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不同条件下Percoll密度梯度离心分离组织细胞浮游生物的

比较

何方刚;刘良;黄代新;杨庆恩;李小廷;尹慧;翟仙敦

【期刊名称】《中国法医学杂志》 【年(卷),期】2007(022)003

【摘要】目的 实验评估不同条件下Percoll密度梯度离心分离组织中浮游生物的效果.方法 大白兔肝组织匀浆后与3种藻类混合物混匀,分为混匀高速分离组、混匀低速分离组、叠加高速分离组、叠加低速分离组和未分离组(对照组)进行Percoll密度梯度离心分离浮游生物,镜检并提取其DNA,用PCR技术分别检测浮游生物16S rDNA和叶绿素基因特异性片段.结果 混匀高速分离组有较多浮游生物呈分层条纹状分布于离心管中部,叠加高速分离组浮游生物紧邻组织细胞层下,低速分离组见较少浮游生物紧邻于组织细胞层之下,未分离组见浮游生物和组织细胞混杂沉于管底;经DNA检测,各分离组组织细胞层下液体均可检出浮游生物的1条447bp 16S rDNA片段及1条194bp叶绿体/叶绿素脱辅基蛋白基因片段,未分离组均未检出扩增产物且背景较深.结论 混匀加样方式进行高速Percoll密度梯度离心,合并收集组织细胞层下所有液体,是分离浮游生物的最有效方法.

【总页数】4页(153-156)

【关键词】法医病理学;溺死;浮游生物;密度梯度离心;Percoll液 【作者】何方刚;刘良;黄代新;杨庆恩;李小廷;尹慧;翟仙敦

【作者单位】华中科技大学同济医学院法医学系,湖北,武汉,430030;武汉大学医学院法医学教研室,湖北,武汉,430072;华中科技大学同济医学院法医学系,湖北,