内容发布更新时间 : 2024/12/24 0:34:44星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
胞外淀粉酶产生菌的分离
1材料与仪器 1.1 材料 1.1.1土样
采自………
1.1.2 培养基
淀粉培养基:蛋白胨,10g;NaCL,5g;牛肉膏,5g;可溶性淀粉,2g;蒸馏水,1000mL;琼脂,15~20g。
1.1.3 试剂
淀粉水解试验用碘液(卢戈氏碘液):碘片,1g;碘化钾,2g;蒸馏水,300mL。
1.2 仪器
JT201N电子天平,上海精天电子仪器有限公司; HD650型桌上洁净工作台,苏州净化设备有限公司;
TP-S2027D智能蒸汽灭菌器,长春市百奥生物仪器有限责任公司; 可调式移液器 ,上海雷勃分析仪器有限公司;
KDM-500ML可调控温电热套,山东鄄城新天地实验仪器设备厂; DRH-100电热恒温箱,广东省环境保护仪器设备厂; C21A01-13苏泊尔电磁炉,浙江苏泊尔股份有限公司。
2试验方法 2.1 制备土壤稀释液
取5g土壤样品溶于盛有45mL无菌水中充分混匀后,取1mL土壤悬液加入盛有9mL无菌水的试管中混匀,此为10-2稀释液,依此类推,制成10-3~10-6不同稀释度的土壤溶液。
2.2 菌株分离
分别取10-2~10-6浓度的稀释液各100uL涂布于淀粉培养基中,倒置于37℃恒
温培养箱中培养24~48h。待长出单菌落后,往平板表面喷加卢戈氏碘液,菌落周围出现透明圈的即为胞外淀粉酶产生菌。
2.3 菌株纯化
将有透明圈的单菌落分别划线接种于淀粉培养基中进行进一步纯化,直至获得纯培养。
3 实验结果 3.1 平板分离结果
采集土样稀释涂布于淀粉培养基,37℃恒温培养24h,在……稀释度平板上形成大量单菌落,根据菌落特征初步判断获得……种细菌,分别编号,结果见表1。
表1 平板分离结果
菌株 1号 2号 3号 4号 ……..
菌落特征
3.2 产酶菌株的鉴别
往……稀释度平板表面喷加稀碘液,……..号菌落周围呈现透明水解圈,表明
这….个菌株均为胞外淀粉酶产生菌株。分别挑取后进行平板划线,直至获得纯培养。
4 结论与讨论
说明通过什么方法获得几株产酶菌株。实验中的不足及经验。