内容发布更新时间 : 2024/11/18 13:49:47星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

实验二十 水果中维生素c的测定

一、目的与要求：

1、掌握2．6-二氯酚靛酚测定维生毒C的原理和方法。 二、原理：

还原型抗坏血酸能还原染料2.6-二氯酚靛酚，该染料在酸性中呈红色，被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2.6-二氯酚靛酚后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2.6-二氯酚靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。 反应式如下：

还原型抗坏血酸染料(粉红色)脱氢型抗坏血酸染料(无色) 三、试剂：

(1)2％草酸溶液：溶解20克草酸结晶于200毫升水中，然后稀释至1000ml。 (2)1％草酸溶液：取上述2％草酸溶液500ml，用水稀释至1000m1。 (3)抗坏血酸标准溶液：准确称取20mg抗坏血酸，溶于1％草酸溶液中，移入lOml量瓶中，并用1％草酸溶液稀释至100毫升，混匀，置冰箱中保存。 使用时吸取上述抗坏血酸5ml，置于50毫升容量瓶中，用1％草酸溶液定容之。此标准使用液每毫升含0.02mg维生素C。

标定：吸取标准使用液5m1于三角烧瓶中，加入6％碘化钾溶液0.5ml，1％淀粉溶液3滴，再以0.001N碘酸钾标准溶液滴定，终点为淡蓝色。

计算如下：

V1×0.088

抗坏血酸浓度（mg/ml）=------------------- V2

V1：滴定时所耗0.001N碘酸钾标准溶液的量(ml) V2：所取抗坏血酸的量(ml)

0.088：lml O.0001N碘酸钾标准溶液相当于抗坏血酸的量(mg／m1) (4)2.6：二氯靛酚溶液：称取碳酸氢钠52mg，溶于200ml沸水中，然后称取2.6-二氯靛酚50mg，溶解在上述碳酸氢钠的溶液中，待冷，置于冰箱中过夜，次日过滤置于250ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此液应贮于棕色瓶中并冷藏，每星期至少标定1次。

标定方法：取5m1已知浓度的抗坏血酸标准溶液，加入1％草酸溶液5ml，摇匀，用上述配制的染料溶液滴定至溶液呈粉红色于15秒不褪色为止

每毫升染料溶液相当于Vc的毫克数=滴定度(T) C×V1

=---------- V2

式中：

C；抗坏血酸(V)的浓度(mg／m1) Vl：抗坏血酸的量(m1) V2：消耗染料溶液量(m1)

(5)0.1N碘酸钾溶液：精确取干燥的碘酸钾0.100ml。0.3567克用水稀释至100ml.

(6)0.001N碘酸钾溶液：吸取0.1N碘酸钾溶液1ml，用水稀释至100毫升。此溶液1ml相当于抗坏血酸0.088mg。 (7)1％淀粉溶液。 (8)6％碘化钾溶液。 四、操作方法：

1、称取适量(50.0-100.0克)样品，加等量的2％草酸溶液，倒入组织捣碎机中捣成匀浆。称取10.00-30.00克浆状样品(使其含有抗坏血酸1-5mg)，置于小烧杯

中，用1％草酸溶液将样品移入100毫升容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀。

2、将样液过滤，弃去最初毫升滤液。若样液具有颜色，用白陶土(应选择脱色力强但对抗坏血酸无损失的白陶土)去色，然后迅速吸取5-lOml滤液，置于50ml三角烧瓶中，用标定的2.6-二氯靛酚染料溶液滴定之,直至溶液呈粉红色于15秒内不褪色为止。 计算：

V .T

每百克样品中抗坏血酸毫克数＝------------×100 W

V：滴定时所耗去染料溶液的量(ml)；

T：lml染料溶液相当于抗坏血酸标准溶液的量(mg) W：滴定时所取的滤液中含样品量(g)． 五、说明：

(1)所有试剂配制最好用重蒸馏水。

(2)样品取样后，应浸泡在已知量2％草酸溶液中使抗坏血酸受损失。以免发生氧化，使抗坏血酸受损失。

(3)对动性的样品可用10％三氯醋酸代替2％草酸溶液提取；对含有大量Fe的样品，如储藏过久的罐头食品可用8％醋酸溶液代替草酸溶液提取。 (4)整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。

(5)若样品滤液无色，可不加色陶土。须加白陶土的，要对每批新的白陶土测定回收率。加白陶土脱色过滤后，样品要迅速滴定。

(6)滴定开始时，染料溶液要迅速加入，直至红色不立即消失而后尽可能一滴一滴地加入，并要不断振动三角烧瓶，直至呈粉红色于15秒内不消失为止。样品中可能有其他杂质也能还原2.6-二氯靛酚，但一般杂质还原该染料的速度均较抗坏血酸慢，所以滴定时以15秒钟红色不褪为终点。

(7)测定样品溶液时必须同时作一空白对照，样品溶液滴定的毫升数须扣除空白液滴定的毫升数。

实验法(二) 2.4-二硝基苯肼法