内容发布更新时间 : 2024/9/20 5:03:39星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

无菌操作技术实践 年级： 高二 学科： 生物 审核： 课时及内容：无菌操作技术实践 课型： 复习课 使用时间： 【知识目标】1、掌握培养基的种类、营养要素及配制要求。 2、理解灭菌、消毒的区别 。 3、掌握分离、纯化某种微生物的方法。 【能力目标】提高学生合作、探究、交流及语言表达能力。 【情感态度价值观目标】认同无菌操作的重要性。 【知识点一】 掌握微生物培养的基础——培养基 1、培养基的营养要素 营养物质 定义 作用 构成生物体的细胞物质和一些代谢产物，有些是异养生物的能源物质 主要来源 无机化合物（无机碳 凡能提供所需碳元素的物质 源）： 、NaHCO3； 有机化合物：糖类（ ）、脂肪酸、花生粉饼、石油等 无机化合物：N2、NH3、 凡能提供所需氮元素的物质 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物 铵盐、硝酸盐； 有机化合物： 等 水、无机物 2、培养基的种类 划分标准 培养基种类 液体培养基 物理 培养基 性质 培养基 培养基 功能 加凝固剂，如 含有野生型微生物所需的所有营养物质 特点 不加凝固剂 用途 工业生产 观察微生物的运动、分类、鉴定 微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 用于野生型微生物培养 选择微生物 用于微生物鉴定 培养基 缺乏相应的营养成分 鉴别培养基 加入显色剂的培养基 注意：（1）选择培养基——特定条件或特定碳源、氮源只有该种或该类微生物能存活或利用。如用纤维素粉作为碳源时筛选分离出分解纤维素的微生物；根据是否含 筛选自养、异养微生物；无任何 的培养基筛选固氮微生物；加抗生素的培养基筛选真菌；高盐、强酸、无氧等特定条件筛选耐盐、耐酸、厌氧的微生物。 （2）培养基配制原则：①、目的明确（依据 选择合适的营养物质） ②、营养协调（营养物质浓度及配比合适）

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③、PH适宜 1、下列叙述正确的是 ( ) A．培养基是为微生物的生长、繁殖或积累代谢产物提供营养的基质 B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌 2、分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是 ①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐 A．①③⑤⑦ C．①③⑤⑧ B．②④⑥⑧ D．①④⑥⑦ 结果 仅杀死物体表面或内部部分对人体有害的微生杀死物体内外所有的微常用的方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法和化 、 、 ( ) 【知识点二】 生物技术手段——无菌操作 条件 较为温和的物理或化学方法 强烈的理化因素 物(不包括芽孢和孢子) 学药剂消毒法 生物，包括芽孢和孢子 3、培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是 ( ) ①化学消毒 ②灼烧灭菌 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 ⑥巴氏消毒法 A．⑤③②①④⑥ C．⑥②③④①⑤ 【知识点三】 接种技术 分离纯化某种微生物的接种技术------- 、 （1）平板划线法：平板划线法中细菌的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的移动划线过程中。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图) B．①②③④⑤⑥ D．③④②①⑥⑤ 注意：a．划线时最后一区域不要与第一区域相连。 b.划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 （2）稀释涂布平板法 注意：接种时每个浓度至少设置 个重复，统计菌落时，选菌落数为 的

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一组为代表进行统计。 4、通过实验测定土壤中细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是 ( ) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B．取10、10的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上 C．将培养皿倒置，37 ℃恒温培养24～48小时 D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数 5、(2011·新课标全国卷，39)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： (1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于__________培养基。 (2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________________和________________。 (3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力__________。 (4)通常情况下 ，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。 【巩固练习】 1、细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 A．接种环、手、培养基 C．培养基、手、接种环 ( ) B．高压锅、手、接种环 D．接种环、手、高压锅 6－4－52、用稀释涂布平板法测定同一土壤样品的细菌数，在对应稀释倍数为10的培养基中，得到以下几种统计结果，正确的是 ( ) A．涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B．涂布了两个平板，统计的菌落数分别是215和260，取平均值238 C．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212、256，取平均值163 D．涂布了三个平板，统计的菌落数分别是210、240和250，取平均值233 3、(2011·重庆卷，2)下列有关细菌培养的叙述，正确的是 ( ) A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长 D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动 4、某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答问题： 3