饱和硫酸铵溶液的配制 下载本文

内容发布更新时间 : 2024/12/23 23:08:54星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

①在25℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每升溶液所加固体硫酸铵的克数。 1. 2. 调整硫酸铵溶液饱和度计算表(0℃)

①在0℃下,硫酸铵溶液由初浓度调到终浓度时,每100毫升溶液所加固体硫酸铵的克数。

25℃下100%硫酸铵是1L水中约加780g硫酸铵。可以在加进去之后,用微波炉加热到溶解为止,然后放置在过夜,第二天就会有晶体析出,这就可以了。

双蒸水中加入过量硫酸铵,热至50-60度保温数分钟,趁热滤出沉淀,在0度或25度平衡1-2天,有固体析出时即达100%饱和度,以氨水调节PH值至7.0。

硫酸铵在水中的溶解度,100度时为1.034g/ml,0度时为0.706g/ml 。因此,每100ml蒸馏水加90gAR级结晶硫酸铵,80度溶解,趁热过滤,降至室温后即有结晶析出,应任其留存瓶中,使用前吸出所需的量,用28%的氨水调PH至7.2即可。结晶(要留着,随着温度变化,溶解度也会变化,你总要保证溶液中是饱和的,所以结晶留在瓶底,不需要再过滤,使用时取上面的溶液即可。pH7.0或7.2影响不大,也有调到7.4的,因为最后沉淀的蛋白一般都是用PBS稀释的。)

最方便的就是500ml水加半瓶250g硫酸铵剧烈搅拌,上层澄清的就是饱和的了。 另外较快达到饱和状态的方法是,将过量的硫酸铵(参考不同温度下的溶解大多数,或干脆多加点)放在水浴箱内高温溶解,取出致室温放置至其平衡(会有硫酸铵重新析出),上清即为室温下的饱和硫酸铵

先将硫酸氨80克溶解到100水中,加热到80左右,溶解部分过滤,其余的再溶,仍有一部分结晶,过滤的溶液当降到室温的时候就会有结晶,平衡一两天,取上清用同时氨水调节PH值用。

硫酸铵沉淀主要分为两种形式:

1.将事先配好的饱和硫酸铵溶液加入目标溶液中,这种方法精确度高,硫酸铵是弱酸性的,事先调好pH后,再补入溶液中pH变化小,适合于对pH敏感的蛋白(酶类)或要求比较高的实验。

2.直接将固体硫酸铵补入目标溶液中,这种方法比较快速,但是加入后溶液pH值会有一定程度的降低,适合于对pH不敏感的蛋白,这种操作应该能满足一般实验的要求。