内容发布更新时间 : 2024/6/30 23:25:51星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

使用image J软件测定westernblot 结果的操作方法

1打开您的文件。

2 Image>Type >8-bit to上单击将图像转换为灰度图像。

3进入Process>Subtract Background rolling ball radius为50。这消除了一些图像的背景着色。 4 进入Analyze>Set Measurements, 勾选Area, Mean Gray Value, 和Integrated Density. 5进入Analyze>Set Scale, 依次输入像素值 \

6进入Edit>Invert（或按Ctrl+ Shift+ I）反转图像上的色彩。现在条带变成亮色，背景变成暗区。这便于准确测定蛋白的表达量。 7选择Freehand Selection工具

8使用Freehand selections工具沿目标条带边缘画线，并将目标条带圈起来，画的过程中注意判断条带边缘。（我测试的心得：可以把照片放大，这样徒手画的边缘误差会小，或者画三次，

三个结果取平均数）

9 点击analyze>measure(或ctrl+M) “results”窗口会弹出，您在步骤4中选择的测指标的值

会出现。需要注意的是集成密度值（最后一列）是面积和平均灰度值的乘积。

10使用Freehand工具继续选择一个条带，选好后按ctrl+m进行测量，results窗口会增加一列数据。重复此步骤测量所需的所有条带。

11完成测量后，可以在results窗口中的edit，select all（ctrl+A），copy（ctrl+C），可以粘贴到excel中供统计使用。