键,调出反Well Inspector对话框,在Sample Name中进行修改)

? 设定PCR循环参数、运行程序

p m. 选择 Instrument选项卡,默认条件下显示标m q 准PCR条件,可跟据实验具体情况修改; n. 单击Add Dissociation Stage添加溶解曲线循环; n o. 修改PCR反应体积; p. 将反应板文件保存至指定路径。 q. 点击Start运行程序 o

? 结束实验

1. 实验结束后关闭软件。(确认反应板文件数据已保存) 2. 打开拖盘,将反应板取出,关闭拖盘。 3. 按下7500仪器电源开关关闭机器。 4. 关闭电脑及显示屏。 5. 登记仪器使用情况。 6.

请严格按照仪器使用说明进行操作,如有不明之处或遇其他情况请及时联系仪器负责 人.

谢谢配合!!