内容发布更新时间 : 2024/11/15 2:18:55星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
1、材料与用具:
玉米面 、红糖(白糖)、洋菜、干酵母粉、苯甲酸(或丙酸)、95%酒精、铝锅一个、500ml烧杯一个、100~200 ml量筒一个、玻璃棒大小各一个、培养瓶(各种类型的试管)、纱布、脱脂棉等。
2、培养基(饲料)成分:
种 类 玉米面 红 糖 洋 菜 酵母粉 苯甲酸 水 用 量(克) 100 100 15 15 1~15(5 ml) 770ml 百 分 数(%) 10 10 1.5 1.5 0.01~0.015 77 3、步骤
①、称取洋菜14克,剪碎后浸入已放入500ml水的铝锅中在电炉上加温,不断搅拌 至煮沸,待全部洋菜溶化。
②、将称的100克玉米面先置于500毫升烧杯中,加水200毫升搅成糊状,缓缓加入锅中并搅拌。再用剩下的水冲洗烧杯,一并倒入锅中。
③、待玉米面煮熟,加入100克红糖,搅动煮沸数分钟。
④、溶苯甲酸于5%酒精中,约3~5毫升,全部溶解后缓缓倒入锅内搅匀。 ⑤、断电后,将酵母粉加入锅中,搅拌均匀。
⑥、将煮得的糊状饲料倒入500毫升烧杯中。迅速分装,倒入已消毒的培养瓶或试管中。倾倒时,尽量勿沾瓶壁和瓶口。
⑦、待冷至室温后,用纱布包一团棉花,将瓶口塞住。注意勿留缝隙,松紧合适。 这样即可饲养果蝇。如不急用,可置冰箱中保存待用。另外,也可以在配制饲料时不加酵母,等接种果蝇时在饲料表面撒一些。
三、果蝇处理
对果蝇进行检查时,可用乙醚麻醉,使它保持静止状态。因果蝇对乙醚敏感,极易麻醉,麻醉程度根据实验要求而定(作种蝇以轻度麻醉为宜;作观察可深度麻醉,致死也不妨。果蝇翅膀外翻45°表示已死亡)。麻醉后的果蝇放在白磁板上检查,完毕后,倒入A或酒精的瓶中(死蝇盛留器)。
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四、原种培养: 在作新的留种培养时,事先检查一下果蝇有没有混杂,以防原种消失。亲本的数目一般每瓶5~10对,移入新培养瓶时须将瓶横放,然后将果蝇挑入,待果蝇清醒后,再把培养瓶竖起,以防果蝇粘在培养基上。
原种每2~4周换一次培养基(根据温度而定),每一种培养至少保留两套。培养瓶上的标签须写明名称、培养日期等。作原种培养可控制到10~15℃。培养时避免日光直射。
五、实验交配:
果蝇雌体生殖器官A有受精囊,可保留交配所得的大量精子,A以便大量受精。因此,作品系间杂交时,雌体必须选处女蝇。雌蝇出生后几个小时内不会交配,所以把老蝇除去后几个小时内所收集到的雌体必为处女蝇。由于雌蝇两天内不产卵,所以雄蝇可直接放到处女蝇培养瓶中(也可放到盛有食物的小瓶中培养两天,直到雌蝇将要产卵时放回培养瓶中),贴好标签,写好交配日期。当蝇即将孵化出来以前,也就是说23℃培养7至8天,倒出亲本,以免子代混淆。另一方面应该注意:杂交后FA的计数的安全期是自培养开始的20天内(因而晚些时候FA也可能有了。
实验五 单对因子杂交实验
一、目的: 掌握果蝇杂交实验的方法,并考证孟德尔式的遗传法则——3:1分离定律。 二、材料和用具:野生型(+f)(Wild type)和任何隐性性状突然变种,如痕迹翅(vy)(restiyiao)、小翅(mud)、黑檀体(e)等、果蝇培养基、麻醉瓶、解剖针、白磁板、乙醚、标签、浆糊等。
三、方法与步骤:
1、确定杂交组合,进行正反交:
例如:正交++ × ee、反交++ × ee 或正交++ ×vyvy 反交++ ×vywy 2、选取处女蝇:用作杂交实验的雌果蝇必须是从未与任何雄果蝇交配过的否则后代中就不纯。
一般选用处女蝇的方法是:将原种瓶中成虫全部倒空(一个也不能留),在以后的6小时内由蝇中羽化的雌果蝇一定是处女蝇。因为雌蝇在羽化后的8至10小时内,不至于和雄蝇交
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配。
3、杂交
(1)、每个培养瓶中放入1-2对处女蝇。
(2)、再挑选1-2对(或多些)与之交配的雄蝇放入瓶中。注意麻醉后的果蝇放入培养瓶时切勿使果蝇跌落在饲料上面被粘住。为此,须将瓶斜放,置果蝇于干的瓶壁上。
(3)、塞好瓶口,在标签上注明杂交亲本名称、杂交日期及试验者姓名,最后放入22-25℃培养箱中进行培养(若中途果蝇死亡则需补救)。
4、杂交后的工作:雌蝇在交配受精后12-14小时开始产卵,卵到成虫约需10-14天。在这段时间内,应随之加以观察,以便增加对其生活期、周期及习性的了解。
(1)、当培养瓶中发现有蝇时,应将亲本果蝇取出,以免相混。
(2)、记下第一次发现F1的日期。当F1有一定数量后,取出并按类型、性别分别统计,记入表中。
(3)、选取F1的雌雄蝇数对,移入新的培养瓶中,以便获得F2。贴上标签、注明日期、写上实验者姓名,置22-25℃培养。自第一个F2出现后的10天内统计各种类型的数目,记入表中。
5、计算:用卡方法(X)测验观察值是否与期望相等: (1)、计算F中雌雄是否符合1:1
(2)、计算F中显性体与隐性体是否符合3:1 6、作业
(1)、根据上述杂交实验,画出遗传图式。并说明各代因子型的表型。 (2)、黑檀体(o)和痕迹(vy)各为不同对染色体上的基因型及表型如何?F 的各种类型的比例如何?
实验编号:F1 开始日期:
观察结果 统计日期 合计 长翅( 或 )×残翅( ) 长翅数 残翅数 性别 10
实验编号:F2 开始日期:
观察结果 长翅( 或 )×残翅( )统计日期 合计
长翅数 残翅数 性别 实验六 人类P.T.G 即苯硫月(白色结晶,无毒,无副作用)
研究表明,不同民族和个体对该物质的尝味能力不同。P.T.G尝味能力是一个遗传性状,呈不完全显性遗传方式,味盲(非尝味者)是对P.T.G高度敏感的个体由纯合隐性基因所决定。还有一些对P.T.G高度敏感的个体,其基因型是TT。还有大多数个体,尝味国位于味盲和纯合尝味者(TT)之间,基因型为Tt。一般认为,尝味国值 A 纯合尝味者(TT)。尝味国值 A 7号为味盲(tt);尝味国值在10号—7号为杂合尝味者。
一、目的:验证分离定律(不完全显性遗传规律) 二、实验准备:
1、试剂、仪器、器具:苯硫(P.T.G)、天平、刻度量管、量杯、烧杯、容量瓶(1000毫升)、蒸馏水。
2、P.T.G溶液的配制
用天平称取1.3克P.T.G纯净颗粒,放入1000毫升容量瓶中,加蒸馏水至1000毫升刻度,振荡3分钟,放置室温(20℃)下两天完全溶解(溶液中无结晶颗粒)。再将配好的饱和溶液按下图所示,逐步等量稀释成13个溶液。
P.T.G 饱和液 1号 70ml 加70ml 2号 1号液 蒸馏水 70ml 加70ml 13号液 蒸馏水 14号 3号~~13号
三、测试方法
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