【2020】高中生物第一部分微生物的利用第2课时分离以尿素为氮源的微生物同步备课教学案浙科版选修1 下载本文

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教学资料范本 【2020】高中生物第一部分微生物的利用第2课时分离以尿素为氮源的微生物同步备课教学案浙科版选修1 编 辑:__________________ 时 间:__________________ 本资料系本人收集整编,在百度文库平台与各位同仁分享,欢迎下载收藏,如有侵权,望告知删除!1 / 21 考试要求 知识内容 考试属性及要求 考情解读 1.进行微生物分离。使用含有尿素的培养基,采用涂布分离法,分离有脲酶的细菌。 分离以尿素为 氮源的微生物 2.使用酚红指示剂检测以尿素为氮源的加试 细菌的存在。 3.说明分离以尿素为氮源的细菌的实验原理。 4.举例说明本实验分离出来的细菌不一定都是以尿素为氮源的细菌。 一、实验目的、原理、设备、用品及材料准备 1.实验目的(1)使用专一的培养基(含有尿素)分离专一的细菌(有脲酶的细菌)。 (2)利用指示剂颜色的变化检知酶(脲酶)所催化的反应。 2.实验原理(1)脲或称尿素,是蛋白质降解的产物。有一些细菌含有脲酶可以分 解尿素,利用尿素作为其生长的氮源。 (2)(NH2)2C=O+H2O2NH3+CO2 3.设备及用品灭菌锅或高压锅、250 mL的三角瓶1个和100 mL的三角瓶2个、封口膜和橡皮圈、培养皿4个、接种环和玻璃刮刀、恒温培养箱、摇本资料系本人收集整编,在百度文库平台与各位同仁分享,欢迎下载收藏,如有侵权,望告知删除!2 / 21 床、酒精灯和超净台、一次性塑料手套、装有酒精棉球的广口瓶、镊 子、有盖的试管(15 mm×150 mm)5支和试管架、移液器。 4.实验材料 (1)在100 mL烧杯中装入50 mL 70%酒精,将玻璃刮刀浸泡在其中。(2)在100 mL三角瓶中配制好25 mL全营养LB固体培养基(0.25 g蛋白胨,0.12 g酵母提取物,0.25 g NaCl和0.5 g琼脂糖,水25 mL),加上封口膜后灭菌待用。(3)在100 mL三角瓶中配制好25 mL尿素固体培养基(0.025 g葡萄糖,0.12 g NaCl,0.12 g K2HPO4,0.25 mg酚红和0.5 g琼脂糖,水15 mL),加上封口膜后灭菌,待冷却至60 ℃时,加入通过G6玻璃漏斗过滤(使之无菌)的10 mL尿素溶液(内含2 g脲),摇动,混合均匀 后待用。(4)将盛有4.5 mL蒸馏水的5支有塞试管灭菌后待用。(5)在250 mL三角瓶中装入99 mL蒸馏水,用封口膜盖上,灭菌后待 用。(6)土样1 g(从有哺乳动物排泄物的地方取得)。1.为什么要用琼脂糖代替琼脂配制固体培养基?答案 琼脂是未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物。如果用琼脂固化培养基,会为细菌提供一定量的非尿素类氮源,这样会在尿素固体培养基上产生大量非以尿素为氮源的细菌,不利于以尿素为氮 源的细菌的筛选,故而用经纯化的琼脂糖而不用琼脂做固化剂。2.分离以尿素为氮源的微生物实验所用培养基为尿素固体培养基。在该培养基配方中,为微生物的生长提供碳源的是葡萄糖,提供氮源的 是尿素,琼脂糖的作用是凝固剂。本资料系本人收集整编,在百度文库平台与各位同仁分享,欢迎下载收藏,如有侵权,望告知删除!3 / 21